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產品及特點:
本產品是一管式超快植物種子和葉基因組DNA 提取試劑,得到的產物可以直接用于PCR。整個過程簡單快速,尤其適合于大規模的轉基因植物篩選時樣品的制備。
1. 快速,整個過程只需要15分鐘左右,不需要液氮對植物組織進行冰凍、機械處理、純化或者DNA的沉淀。運輸及保存2. 一管式,在一個試管內完成所有操作,不容易交叉污染。常溫運輸及保存,有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR,剩余樣品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自動化,適合于海關和企業進行大規模的GMO PCR 篩選。
5. 適用于大多數植物葉和種子。
產品名稱:丙型肝炎病毒4型PCR檢測試劑盒
英文名稱:Hepatitis C Virus(HCV)4RTPCR
編號:XG-P1536
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
使用及效果:將壓碎的一小重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大小)或直徑約為0.5-0.7 cm(或面積相當的其他形狀)的植物葉直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當于PCR 體積的1/10)作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
1 確定PCR反應液或其他酶促反應液的體積。將PCR反應液或其他酶促反應液轉移至一個新的1.5 ml離心管中,向其中加入等體積溶液BD。混合均勻。
2 將步驟1所獲溶液置于DNA純化柱中,靜置2min。
3 12,000 rpm離心1min,棄濾液。
注:此時DN段被吸附于DNA純化柱中的硅膠膜上。
若溶液體積大于純化柱容積(800 μl),可分兩次離心。
4 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm離心1min,棄濾液。
注:溶液PE初次使用前用無水乙醇按1: 4稀釋,即含80%乙醇。
此步驟的作用是去除硅膠膜上吸附的酶蛋白、核酸引物、dNTP等其他雜質,以獲得高質量DN段。
5 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm離心1min,棄濾液。
6 12,000 rpm 離心 3min,以*去除純化柱中的液體。
注:此步驟的作用是去除殘留乙醇,避免殘留乙醇影響后續酶促反應。同時也利于DN段的充分溶解。
7 將離心柱置于新的1.5 ml離心管中。向純化柱的處,懸空滴加30-100 µl溶液Eluent(60℃預熱),靜置2min。12,000 rpm 離心1min,管底即為目的DN段。貯存于-20℃。
注:溶液Eluent可用無菌雙蒸水代替,但其pH需為8.0-8.5,加入體積視DNA目的段的多少、用戶對目的段濃度要求而定。
對溶液Eluent 60℃預熱,會提高提取DNA目的段的產量。
樣品 DNA 的制備:
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀釋陽性對照(以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DNA 段作為陽性對照。
2.標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6.換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.換槍頭,在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
8.重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。設置 qPCR 反應(20 μL 體系,在樣品制備室進行)
9.在 PCR 管中加入下列成分(待測樣品需要做三次重復,下表只列出一次。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后*后加)
三聚氰胺標準品用于檢測嬰兒奶粉中三聚氰胺的含量。
T1N1瓊脂 T1N1 Agar 用于霍亂弧菌的培養(SN標準)
酵母氮源-無氨基酸 YNB 100g BR
營養肉湯基礎250g/瓶用于的試驗,每200ml培養基中加入incubationmedia營養肉湯基礎250g/瓶用于的試驗,每200ml培養基中加入1209
營養肉湯(日本標準) 250g 用于一般細菌培養、轉種、復壯、增菌等NA 水質鉀、鈉、鈣與混合標樣
NA 水質鐵與錳混合標樣
Octadecanethiol 正十八硫醇 2885-00-9
Total Cyanide Standard for water 水質總物標樣NRN1L Others Human 人 NRN1L / neuritin 1-like / Cpg15-2 人細胞裂解液 (陽性對照)
人腦血管平滑肌細胞cDNAHBVSMC cDNA
小鼠肝癌瘤株;H22
GBC-SD細胞,人膽囊癌細胞 人APP基因轉染CHO細胞株,7WD10細胞 中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1
Li-7(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell C-28019 MSC Growth Medium DXF, 間充質干細胞生長培養基DXF—無血清培養基 500ml
丙型肝炎病毒4型PCR檢測試劑盒mCPCMediumSupplement
SLBBroth
CATC瓊脂 CATC Agar 250 用于食品和飲料腸球菌的分離培養(MERCK方法)
VRB-MUG瓊脂VRB-MUG瓶用于大腸桿菌平板計數incubationmediaVRB-MUG瓊脂VRB-MUG瓶用于大腸桿菌平板計數
Eosin-MethyleneBlueAgarNBB培養基 進口分裝 磷標準溶液(1000μg/ml,,溶劑:水) solution : 質量規格: 1000μg/ml,,溶劑:水
BromcresolPurpleDextrosePeptone 進口分裝 鹽酸標準溶液(0.1017mol/L) Hydrochloric acid standard solution : 7647-01-0 質量規格: 0.1017mol/L
伊紅美藍瓊脂(EMB) 進口分裝 正十六烷(分析標準品,≥99.5%(GC)) Hexadecane : 544-76-3 質量規格: 分析標準品,≥99.5%(GC)
乳糖膽鹽發酵培養基(高PH值) 進口分裝 二甲烷(ACS ,≥99.5%) Dichloromethane : 27639 質量規格: ACS ,≥99.5%EPHA7 Others Rat 大鼠 EphA7 / EHK3 人細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0399NCI-H295R(人腎上腺皮質腺癌細胞)5×106cells/瓶×2
人臍帶間充質干細胞總RNAHUMSC NA
MCF-7B細胞,人癌細胞 兔的肝細胞,VX2細胞 PANC-1, 人胰腺癌細胞
MuM-2B(人眼脈絡黑色素瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
HUVEC pooled Pellet 人臍靜脈內皮細胞混合團塊 > 1 mio.cells 上皮細胞培養基-2EpiCM-2
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