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使用及效果:將壓碎的一小重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm(或面積相當的其他形狀)的植物葉直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當于PCR 體積的1/10)作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產品名稱:水貂病毒性腸炎病毒PCR檢測試劑盒
英文名稱:Mink Enteritis Virus(MEV)PCR
編號:XG-P1737
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
樣品 DNA 的制備:
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀釋陽性對照(以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DNA 段作為陽性對照。
2.標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6.換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.換槍頭,在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
8.重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。設置 qPCR 反應(20 μL 體系,在樣品制備室進行)
9.在 PCR 管中加入下列成分(待測樣品需要做三次重復,下表只列出一次。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后*后加)
1 確定PCR反應液或其他酶促反應液的體積。將PCR反應液或其他酶促反應液轉移至一個新的1.5 ml離心管中,向其中加入等體積溶液BD?;旌暇鶆?。
2 將步驟1所獲溶液置于DNA純化柱中,靜置2min。
3 12,000 rpm離心1min,棄濾液。
注:此時DN段被吸附于DNA純化柱中的硅膠膜上。
若溶液體積大于純化柱容積(800 μl),可分兩次離心。
4 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm離心1min,棄濾液。
注:溶液PE初次使用前用無水乙醇按1: 4稀釋,即含80%乙醇。
此步驟的作用是去除硅膠膜上吸附的酶蛋白、核酸引物、dNTP等其他雜質,以獲得高質量DN段。
5 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm離心1min,棄濾液。
6 12,000 rpm 離心 3min,以*去除純化柱中的液體。
注:此步驟的作用是去除殘留乙醇,避免殘留乙醇影響后續酶促反應。同時也利于DN段的充分溶解。
7 將離心柱置于新的1.5 ml離心管中。向純化柱的處,懸空滴加30-100 µl溶液Eluent(60℃預熱),靜置2min。12,000 rpm 離心1min,管底即為目的DN段。貯存于-20℃。
注:溶液Eluent可用無菌雙蒸水代替,但其pH需為8.0-8.5,加入體積視DNA目的段的多少、用戶對目的段濃度要求而定。
對溶液Eluent 60℃預熱,會提高提取DNA目的段的產量。
氯肉湯基礎(SCPB)250g用于副溶血性弧菌選擇性增菌培養,用前應無菌加入(SN標準)
氧化三胺培養基 250g 用于分解
R2A 瓊脂 R2A Agar 250 用于飲用水中異生細菌分離培養(ACUMEDIA方法)
改良平板計數瓊脂(MPCA)250g/瓶用于乳及乳制品中菌落總數、嗜冷菌、需氧芽孢菌的測定incubationmedia改良平板計數瓊脂(MPCA)250g/瓶用于乳及乳制品中菌落總數、嗜冷菌、需氧芽孢菌的測定
Cary-Blair氏運送培養基管 20支/包 用于運送腸道致病菌標本N-Acetyl-cysteine N-乙酰-L-半胱酸 616-91-1
Sodium tetrachloroaurate (III) dihydrate 金酸鈉 13874-02-7
Alloy Wood’s Metal 伍德合金
L(+)-Citrulline L-瓜酸 372-75-8CHODL Others Rat 大鼠 CHODL / CHOndrolectin 人細胞裂解液 (陽性對照)
人內根殼細胞裂解物HHIRSCL
人腦微血管內皮細胞*培養基 100mL
MC3T3-E1細胞,小鼠成骨細胞系 V79(中國倉鼠肺細胞) 家兔骨髓間充質干細胞;2012083MSC
EFNB2 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (Fc 標簽)
COLO 201(人結直腸腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 膀胱平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
水貂病毒性腸炎病毒PCR檢測試劑盒Fraser肉湯增菌液FBSR0x5支試劑A和試劑B各一支添加于225ml(026080)中配成FB
麥芽汁瓊脂 (CM0247) Oxoid incubation media 麥芽汁瓊脂 (CM0247) Oxoid
乳酸片球菌 支/瓶
Psychrophilicbacteriacountagar
瓊脂培養基C 250g 用于霉菌和酵母菌的分離培養3-戊(standard for GC,>99.5%(GC)) 進口分裝 IAR20(大鼠肝細胞)
正戊烷(Standard for GC,≥99.5%(GC)) 進口分裝 LA795(小鼠肺腺癌細胞)
十四醇(Standard for GC, ≥99.5% (GC)) 進口分裝 NCTC 1469(小鼠正常肝細胞)
Celite 硅藻土 545(助濾劑,碳酸鈉處理,通量煅燒) 進口分裝 RIN-m5f(大鼠胰島β細胞瘤細胞)PDCD1LG2 Others Cynomolgus 食蟹猴 B7-DC / PD-L2 / CD273 人細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0172NR8383(大鼠肺泡巨噬細胞)5×106cells/瓶×2
人無色素睫狀上皮細胞裂解物HNPCEpiCL
M453細胞,人癌細胞 鼠肉瘤細胞,S-180-S2D9細胞 卵巢癌組織源性原代細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)/1ml
B16-F10(小鼠皮膚黑色素瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
NHEM M2 adult Pellet 正常人表皮黑素細胞團塊(捐獻者),培養在M2培養液中 > 1 mio.cells 人腎小球內皮細胞裂解物HRGECL
產品及特點:
本產品是一管式超快植物種子和葉基因組DNA 提取試劑,得到的產物可以直接用于PCR。整個過程簡單快速,尤其適合于大規模的轉基因植物篩選時樣品的制備。
1. 快速,整個過程只需要15分鐘左右,不需要液氮對植物組織進行冰凍、機械處理、純化或者DNA的沉淀。運輸及保存2. 一管式,在一個試管內完成所有操作,不容易交叉污染。常溫運輸及保存,有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR,剩余樣品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自動化,適合于海關和企業進行大規模的GMO PCR 篩選。
5. 適用于大多數植物葉和種子。
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