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產品名稱:擠奶工結節病毒PCR檢測試劑盒
英文名稱:Milker's Nodule Virus(MNV)PCR
編號:XG-P1735
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
產品及特點:
本產品是一管式超快植物種子和葉基因組DNA 提取試劑,得到的產物可以直接用于PCR。整個過程簡單快速,尤其適合于大規模的轉基因植物篩選時樣品的制備。
1. 快速,整個過程只需要15分鐘左右,不需要液氮對植物組織進行冰凍、機械處理、純化或者DNA的沉淀。運輸及保存
2. 一管式,在一個試管內完成所有操作,不容易交叉污染。常溫運輸及保存,有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR,剩余樣品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自動化,適合于海關和企業進行大規模的GMO PCR 篩選。
5. 適用于大多數植物葉和種子。
使用及效果:將壓碎的一小重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大小)或直徑約為0.5-0.7 cm(或面積相當的其他形狀)的植物葉直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當于PCR 體積的1/10)作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
1 確定PCR反應液或其他酶促反應液的體積。將PCR反應液或其他酶促反應液轉移至一個新的1.5 ml離心管中,向其中加入等體積溶液BD。混合均勻。
2 將步驟1所獲溶液置于DNA純化柱中,靜置2min。
3 12,000 rpm離心1min,棄濾液。
注:此時DN段被吸附于DNA純化柱中的硅膠膜上。
若溶液體積大于純化柱容積(800 μl),可分兩次離心。
4 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm離心1min,棄濾液。
注:溶液PE初次使用前用無水乙醇按1: 4稀釋,即含80%乙醇。
此步驟的作用是去除硅膠膜上吸附的酶蛋白、核酸引物、dNTP等其他雜質,以獲得高質量DN段。
5 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm離心1min,棄濾液。
6 12,000 rpm 離心 3min,以*去除純化柱中的液體。
注:此步驟的作用是去除殘留乙醇,避免殘留乙醇影響后續酶促反應。同時也利于DN段的充分溶解。
7 將離心柱置于新的1.5 ml離心管中。向純化柱的處,懸空滴加30-100 µl溶液Eluent(60℃預熱),靜置2min。12,000 rpm 離心1min,管底即為目的DN段。貯存于-20℃。
注:溶液Eluent可用無菌雙蒸水代替,但其pH需為8.0-8.5,加入體積視DNA目的段的多少、用戶對目的段濃度要求而定。
對溶液Eluent 60℃預熱,會提高提取DNA目的段的產量。
氯結晶紫增菌液250g用于副溶血性弧菌的選擇性增菌培養(GB標準)
BSSA瓊脂培養基 250g 用于果汁中嗜酸耐熱菌的檢測。
Littman 瓊脂 Littman Agar 250 用于真菌的分離培養(Acumedia方法)
膽鹽乳糖培養基250g/瓶用于大腸菌群的測定incubationmedia膽鹽乳糖培養基250g/瓶用于大腸菌群的測定
SOCMediumZIRCONIUM BORIDE 硼化鋯 12045-64-6
ZIRCONIUM N-PROPOXIDE 正丙醇鋯 23519-77-9
L-Hydroxyproline L-羥脯酸 51-35-4
2,4-Dichlorophenol 2,4-二 120-83-2CX3CL1 Others Canine 狗 Fractalkine / CX3CL1 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠肝癌細胞;Hepa 1-6 [Hepa1-6]
PC-12(高分化),PC12,大鼠腎上腺髓質嗜鉻瘤分化細胞株(高分化)
U-937細胞,淋巴瘤細胞 人前列腺癌細胞,DU-145細胞 人間充質干細胞-骨髓總RNAHMSC-bm NA
非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS4B;Vero-HCV-NS4B
ESAM Others Human 人 ESAM 人細胞裂解液 (陽性對照)
擠奶工結節病毒PCR檢測試劑盒FS培養基250g用于梭桿菌的選擇性增菌培養
尿素酶瓊脂基礎 Urease Agar Base 生化培養基,用于細菌脲酶檢測(GB、SN標準)
無脂肪奶粉 Nonfat-Dried Milk 250克 蛋白組級
Campy-Cefex瓊脂培養基250g/瓶每200ml培養基中添加馬血和07制備改良Campy-Cefex瓊脂,每200ml培養基中添加馬血和07cubationmediaCampy-Cefex瓊脂培養基250g/瓶每200ml培養基中添加馬血和07制備改良Campy-Cefex瓊脂,每200ml培養基中添加馬血和0718
乳糖莫能霉素葡萄糖醛酸瓊脂 250g 用于濾膜MUG法檢測食品中大腸菌群數(SN/T1059.2)無水乙(無水級, 99.9%,H2O≤10ppm) 進口分裝 HCCC-9810(人肝內膽管癌細胞)
鄰苯二甲酸丁芐酯(標準品) 進口分裝 JAR(人胎盤絨毛膜癌細胞)
丁草胺(標準品) 進口分裝 MG-63(人骨肉瘤細胞)
苯并[g,h,i]芘(標準品) 進口分裝 NCI-H292(人肺癌細胞)NA Others H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Babol/36/2005) 神經氨酸酶 (Neuraminidase/NA) 人細胞裂解液 (陽性對照)
中國倉鼠卵巢細胞系;CHO-TGF-beta-3/2000 Carrying Psv2-beta-TGF
K562 人慢性骨髓性白血病細胞
HeLa人細胞 Human cervix cancer HeLa cells DMEM+10% FBS
FAM3D Protein Mouse 重組小鼠 FAM3D / Oit1 蛋白 (Fc 標簽)
小鼠背部脊髓神經元(MN-dsc)(1×106) DU 145, 人前列腺癌細胞 Human
樣品 DNA 的制備:
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀釋陽性對照(以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DNA 段作為陽性對照。2.標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6.換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.換槍頭,在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。8.重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。設置 qPCR 反應(20 μL 體系,在樣品制備室進行)
9.在 PCR 管中加入下列成分(待測樣品需要做三次重復,下表只列出一次。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后*后加)
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