當前位置:上海西格生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR檢測試劑盒>> 50T卟啉單胞菌通用PCR檢測試劑盒
產品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
產品名稱:卟啉單胞菌通用PCR檢測試劑盒
英文名稱:Porphyromonas spp.PCR
編號:XG-P1969
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
包裝規格及成分:
編號 | 成分 | 十孔盒包裝(去紙托) |
試劑一 | 2×PCR MagicMix | 1mL(亮黃蓋) |
試劑二 | 源性成分 PCR 引物混合液 | 100 uL(白蓋) |
試劑三 | 源性成分 PCR 陽性對照 | 50 uL(黃蓋) |
試劑四 | 超純水 | 1 mL(本色蓋) |
試劑五 | DNA 釋放劑試用裝 | 50 次(成分見下) |
試劑六 | 免 DNA 提取試劑溶液 A 成分一 | 50 uL(白蓋) |
試劑七 | 免 DNA 提取試劑溶液 A 成分二 | 100uL(綠蓋) |
試劑八 | 免 DNA 提取試劑溶液 B | 400 uL(紅蓋) |
試劑九 | 使用手冊 | 400 uL(紅蓋) |
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數值為橫軸,繪制標準曲線
技術原理:
DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈式反應實驗中發現,DNA在高溫時也可以發生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性)
發現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。
改良馬丁瓊脂培養基(真菌營養瓊脂培養基)2250g用于真菌培養及藥品和生物制品無菌檢查用
植物蛋白胨肉湯 Vegetable Peptone Broth Oxoid 500g incubation media 植物蛋白胨肉湯 Vegetable Peptone Broth Oxoid 500g
米黑根毛霉 產纖維素酶,用于釀造白酒。 支/瓶
ListeriaEnrichmentBrothBase
NystatinTestMediumLead tetraacetate 四乙酸鉛 546-67-8
3-(METHACRYLOYLOXY)PROPYLTRIS(TRIMETHYLSILOXY)SILANE 丙烯酰氧丙基三(三硅氧烷基)硅烷 17096-07-0
LEAD TELLURIDE 碲化鉛 1314-91-6
TETRAPHENYLLEAD 四苯基鉛 595-89-1IFNA8 Others Human 人 Ierferon alpha-B / IFNA8 人細胞裂解液 (陽性對照)
支氣管平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ2 cDNA-TGF-β Dinding Protein cDNA
中國倉鼠卵巢細胞-二還原酶缺陷型;CHO/dhFr- 喉表皮樣癌細胞,HEp-2細胞 SF-9細胞,昆蟲細胞系
人胚肺成纖維細胞;CCC-HPF-1
HA Others H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Wisconsin/67/X-161/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)
卟啉單胞菌通用PCR檢測試劑盒BLAgarMediumBase
營養瓊脂斜面 Nutrient agar slant 用于細菌的純化培養
酵母浸粉 Yeast Extract Powder 250 培養基原材料,提供細菌生長所需的族
SC瓊脂基礎250g/瓶用于產氣莢膜梭菌的計數和培養(ISO),需添加2及2incubationmediaSC瓊脂基礎250g/瓶用于產氣莢膜梭菌的計數和培養(ISO),需添加2及21001
MethylRedIndicatorBox大鼠胰島素 進口分裝 Methyl ganoderate H Methyl ganoderate H 98665-11-3 C33H46O9 ≥98%
大鼠白介素-3 進口分裝 Notoginsenoside R2 Notoginsenoside R2 80418-25-3 C41H70O13 ≥98%
大鼠巨噬細胞炎性蛋白-2 進口分裝 Platycoside A Platycoside A 209404-00-2 C58H94O29 ≥98%
大鼠神經營養素4 進口分裝 Pseudoginsenoside RT5 Pseudoginsenoside RT5 98474-78-3 C36H62O10 ≥98%IL9 Others Human 人 IL-9 / Ierleukin-9 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
小氣道平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
大鼠胚胎心肌細胞;H9c2(2-1)
HCT 116細胞,結腸癌細胞 人肝癌細胞,Bel-7404細胞 CL-0016A549(人非小細胞肺癌細胞)5×106cells/瓶×2
二還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細胞;CHO/dhFr-
CSF1R Others Human 人 M-CSFR 人細胞裂解液 (陽性對照)
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