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貨號(hào)	XG-X3290	生長特性	貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣	用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

運(yùn)輸和保存：

干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞

（1）1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。

（2）T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。

商品信息：

名稱產(chǎn)品	EA.hy926人臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞	產(chǎn)品別稱	EA. hy 926; EA hy 926; EAhy 926; EAHY-926; EA.Hy926; EA.hy926; EAhy926; EaHy926; Eahy926
種屬	人	生長特性	貼壁細(xì)胞
換液頻率	2-3次/周	細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣
貨號(hào)	XG-X3290	組織來源	臍靜脈/體細(xì)胞雜交

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

推薦傳代比例 1:3-1:4

背景描述 EA.hy926細(xì)胞是在PEG脅迫下，將原代培養(yǎng)的人臍靜脈細(xì)胞與抗硫niao嘌呤的A549克隆株融合，構(gòu)建的一株人臍靜脈細(xì)胞株。融合子在HAT培養(yǎng)基上生長，并以Ⅷ因子相關(guān)抗原篩選，EA.hy926細(xì)胞已經(jīng)過100次以上的群體倍增(PDLs)。電鏡照片顯示，Weibel-Palade小體的細(xì)胞質(zhì)分布以及組織特異性的細(xì)胞器，分化的內(nèi)皮細(xì)胞特性如血管生成，體內(nèi)平衡-血栓形成，血壓及炎癥反應(yīng)。

組織來源臍靜脈/體細(xì)胞雜交

細(xì)胞類型雜交瘤細(xì)胞

生物安全等級(jí) 1

倍增時(shí)間 ~12-24 hours

抗原表達(dá)情況 Factor VIII-related antigen; Homo sapiens, expressed

基因表達(dá)情況 Factor VIII-related antigen; Homo sapiens.

保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CRL-2922

EA.hy926人臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞

細(xì)胞接收后的處理：

1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。

2）請?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。

EA.hy926人臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠腮腺細(xì)胞	人白介su17(IL-17)ELISA試劑盒
人腎足突細(xì)胞	雞透明質(zhì)suan(HA)檢測試劑盒elisa
人退行性椎間盤髓核細(xì)胞	大鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)試劑盒 ELISA
人外周血單個(gè)核細(xì)胞	甲型流感（）病毒H5N2亞型RT-PCR試劑盒
人食管癌組織源成纖維細(xì)胞	牛細(xì)小病毒PCR試劑盒
人食管癌組織源細(xì)胞	分歧巴貝斯蟲PCR檢測試劑盒
人食管平滑肌細(xì)胞	禽致病性大腸桿菌血清型PCR檢測試劑盒
人食管上皮細(xì)胞	白芷探針法PCR鑒定試劑盒
人視網(wǎng)膜muller細(xì)胞	豬螺桿菌PCR試劑盒
人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞	豬偽狂犬/豬圓環(huán)2型/高致病性豬藍(lán)耳病病毒（PRV-gB/PCV-2/PRRSV-M）核suan檢測試劑盒(三重?zé)晒釶CR法)
人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞	巴西副球孢子菌PCR檢測試劑盒
人輸尿管上皮細(xì)胞	巴西利什曼蟲
人髓母細(xì)胞瘤組織源細(xì)胞	豬水皰疹病毒PCR檢測試劑盒
人胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞	EA.hy926人臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞漢氏巴爾通體PCR檢測試劑盒
人胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞	再生胰島衍生1α/胰石蛋白/胰線蛋白ELISA試劑盒

細(xì)胞處理：

1）凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3. 輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。