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肉芽腫性曼氏桿菌病PCR檢測試劑盒

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產(chǎn)品型號50T

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海市

更新時間:2020-11-04 13:15:01瀏覽次數(shù):197次

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肉芽腫性曼氏桿菌病PCR檢測試劑盒
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本試劑盒不但準確、快速、靈敏,還具有以下特點:
1.  即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單。
2.  預期的 PCR 產(chǎn)物長度為 494 bp。
3.  本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

產(chǎn)品名稱

 肉芽腫性曼氏桿菌病PCR檢測試劑盒

英文名稱

 Mannheimia granulomatisPCR

貨號

 XG-P1709

 


產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
包裝規(guī)格及成分:

編號

成分

十孔盒包裝(去紙托)

試劑一

2×PCR MagicMix

1mL(亮黃蓋)

試劑二

源性成分 PCR 引物混合液

100 uL(白蓋)

試劑三

源性成分 PCR 陽性對照

50 uL(黃蓋)

試劑四

超純水

1 mL(本色蓋)

試劑五

DNA   釋放劑試用裝

50 次(成分見下)

試劑六

免 DNA 提取試劑溶液 A 成分一

50 uL(白蓋)

試劑七

免 DNA 提取試劑溶液 A 成分二

100uL(綠蓋)

試劑八

免 DNA 提取試劑溶液 B

400 uL(紅蓋)

試劑九

使用手冊

400 uL(紅蓋)

使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標準曲線

馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基250g用于霉菌的鑒定培養(yǎng)

GN增菌液 1000(g) incubation media GN增菌液 1000(g)

無鹽胰胨水發(fā)酵管 無鹽胰胨水發(fā)酵管 20支 BR

UVM培養(yǎng)基250用于李氏菌的增菌培養(yǎng)(MERCK標準)incubationmediaUVM培養(yǎng)基250用于李氏菌的增菌培養(yǎng)(MERCK標準)

布氏瓊脂 250g 用于彎曲桿菌的抗生素敏感性試驗和純化培養(yǎng)。1-PYREUTYRIC ACID  1-芘丁酸  3443-45-6

Palladium monoxide  氧化  1314-08-5

4-Bromobutyric acid  4-溴丁酸  2623-87-2

Palladium sulfate    13566-03-5ICAM1 Others Rat 大鼠 ICAM1 / CD54 人細胞裂解液 (陽性對照)

雪旺氏細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

MS1 小鼠胰島內(nèi)皮細胞

非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A

C6, 大鼠腦膠質(zhì)瘤細胞

人癌細胞;MCF 7B 大鼠肺大動脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
肉芽腫性曼氏桿菌病PCR檢測試劑盒GN增菌液(20主要用于志賀氏菌的增菌培養(yǎng),亦可用于沙門氏菌增菌培養(yǎng)(GB標準)

C.L.E.D培養(yǎng)基 250g 用于尿液中微生物的選擇性分離培養(yǎng)

WL營養(yǎng)瓊脂 WL Nutrient Agar 250 用于啤酒和發(fā)酵產(chǎn)品中酵母菌和細菌的計數(shù)

醋酸鉛培養(yǎng)基250g/瓶用于細菌產(chǎn)硫化氫試驗,每培養(yǎng)基中添加0ncubationmedia醋酸鉛培養(yǎng)基250g/瓶用于細菌產(chǎn)硫化氫試驗,每培養(yǎng)基中添加0104

GVPC瓊脂平板(9cm) 10個/包 用于軍團菌的選擇性分離培養(yǎng)(進口)  進口分裝  小鼠組胺(mouse HIS)

酒石酸溴莫尼定(標準品)  進口分裝  小鼠干擾素-r(mouse IFN-r)

尼泊金丙酯;對羥基苯甲酸丙酯   進口分裝  小鼠抑制素A(mouse Inhibin A)

土拉霉素A,托拉菌素A,泰拉霉素  進口分裝  小鼠神經(jīng)營養(yǎng)素3(mouse NT-3)TLR3 Others Mouse 小鼠 TLR3 / CD283 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

冠狀動脈平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

人前列腺癌低轉(zhuǎn)移細胞株;PC-3M-2B4

FO細胞,骨髓瘤細胞 人胚肝二倍體細胞,CCC-HEL-1細胞 CL-0208SH-SY5Y(人神經(jīng)母細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2

二氫還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細胞;CHO/dhFr-

LAMP3 Others Human 人 CD208 / LAMP3 / DC-LAMP 人細胞裂解液 (陽性對照) 

技術(shù)原理:

       DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈式反應實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設(shè)計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性)
       發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應用,并逐步應用于臨床。

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