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產品及特點:
本產品是一管式超快植物種子和葉基因組DNA 提取試劑,得到的產物可以直接用于PCR。整個過程簡單快速,尤其適合于大規模的轉基因植物篩選時樣品的制備。
1. 快速,整個過程只需要15分鐘左右,不需要液氮對植物組織進行冰凍、機械處理、純化或者DNA的沉淀。運輸及保存2. 一管式,在一個試管內完成所有操作,不容易交叉污染。常溫運輸及保存,有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR,剩余樣品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自動化,適合于海關和企業進行大規模的GMO PCR 篩選。
5. 適用于大多數植物葉和種子。
產品名稱:甲型流感病毒5亞型PCR檢測試劑盒
英文名稱:Influenza Virus AH5RTPCR
編號:XG-P1633
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
使用及效果:將壓碎的一小重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大小)或直徑約為0.5-0.7 cm(或面積相當的其他形狀)的植物葉直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當于PCR 體積的1/10)作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
1 確定PCR反應液或其他酶促反應液的體積。將PCR反應液或其他酶促反應液轉移至一個新的1.5 ml離心管中,向其中加入等體積溶液BD。混合均勻。
2 將步驟1所獲溶液置于DNA純化柱中,靜置2min。
3 12,000 rpm離心1min,棄濾液。
注:此時DN段被吸附于DNA純化柱中的硅膠膜上。
若溶液體積大于純化柱容積(800 μl),可分兩次離心。
4 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm離心1min,棄濾液。
注:溶液PE初次使用前用無水乙醇按1: 4稀釋,即含80%乙醇。
此步驟的作用是去除硅膠膜上吸附的酶蛋白、核酸引物、dNTP等其他雜質,以獲得高質量DN段。
5 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm離心1min,棄濾液。
6 12,000 rpm 離心 3min,以*去除純化柱中的液體。
注:此步驟的作用是去除殘留乙醇,避免殘留乙醇影響后續酶促反應。同時也利于DN段的充分溶解。
7 將離心柱置于新的1.5 ml離心管中。向純化柱的處,懸空滴加30-100 µl溶液Eluent(60℃預熱),靜置2min。12,000 rpm 離心1min,管底即為目的DN段。貯存于-20℃。
注:溶液Eluent可用無菌雙蒸水代替,但其pH需為8.0-8.5,加入體積視DNA目的段的多少、用戶對目的段濃度要求而定。
對溶液Eluent 60℃預熱,會提高提取DNA目的段的產量。
樣品 DNA 的制備:
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀釋陽性對照(以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DNA 段作為陽性對照。
2.標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6.換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.換槍頭,在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
8.重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。設置 qPCR 反應(20 μL 體系,在樣品制備室進行)
9.在 PCR 管中加入下列成分(待測樣品需要做三次重復,下表只列出一次。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后*后加)
歐洲藥典培養基(EP標準)
李斯特菌顯色培養基 1000 mL/瓶 incubation media 李斯特菌顯色培養基 1000 mL/瓶
李氏增菌液LB1凍干配套試劑 10支 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。
培養基PMediumP(Reinforedmediumforclostridia)用于梭菌的增菌培養和計數。
APTAgarBromoacetaldehyde diethyl acetal 溴乙醛縮二乙醇 2032-35-1
4-Bromo-1,2-(methylenedioxy)benzene 4-溴-1,2-亞甲二氧基苯 2635-13-4
Glycidol 縮水甘油 556-52-5
(S)-(-)-1-PHENYLETHANOL (S)-(-)-1-苯基乙醇 1445-91-6CDH1 Others Rat 大鼠 E-Cadherin / CDH1 / E-cad / CD324 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠肝細胞;BRL
肺成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
CCRF-CEM細胞,人急性淋巴細胞白血病T淋巴細胞 小鼠白血病細胞,C3細胞 人肝竇內皮細胞cDNAHHSEC cDNA
PC-12(大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
CT26.WT(小鼠結腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0198RM-1(小鼠前列腺癌細胞)5×106cells/瓶×2 人APP基因轉染CHO細胞株;7WD10
甲型流感病毒5亞型PCR檢測試劑盒KIA
M1Medium
EF-18 瓊脂 EF-18 Agar 250 用于濾膜法檢測食品中沙門氏菌(SN/T1059.1)
MUGal肉湯基礎2000ml/瓶用于大腸菌群快速檢測。每培養基中添加0203incubationmediaMUGal肉湯基礎2000ml/瓶用于大腸菌群快速檢測。每培養基中添加0203
即用型平板培養基人α-甲基酰基消旋酶(AMACR)酶聯免疫吸附測定試劑盒 進口分裝 雙酚AF 英文名稱: Bisphenol AF : 1478-61-1 分子式: 336.23 分子量: C15H10F6O2
人轉錄因子20(TCF20)酶聯免疫吸附測定試劑盒 進口分裝 直接深棕MM 英文名稱: Direct dark brown MM : 分子式: 分子量:
人黏病毒耐藥蛋白1(MX1)酶聯免疫吸附測定試劑盒 進口分裝 二苯胺磺酸鋇 英文名稱: Two aniline sulfonic acid : 6211-24-1 分子式: 633.88 分子量: C24H20BaN2O6S2
人不均一核糖核蛋白U(HNRPU)酶聯免疫吸附測定試劑盒 進口分裝 偶氮膦 英文名稱: Azo chloride : 85561-96-2 分子式: C16H11ClN2NaO11PS2•3 分子量: 85561-96-2AGA Others Human 人 AGA / ASRG / Aspartylglucosaminidase 人細胞裂解液 (陽性對照)
CM-H028人淋巴血管內皮細胞*培養基100mL
支氣管上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
293001B細胞,Sars蛋白表達株 人導管癌細胞,MDA-MB-453細胞 口腔角質細胞培養基OKM-prf
大額牛皮膚成纖維樣細胞;BOS-1
IL2RB Others Human 人 IL2Rβ 人細胞裂解液 (陽性對照)
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