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產品名稱:奧利華斯病毒PCR檢測試劑盒
英文名稱:Oliveros virus(OLVV)RTPCR
編號:XG-P1850
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
產品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
包裝規格及成分:
編號 | 成分 | 十孔盒包裝(去紙托) |
試劑一 | 2×PCR MagicMix | 1mL(亮黃蓋) |
試劑二 | 源性成分 PCR 引物混合液 | 100 uL(白蓋) |
試劑三 | 源性成分 PCR 陽性對照 | 50 uL(黃蓋) |
試劑四 | 超純水 | 1 mL(本色蓋) |
試劑五 | DNA 釋放劑試用裝 | 50 次(成分見下) |
試劑六 | 免 DNA 提取試劑溶液 A 成分一 | 50 uL(白蓋) |
試劑七 | 免 DNA 提取試劑溶液 A 成分二 | 100uL(綠蓋) |
試劑八 | 免 DNA 提取試劑溶液 B | 400 uL(紅蓋) |
試劑九 | 使用手冊 | 400 uL(紅蓋) |
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數值為橫軸,繪制標準曲線
酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養基(YPD)250g用于測定酵母菌總數
氯血瓊脂基礎 250(g) incubation media 氯血瓊脂基礎 250(g)
乙酰胺酚紅瓊脂 Acetamide Agar 250克 測定綠膿桿菌色素分離、培養
細菌L型分離瓊脂于L型細菌分離培養incubationmedia細菌L型分離瓊脂于L型細菌分離培養
臘樣芽孢桿菌選擇瓊脂基礎 250g 用于臘樣芽孢桿菌選擇性分離培養Glycyrrhizic acid 甘草酸 1405-86-3
Enoxolone 甘草次酸 471-53-4
LIQUIRITIN(SH) 甘草苷 551-15-5
ISOLIQUIRITIN 異甘草甙 5041-81-6CD300LG Others Human 人 CLM-9 / EM4 / CD300LG 人細胞裂解液 (陽性對照)
786-O [786-0], 人腎透明腺癌細胞
表達SV40T和EBNA1的人胚腎細胞;293ET
KC細胞,人腎癌細胞 小鼠腦神經瘤細胞,Neuro-2a[N2a;Neuro-2a]細胞 CL-0373KiMA(人胚腎上皮細胞系)5×106cells/瓶×2
BGC-803(人胃癌細胞) 5×106cells/瓶×2
HWP-c subcutaneous 人類白前脂肪細胞(HWP)皮下 500,000cells 人淋巴成纖維細胞HLF
奧利華斯病毒PCR檢測試劑盒CHO培養基基礎250g用于厭氧菌的糖生化反應
哥倫比亞血瓊脂基礎 Columbia Blood Agar Base 營養非常豐富,用于各種細菌的基礎培養基
肉湯 Arginine Broth acc. To Schubert 250 用于游泳池中假單胞菌檢測(Merck方法)
桔汁肉湯(縮)250g/瓶用于耐酸細菌的培養incubationmedia桔汁肉湯(縮)250g/瓶用于耐酸細菌的培養
PlateCountAgarMUG營養瓊脂 進口分裝 N-芐基甘酸鹽酸鹽 Bzl-Gly-OH•HCl : 7689-50-1 質量規格: 0.98
動力-鹽培養基(A法) 進口分裝 D-丙酰胺鹽酸鹽 D-Alaninamide hydrochloride : 71810-97-4 質量規格: >98%,BR
吐溫80營養瓊脂 進口分裝 D-蘇酸 H-D-Thr-OH : 632-20-2 質量規格: >98%,BR
7.5%化鈉肉湯 進口分裝 噻奈普汀酸;噻奈普汀(標準品) Tianeptine : 66981-73-5 質量規格: HPLC>99%,標準品ADM Others Human 人 ADM / Adrenomedullin 人細胞裂解液 (陽性對照)
肺大靜脈內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
大鼠軟骨細胞*培養基 100mL
COS-1非洲綠猴SV40轉化的腎細胞 Renal cell COS-1 in African green monkey SV40 ansformation DMEM培養基+10%FBS
IFNA13 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNA13 / Ierferon alpha-13 蛋白 (His 標簽)
IR983F(大鼠骨髓瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 多形擬桿菌
技術原理:
DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈式反應實驗中發現,DNA在高溫時也可以發生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性)
發現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。
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