當前位置:上海西格生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR檢測試劑盒>> 50T腸道病毒組PCR檢測試劑盒
使用及效果:將壓碎的一小重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm(或面積相當的其他形狀)的植物葉直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當于PCR 體積的1/10)作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
本試劑盒不但準確、快速、靈敏,還具有以下特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單。
2. 預期的 PCR 產物長度為 494 bp。
3. 本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產品名稱 | |
英文名稱 | Enterovirus(EV)ARTPCR |
貨號 | XG-P1391 |
樣品 DNA 的制備:
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀釋陽性對照(以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DNA 段作為陽性對照。
2.標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6.換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.換槍頭,在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
8.重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。設置 qPCR 反應(20 μL 體系,在樣品制備室進行)
9.在 PCR 管中加入下列成分(待測樣品需要做三次重復,下表只列出一次。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后*后加)
1 確定PCR反應液或其他酶促反應液的體積。將PCR反應液或其他酶促反應液轉移至一個新的1.5 ml離心管中,向其中加入等體積溶液BD?;旌暇鶆?。
2 將步驟1所獲溶液置于DNA純化柱中,靜置2min。
3 12,000 rpm離心1min,棄濾液。
注:此時DN段被吸附于DNA純化柱中的硅膠膜上。
若溶液體積大于純化柱容積(800 μl),可分兩次離心。
4 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm離心1min,棄濾液。
注:溶液PE初次使用前用無水乙醇按1: 4稀釋,即含80%乙醇。
此步驟的作用是去除硅膠膜上吸附的酶蛋白、核酸引物、dNTP等其他雜質,以獲得高質量DN段。
5 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm離心1min,棄濾液。
6 12,000 rpm 離心 3min,以*去除純化柱中的液體。
注:此步驟的作用是去除殘留乙醇,避免殘留乙醇影響后續酶促反應。同時也利于DN段的充分溶解。
7 將離心柱置于新的1.5 ml離心管中。向純化柱的處,懸空滴加30-100 µl溶液Eluent(60℃預熱),靜置2min。12,000 rpm 離心1min,管底即為目的DN段。貯存于-20℃。
注:溶液Eluent可用無菌雙蒸水代替,但其pH需為8.0-8.5,加入體積視DNA目的段的多少、用戶對目的段濃度要求而定。
對溶液Eluent 60℃預熱,會提高提取DNA目的段的產量。
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鄰本二價酸二丁酯Dibutyl phthalate色固50ml
鋅粒Zinc tabletsAR500gHGF Others Human 人 HGF / Hepatocyte Growth Factor CHO細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0122HUVEC(HUV-EC-C) (人臍靜脈血管內皮細胞)5×106cells/瓶×2
人食道平滑肌細胞裂解物HESMCL
水貂肺上皮細胞;Mv.1.Lu(NBL-7) T淋巴細胞白血病細胞,Jurkat,Clone E6-1細胞 MPC-83細胞,小鼠胰腺腺泡細胞癌細胞
人肝永生化細胞;THLE-3
COCH Others Human 人 COCH / Cochlin ( isoform short ) 人細胞裂解液 (陽性對照)
腸道病毒組PCR檢測試劑盒PALCAM添加劑*5每支添加于200mlHB4188中
布氏肉湯 Brucella Broth 用于彎曲桿菌增菌肉湯和布氏瓊脂制備(SN標準)
沙堡氏4%葡萄糖瓊脂培養基 SDA 250克 分離培養及鑒別真菌、酵母菌和
酸性L-J培養基250g/瓶含天冬酰胺,用于堿性物質處理的分枝桿菌標本,需添加甘油及雞蛋incubationmedia酸性L-J培養基250g/瓶含天冬酰胺,用于堿性物質處理的分枝桿菌標本,需添加甘油及雞蛋
改良月桂基鹽胰蛋白胨肉湯-(mLST-Vm) 250g 用于阪崎桿菌選擇性增菌培養(GB標準)大鼠尿素 進口分裝 3,8-Dihydroxy-2,4,6-trimethoxyxanthone 3,8-Dihydroxy-2,4,6-trimethoxyxanthone 65008-17-5 C16H14O7 ≥98%
大鼠脂聯素受體1 進口分裝 Gartanin Gartanin 33390-42-0 C23H24O6 ≥98%
大鼠半胱天冬蛋白酶8 進口分裝 Psoralenoside Psoralenoside 905954-17-8 C17H18O9 ≥98%
大鼠補體CH50 進口分裝 Trans-Pinosylvin dim Trans-Pinosylvin dim 21956-56-9 C16H16O2 ≥98%CBLC Others Human 人 Cbl-c / CBL-3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
豚鼠皮膚細胞;GP-S3
腦動脈血管內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
人臍動脈內皮細胞 人正常胚肺成纖維細胞,MRC-5細胞 SHZ-88(癌細胞)
人耐VP16絨癌細胞株;JEG-3/VP16
DLL1 Others Human 人 DLL1 / Delta-1 人細胞裂解液 (陽性對照)
產品及特點:
本產品是一管式超快植物種子和葉基因組DNA 提取試劑,得到的產物可以直接用于PCR。整個過程簡單快速,尤其適合于大規模的轉基因植物篩選時樣品的制備。
1. 快速,整個過程只需要15分鐘左右,不需要液氮對植物組織進行冰凍、機械處理、純化或者DNA的沉淀。運輸及保存2. 一管式,在一個試管內完成所有操作,不容易交叉污染。常溫運輸及保存,有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR,剩余樣品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自動化,適合于海關和企業進行大規模的GMO PCR 篩選。
5. 適用于大多數植物葉和種子。
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