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上海西格生物科技有限公司
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改良安卡拉痘苗病毒PCR檢測(cè)試劑盒

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具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)50T

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2020-11-04 13:45:53瀏覽次數(shù):168次

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改良安卡拉痘苗病毒PCR檢測(cè)試劑盒
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產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng),無(wú)非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。

產(chǎn)品名稱:改良安卡拉痘苗病毒PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱:Modified Vaccinia Virus Ankara (MVA)PCR
編號(hào):XG-P1739
分類:PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。

 


注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
包裝規(guī)格及成分:

編號(hào)

成分

十孔盒包裝(去紙托)

試劑一

2×PCR MagicMix

1mL(亮黃蓋)

試劑二

源性成分 PCR 引物混合液

100 uL(白蓋)

試劑三

源性成分 PCR 陽(yáng)性對(duì)照

50 uL(黃蓋)

試劑四

超純水

1 mL(本色蓋)

試劑五

DNA   釋放劑試用裝

50 次(成分見下)

試劑六

免 DNA 提取試劑溶液 A 成分一

50 uL(白蓋)

試劑七

免 DNA 提取試劑溶液 A 成分二

100uL(綠蓋)

試劑八

免 DNA 提取試劑溶液 B

400 uL(紅蓋)

試劑九

使用手冊(cè)

400 uL(紅蓋)

使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線

技術(shù)原理:

       DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
       發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。

氯-蛋白胨緩沖液250g用于藥品中細(xì)菌的前增菌或樣品制備。

亮綠酚紅乳糖蔗糖瓊脂 incubation media 亮綠酚紅乳糖蔗糖瓊脂

AdditivesTyrosineAgar 10支/盒

血瓊脂基礎(chǔ)2號(hào)BloodAgarBaseN0.2供分離營(yíng)養(yǎng)要求非常高的致病菌用,后加血液制成血平板

牛奶培養(yǎng)基 250g 用于乳酸菌凝固力及乳酸鑒別試驗(yàn)2,4-Di-tert-butylphenol  2,4-二叔丁基酚  96-76-4

2,4,6-Tri-tert-butylphenol  2,4,6-三叔丁基酚  732-26-3

BETA-AMYLASE  β-  9000-91-3

AMYLOGLUCOSIDASE  糖化酶  9032-08-0SEMA3A Others Mouse 小鼠 Semaphorin 3A / SEMA3A 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO E6

HOS 骨肉瘤

NCI-H460 [H460]人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞 NCI-H460 [H460] large cell lung cancer cell 1640+10% FBS

VEGFC Protein Rat 重組大鼠 VEGFC / VEGF-C 蛋白 (aa 108-223, His 標(biāo)簽)

大鼠小腦星形膠質(zhì)細(xì)胞(RAc)(5×105) Ishikawa, 人宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系 Human
改良安卡拉痘苗病毒PCR檢測(cè)試劑盒Fraser肉湯增菌液(FB)基礎(chǔ)26080250g用于李斯特氏的選擇性增菌培養(yǎng)(SN/T0-2005,ISO標(biāo)準(zhǔn))。

MRS 肉湯 (CM0359) Oxoid incubation media MRS 肉湯 (CM0359) Oxoid

師崗鏈霉菌 支/瓶

SimmonsCitrateAgar

瓊脂培養(yǎng)基L 250g 用于沙門氏菌的選擇性分離培養(yǎng)三十一烷(Standard for GC≥97.0%(GC))  進(jìn)口分裝  人癌細(xì)胞

聚二苯多孔小球GDX-501(60-80目,C1-C4烴類分析)  進(jìn)口分裝  人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞

(AR,99.5%)  進(jìn)口分裝  人胚細(xì)胞

乙醇(95%) (AR,95.0%)  進(jìn)口分裝  小鼠巨噬細(xì)胞CD3D Others Human 人 CD3d / CD3 delta 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMYB

C57BL/6小鼠神經(jīng)干細(xì)胞 Neural stem cells in C57BL/6 mice

SW1353細(xì)胞,人骨肉瘤細(xì)胞 島青霉 人胚胎肺成纖維細(xì)胞;WI-38

SW-13(人腎上腺皮質(zhì)癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

HL-60(人早幼粒急性白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 MEF, 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞;HK-2

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