當前位置:上海西格生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR檢測試劑盒>> 50T犬巨球菌PCR檢測試劑盒
產品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
本試劑盒不但準確、快速、靈敏,還具有以下特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單。
2. 預期的 PCR 產物長度為 494 bp。
3. 本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產品名稱 | |
英文名稱 | Macrococcus canisPCR |
貨號 | XG-P1700 |
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
包裝規格及成分:
編號 | 成分 | 十孔盒包裝(去紙托) |
試劑一 | 2×PCR MagicMix | 1mL(亮黃蓋) |
試劑二 | 源性成分 PCR 引物混合液 | 100 uL(白蓋) |
試劑三 | 源性成分 PCR 陽性對照 | 50 uL(黃蓋) |
試劑四 | 超純水 | 1 mL(本色蓋) |
試劑五 | DNA 釋放劑試用裝 | 50 次(成分見下) |
試劑六 | 免 DNA 提取試劑溶液 A 成分一 | 50 uL(白蓋) |
試劑七 | 免 DNA 提取試劑溶液 A 成分二 | 100uL(綠蓋) |
試劑八 | 免 DNA 提取試劑溶液 B | 400 uL(紅蓋) |
試劑九 | 使用手冊 | 400 uL(紅蓋) |
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數值為橫軸,繪制標準曲線
技術原理:
DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈式反應實驗中發現,DNA在高溫時也可以發生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性)
發現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。
麥康凱瓊脂2250g供分離發酵乳糖的革蘭氏陰性腸道桿菌(GB/T4789.28-2003中4.24和GB/T4789.5-2003)。
玉米粉瓊脂 (CM0103) Oxoid incubation media 玉米粉瓊脂 (CM0103) Oxoid
葡萄孢 防霉試驗菌 支/瓶
TTCNutrientAgar
ChinaBlueAgarmeso-2,3-Dibromosuccinic acid 2,3-二溴丁二酸 608-36-6
1,3-Dibromo-5,5-dimethylhydantoin 1,3-二溴-5,5-二甲基乙內酰脲 77-48-5
thiosemicarbazide 硫代基脲 79-19-6
4-Methyl-2-oxovaleric acid 4-甲基-2-氧戊酸 816-66-0IL17A Others Human 人 IL17 / IL17A 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
人胚胎心肌組織來源細胞;CCC-HEH-2
CL-0285L-O2(人正常肝細胞)5×106cells/瓶×2
hDPSCs, 人前磨牙牙髓干細胞 小鼠胚胎成纖維細胞,3T6swiss細胞 Hs 1.Tes(正常人細胞)
人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞;MuM-2C
NCSTN Others Human 人 NCSTN / Nicasin 人細胞裂解液 (陽性對照)
犬巨球菌PCR檢測試劑盒GVPCAgarPlate
Nutrient broth 營養瓊脂 1.05443.0500 MERCK默克 incubation media Nutrient broth 營養瓊脂 1.05443.0500 MERCK默克
改良磷酸鹽緩沖液 250g 用于小腸結腸炎耶爾森氏菌的增菌培養。
C57BL/6小鼠胚胎干細胞*培養基CompletecellculturemediumofC57BL/6mouseembryonicstem
CNAgar鹽酸丙卡巴肼(標準品) 進口分裝 大鼠髓過氧化物酶(MPO)ELISA試劑盒
3-氮雜雙環【3.3.0】辛烷鹽酸鹽 進口分裝 大鼠神經特異性烯醇化酶(NSE)ELISA試劑盒
7-乙基-10-(SN-38) 進口分裝 大鼠癌標志物-CA153ELISA試劑盒
睪,素 進口分裝 大鼠前列腺素E2(PGE2)ELISA試劑盒VSIG2 Others Human 人 VSIG2 人細胞裂解液 (陽性對照)
滋養層細胞生長添加物TGS
COS-7 非洲綠猴SV40 轉化的腎細胞
CL-0014A-375(人惡性黑色素瘤細胞)5×106cells/瓶×2
BRL 3A, 大鼠肝正常細胞
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KM9801 人脈絡膜血管細胞*培養基 100mL
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