當前位置:上海西格生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR檢測試劑盒>> 50T巴斯德氏桿菌屬通用PCR檢測試劑盒
使用及效果:將壓碎的一小重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大小)或直徑約為0.5-0.7 cm(或面積相當的其他形狀)的植物葉直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當于PCR 體積的1/10)作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
本試劑盒不但準確、快速、靈敏,還具有以下特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單。
2. 預期的 PCR 產物長度為 494 bp。
3. 本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產品名稱 | |
英文名稱 | Pasteurella spp.PCR |
貨號 | XG-P1894 |
樣品 DNA 的制備:
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀釋陽性對照(以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DNA 段作為陽性對照。
2.標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6.換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.換槍頭,在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
8.重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。設置 qPCR 反應(20 μL 體系,在樣品制備室進行)
9.在 PCR 管中加入下列成分(待測樣品需要做三次重復,下表只列出一次。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后*后加)
1 確定PCR反應液或其他酶促反應液的體積。將PCR反應液或其他酶促反應液轉移至一個新的1.5 ml離心管中,向其中加入等體積溶液BD。混合均勻。
2 將步驟1所獲溶液置于DNA純化柱中,靜置2min。
3 12,000 rpm離心1min,棄濾液。
注:此時DN段被吸附于DNA純化柱中的硅膠膜上。
若溶液體積大于純化柱容積(800 μl),可分兩次離心。
4 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm離心1min,棄濾液。
注:溶液PE初次使用前用無水乙醇按1: 4稀釋,即含80%乙醇。
此步驟的作用是去除硅膠膜上吸附的酶蛋白、核酸引物、dNTP等其他雜質,以獲得高質量DN段。
5 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm離心1min,棄濾液。
6 12,000 rpm 離心 3min,以*去除純化柱中的液體。
注:此步驟的作用是去除殘留乙醇,避免殘留乙醇影響后續酶促反應。同時也利于DN段的充分溶解。
7 將離心柱置于新的1.5 ml離心管中。向純化柱的處,懸空滴加30-100 µl溶液Eluent(60℃預熱),靜置2min。12,000 rpm 離心1min,管底即為目的DN段。貯存于-20℃。
注:溶液Eluent可用無菌雙蒸水代替,但其pH需為8.0-8.5,加入體積視DNA目的段的多少、用戶對目的段濃度要求而定。
對溶液Eluent 60℃預熱,會提高提取DNA目的段的產量。
緩沖蛋白胨水(BPW)250g用于沙門氏菌前增菌培養,亦可用于李氏菌前增菌培養(GB、SN標準)
硅酸鹽細菌培養基(含瓊脂) 250g 用于硅酸鹽細菌的分離培養
醋酸鉛培養基 Lead Acetate Medium 250 用于硫化試驗
酸性肉湯250g/瓶用于酸性罐頭食品無菌檢驗incubationmedia酸性肉湯250g/瓶用于酸性罐頭食品無菌檢驗
結晶紫中性紅膽鹽瓊脂平板(9cm) 10個/包 用于大腸菌群的固體平板檢測AMINOGUANIDINE HEMISULFATE 基胍 996-19-0
Methyl-5-norbornene-2,3-dicarboxylic anhydride 納迪克酸酐 25134-21-8
Aminoguanidine bite 基胍碳酸鹽 2582-30-1
1-Methyl-3- 1--3- 4245-76-5小鼠神經皮質細胞(MN-c)(1×106)
人滋養層絨毛細胞總RNAHVT NA
家貓皮膚細胞;FCA-S1
小鼠B細胞雜交瘤細胞;W6/32 小鼠成年表皮角質形成層細胞*培養基 100mL
SF9, 昆蟲卵巢細胞 其它
CD19 Others Mouse 小鼠 CD19 / Leu-12 人細胞裂解液 (陽性對照)
巴斯德氏桿菌屬通用PCR檢測試劑盒C.L.E.DMediumSupplement
50260 水解乳蛋白 BR 400g 乳蛋白水解而成 incubation media 50260 水解乳蛋白 BR 400g 乳蛋白水解而成
糞腸球菌(糞鏈球菌) 釀造白酒 支/瓶
ModifiedSkirrowAgar
InorganicAgar豬組織因子elisa試劑盒 進口分裝 4-丙氧基苯二甲(>95.0%(GC)) 4-Propoxyphthalonitrile : 106144-18-7 質量規格: >95.0%(GC)
人B-淋巴細胞趨化因子1(BLC-1/CXCL13)ELISAKit 進口分裝 15-冠-5-醚(>97.0%(GC)) 15-Crown 5- : 33100-27-5 質量規格: >97.0%(GC)
人紅細胞刺激因子(ESF)ELISAKit 進口分裝 1,4,7-三硫雜環壬烷(>98.0%(GC)) 1,4,7-Trithiacyclononane : 1707085 質量規格: >98.0%(GC)
人可溶性細胞因子受體(sCKR)ELISAKit 進口分裝 1,6,20,25-四氮雜[6.1.6.1]對環芳烷(>98.0%(HPLC)) 1,6,20,25-Tetraaza[6.1.6.1]paracyclophane : 74043-83-7 質量規格: >98.0%(HPLC)DMT1 Others Human 人 DNMT2 / DMT1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0346HBE(人支氣管上皮樣細胞)5×106cells/瓶×2
人肺泡上皮細胞總RNAHPAEpiC NA
K562細胞,慢性髓原白血病 人胚肺二倍體細胞,HLF-02細胞 lovo, 人結腸癌細胞
豹貓肺成纖維樣細胞;LCL1
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照)
產品及特點:
本產品是一管式超快植物種子和葉基因組DNA 提取試劑,得到的產物可以直接用于PCR。整個過程簡單快速,尤其適合于大規模的轉基因植物篩選時樣品的制備。
1. 快速,整個過程只需要15分鐘左右,不需要液氮對植物組織進行冰凍、機械處理、純化或者DNA的沉淀。運輸及保存2. 一管式,在一個試管內完成所有操作,不容易交叉污染。常溫運輸及保存,有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR,剩余樣品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自動化,適合于海關和企業進行大規模的GMO PCR 篩選。
5. 適用于大多數植物葉和種子。
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