當前位置:上海西格生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR檢測試劑盒>> 50T科恩酒曲菌PCR檢測試劑盒
產品及特點:
本產品是一管式超快植物種子和葉基因組DNA 提取試劑,得到的產物可以直接用于PCR。整個過程簡單快速,尤其適合于大規模的轉基因植物篩選時樣品的制備。
1. 快速,整個過程只需要15分鐘左右,不需要液氮對植物組織進行冰凍、機械處理、純化或者DNA的沉淀。運輸及保存2. 一管式,在一個試管內完成所有操作,不容易交叉污染。常溫運輸及保存,有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR,剩余樣品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自動化,適合于海關和企業進行大規模的GMO PCR 篩選。
5. 適用于大多數植物葉和種子。
本試劑盒不但準確、快速、靈敏,還具有以下特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單。
2. 預期的 PCR 產物長度為 494 bp。
3. 本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產品名稱 | |
英文名稱 | Rhizopus cohniiPCR |
貨號 | XG-P2020 |
使用及效果:將壓碎的一小重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大小)或直徑約為0.5-0.7 cm(或面積相當的其他形狀)的植物葉直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當于PCR 體積的1/10)作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
1 確定PCR反應液或其他酶促反應液的體積。將PCR反應液或其他酶促反應液轉移至一個新的1.5 ml離心管中,向其中加入等體積溶液BD。混合均勻。
2 將步驟1所獲溶液置于DNA純化柱中,靜置2min。
3 12,000 rpm離心1min,棄濾液。
注:此時DN段被吸附于DNA純化柱中的硅膠膜上。
若溶液體積大于純化柱容積(800 μl),可分兩次離心。
4 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm離心1min,棄濾液。
注:溶液PE初次使用前用無水乙醇按1: 4稀釋,即含80%乙醇。
此步驟的作用是去除硅膠膜上吸附的酶蛋白、核酸引物、dNTP等其他雜質,以獲得高質量DN段。
5 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm離心1min,棄濾液。
6 12,000 rpm 離心 3min,以*去除純化柱中的液體。
注:此步驟的作用是去除殘留乙醇,避免殘留乙醇影響后續酶促反應。同時也利于DN段的充分溶解。
7 將離心柱置于新的1.5 ml離心管中。向純化柱的處,懸空滴加30-100 µl溶液Eluent(60℃預熱),靜置2min。12,000 rpm 離心1min,管底即為目的DN段。貯存于-20℃。
注:溶液Eluent可用無菌雙蒸水代替,但其pH需為8.0-8.5,加入體積視DNA目的段的多少、用戶對目的段濃度要求而定。
對溶液Eluent 60℃預熱,會提高提取DNA目的段的產量。
樣品 DNA 的制備:
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀釋陽性對照(以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DNA 段作為陽性對照。
2.標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6.換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.換槍頭,在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
8.重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。設置 qPCR 反應(20 μL 體系,在樣品制備室進行)
9.在 PCR 管中加入下列成分(待測樣品需要做三次重復,下表只列出一次。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后*后加)
副溶血性弧菌增菌液250g用于副溶血性弧菌的增菌培養
假單胞cfc選擇性培養基 250g 用于假單胞菌選擇性分離培養。
Campy-Cefex 添加劑 Campy-Cefex Supplement 2ml*10 每支添加于200ml Campy-Cefex 瓊脂基礎中
Tergitol-7瓊脂250g/瓶用于大腸菌群的鑒定(NMKL),每500ml培養基中添加0ncubationmediaTergitol-7瓊脂250g/瓶用于大腸菌群的鑒定(NMKL),每500ml培養基中添加0101
HE瓊脂平板(9cm) 10個/包 用于沙門氏菌的選擇性分離培養MRS瓊脂平板(9cm)10個/包用于食品中乳酸菌總數測定 進口分裝 氘代仿(0.6ml x 10) -D : 865-49-6 質量規格: D,99.8%+TMS 0.03%,帶劃痕
BCYE-CYSAgar 進口分裝 N,N-二-d1(1g ) N,N-Dimethyl-1-D : 2914-27-4 質量規格: D,99.5% DMF
LST 進口分裝 (色譜級) Methanol : 67-56-1 質量規格: 梯度色譜級, ≥99.9%
李氏菌增菌肉湯(LB2)9ml*20支/包用于李氏菌二步增菌 進口分裝 1-丙烷磺酸鈉[離子對色譜級] IPC-ALKS-3 : 14533-63-2 質量規格: 離子對色譜用試劑PPT1 Others Human 人 PPT1 / Palmitoyl-protein thioesterase 1 人細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0267CNE-2Z(人鼻咽癌細胞)5×106cells/瓶×2
人主動脈內皮細胞cDNAHAEC cDNA
豬腎傳代細胞;IBRS-2 人B淋巴母細胞,HMy2.CIR細胞 LⅡ細胞,KM小鼠網織細胞肉瘤瘤株
穩定表達EBNA1的人胚腎細胞;293E
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Egypt/2321-NAMRU3/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)
科恩酒曲菌PCR檢測試劑盒ATCC培養基:2693改良Dixon(mDixon)250g用于真菌培養
m HPC瓊脂 高營養培養基,用于水檢測中分離、計數異養或“富營養”的細菌 500g incubation media m HPC瓊脂 高營養培養基,用于水檢測中分離、計數異養或“富營養”的細菌 500g
短雙歧桿菌 分析檢測 支/瓶
麥康凱瓊脂(SMAC)平板(9cm)用于大腸桿菌O離培養
改良綠色酵母菌和真菌肉湯 250g 用于飲料中真菌及酵母菌檢測(無水)(標準品) 進口分裝 人生長激素結合蛋白(P)ELISA試劑盒
(雌酚)(標準品) 進口分裝 人神經激肽A(NKA)ELISA試劑盒
鹽酸/鹽酸 進口分裝 人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒
鹽酸表 進口分裝 人醛固(ALD)ELISA試劑盒CD320 Others Mouse 小鼠 CD320 / 8D6A 人細胞裂解液 (陽性對照)
胎盤滋養層細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
大鼠胚胎心肌細胞;H9c2(2-1)
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS3 肝癌細胞,RH-35細胞 EL-4細胞,小鼠淋巴瘤
人胚胎腸粘膜組織來源細胞;CCC-HIE-2
PVR Others Cynomolgus 食蟹猴 PVR / CD155 人細胞裂解液 (陽性對照)
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