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產品名稱:豬腺病毒PCR檢測試劑盒
英文名稱:Porcine Adenovirus(Swine Adenovirus)PCR
編號:XG-P1941
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
產品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
包裝規格及成分:
編號 | 成分 | 十孔盒包裝(去紙托) |
試劑一 | 2×PCR MagicMix | 1mL(亮黃蓋) |
試劑二 | 源性成分 PCR 引物混合液 | 100 uL(白蓋) |
試劑三 | 源性成分 PCR 陽性對照 | 50 uL(黃蓋) |
試劑四 | 超純水 | 1 mL(本色蓋) |
試劑五 | DNA 釋放劑試用裝 | 50 次(成分見下) |
試劑六 | 免 DNA 提取試劑溶液 A 成分一 | 50 uL(白蓋) |
試劑七 | 免 DNA 提取試劑溶液 A 成分二 | 100uL(綠蓋) |
試劑八 | 免 DNA 提取試劑溶液 B | 400 uL(紅蓋) |
試劑九 | 使用手冊 | 400 uL(紅蓋) |
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數值為橫軸,繪制標準曲線
肝湯250g用于嗜熱菌芽孢的鑒別培養
現隱肉湯 Presence Absence Broth 用于水中大腸菌群計數(US-EPA方法)
麥康凱瓊脂(不含鹽) Maconkey Agar(without salt) 250 用于腸道致病菌的選擇性分離、培養(OXOID方法)
酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養基250g/瓶用于霉菌、酵母菌計數incubationmedia酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養基250g/瓶用于霉菌、酵母菌計數
ModifiedMacConkeyBrothAdditivesH-ASN(TRT)-2-CLTRT RESIN H-ASN(TRT)-2-CHLOROTRITYL RESIN
Lithium benzoate 苯鋰 553-54-8
H-CYS(ACM)-2-CLTRT RESIN H-CYS(ACM)-2-CHLOROTRITYL RESIN
H-CYS(TRT)-2-CLTRT RESIN H-CYS(TRT)-2-CHLOROTRITYL RESINCFR Others Rat 大鼠 CFR / CFR-alpha 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
人小氣道上皮細胞HSAEpiC
豬腎細胞;PK-15
R 1610細胞,中國倉鼠體細胞 人胰腺癌細胞,PC-3細胞 CM-R101大鼠腦動脈血管平滑肌細胞*培養基100mL
大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞;RBL-2H3
IL4R Others Human 人 IL4R / CD124 人細胞裂解液 (陽性對照)
豬腺病毒PCR檢測試劑盒BPLAgar
MZACAgar
哥倫比亞MUG培養基 Columbia- MUG Medium 250 用于大腸桿菌的熒光檢測(SN標準)
蛋白胨-鹽溶液250g/瓶用于樣品的稀釋(NY)incubationmedia蛋白胨-鹽溶液250g/瓶用于樣品的稀釋(NY)
營養瓊脂平板(9cm) 10個/包 細菌計數、不含糖,可作血瓊脂基礎和傳代用人軟骨素(CS)酶聯免疫吸附測定試劑盒 進口分裝 4478-93-7 Sulforaphane C6H11NOS2 177.29 Miscellaneous >=98% 20mg
人XIIIB多肽(F13B)酶聯免疫吸附測定試劑盒 進口分裝 481-53-8 Tangeretin C20H20O7 372.37 Flavonoids 0.98 20mg
人補體1q(C1q)酶聯免疫吸附測定試劑盒 進口分裝 88495-63-0 Artesunate C19H28O8 384.42 Sesquiterpenoids >=98% 100mg
人補體片斷5b(C5b)酶聯免疫吸附測定試劑盒 進口分裝 88664-08-8 11-Hydroxy-sugiol C20H28O3 316.43 Diterpenoids >=98% 5mgHA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/2/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0454TE-11(人食管癌細胞)5×106cells/瓶×2
人膀胱平滑肌細胞RNAHBdSMC miRNA5 μg
兔眼Tenon's囊成纖維細胞;RYTF 肝癌細胞,Hep 3B2.1-7細胞 IR983F細胞,大鼠骨髓瘤細胞
人男性正常細胞;Hs68
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Hong Kong/483/97) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照)
技術原理:
DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈式反應實驗中發現,DNA在高溫時也可以發生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性)
發現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。
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