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愛德華氏菌通用PCR檢測試劑盒

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產(chǎn)品型號50T

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海市

更新時間:2020-11-02 14:05:53瀏覽次數(shù):167次

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愛德華氏菌通用PCR檢測試劑盒
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產(chǎn)品及特點(diǎn):
本產(chǎn)品是一管式超快植物種子和葉基因組DNA 提取試劑,得到的產(chǎn)物可以直接用于PCR。整個過程簡單快速,尤其適合于大規(guī)模的轉(zhuǎn)基因植物篩選時樣品的制備。
1. 快速,整個過程只需要15分鐘左右,不需要液氮對植物組織進(jìn)行冰凍、機(jī)械處理、純化或者DNA的沉淀。運(yùn)輸及保存2. 一管式,在一個試管內(nèi)完成所有操作,不容易交叉污染。常溫運(yùn)輸及保存,有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR,剩余樣品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自動化,適合于海關(guān)和企業(yè)進(jìn)行大規(guī)模的GMO PCR 篩選。
5. 適用于大多數(shù)植物葉和種子。

本試劑盒不但準(zhǔn)確、快速、靈敏,還具有以下特點(diǎn):
1.  即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單。
2.  預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 494 bp。
3.  本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

產(chǎn)品名稱

 愛德華氏菌通用PCR檢測試劑盒

英文名稱

 Edwardsiella spp.PCR

貨號

 XG-P1351

 

使用及效果:將壓碎的一小重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
1  確定PCR反應(yīng)液或其他酶促反應(yīng)液的體積。將PCR反應(yīng)液或其他酶促反應(yīng)液轉(zhuǎn)移至一個新的1.5 ml離心管中,向其中加入等體積溶液BD。混合均勻。
2  將步驟1所獲溶液置于DNA純化柱中,靜置2min。
3  12,000 rpm離心1min,棄濾液。
   注:此時DN段被吸附于DNA純化柱中的硅膠膜上。
       若溶液體積大于純化柱容積(800 μl),可分兩次離心。
4  加入500 µl溶液PE。12,000 rpm離心1min,棄濾液。
   注:溶液PE初次使用前用無水乙醇按1: 4稀釋,即含80%乙醇。
       此步驟的作用是去除硅膠膜上吸附的酶蛋白、核酸引物、dNTP等其他雜質(zhì),以獲得高質(zhì)量DN段。
5  加入500 µl溶液PE。12,000 rpm離心1min,棄濾液。
6  12,000 rpm 離心 3min,以*去除純化柱中的液體。
   注:此步驟的作用是去除殘留乙醇,避免殘留乙醇影響后續(xù)酶促反應(yīng)。同時也利于DN段的充分溶解。
7  將離心柱置于新的1.5 ml離心管中。向純化柱的處,懸空滴加30-100 µl溶液Eluent(60℃預(yù)熱),靜置2min。12,000 rpm 離心1min,管底即為目的DN段。貯存于-20℃。
   注:溶液Eluent可用無菌雙蒸水代替,但其pH需為8.0-8.5,加入體積視DNA目的段的多少、用戶對目的段濃度要求而定。
       對溶液Eluent 60℃預(yù)熱,會提高提取DNA目的段的產(chǎn)量。
樣品 DNA 的制備:
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費(fèi)贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀釋陽性對照(以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DNA 段作為陽性對照。
2.標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6.換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.換槍頭,在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
8.重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20  μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9.在 PCR 管中加入下列成分(待測樣品需要做三次重復(fù),下表只列出一次。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后*后加)

鹽培養(yǎng)基基礎(chǔ)培養(yǎng)基,用于細(xì)菌鹽還原試驗,KCN抑制試驗(GB、SN標(biāo)準(zhǔn))

GAMAgar,Modified

葡萄糖胰蛋白胨瓊脂 Glucose Tryptone Agar 250 用于嗜熱菌芽孢(需氧芽孢總數(shù)、平酸芽孢和厭氧芽孢)分離培養(yǎng)(SN標(biāo)準(zhǔn))

MT培養(yǎng)基250g/瓶用于植物組織培養(yǎng)incubationmediaMT培養(yǎng)基250g/瓶用于植物組織培養(yǎng)

含225ml志賀氏菌増菌肉湯均質(zhì)袋 10個/包 用于志賀氏菌前增菌培養(yǎng)甲基叔丁基醚metxyl tert-butyl etxenHPLC4L

LLH-0500.5 ml 硅化離心管盒161

R3501-500MGRifampicin 13292-46-1500mg

3,3’-二安基聯(lián)本胺5g

Lanthanum(III) nitnate hydrate10gCGA Others Human 人 FSH alpha / TSH alpha / CGA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

小鼠海馬趾神經(jīng)元MN-h

人永生化表皮細(xì)胞;HaCaT

大鼠肝細(xì)胞;BRL 3A 膽管細(xì)胞型肝癌細(xì)胞,HCCC-9810細(xì)胞 C26細(xì)胞,小鼠結(jié)腸癌

6-10B, 人鼻咽癌細(xì)胞系 Human

CES5A Others Mouse 小鼠 CES5 / Carboxylesterase-5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
愛德華氏菌通用PCR檢測試劑盒Power-nitratemedium

去氧膽酸鹽枸櫞酸鹽乳糖蔗糖瓊脂 DCLS Agar 用于致病性腸桿菌的分離培養(yǎng)。

炭疽桿菌疫苗 50人份/5支 炭疽桿菌檢測用配套試劑

TTC-沙保弱培養(yǎng)基250g/瓶用于真菌的培養(yǎng)和計數(shù)incubationmediaTTC-沙保弱培養(yǎng)基250g/瓶用于真菌的培養(yǎng)和計數(shù)

m-TGE肉湯 250g 用于奶制品中濾膜法細(xì)菌總數(shù)計數(shù)人β葡糖苷酶(β-glucosidase)ELISAKit  進(jìn)口分裝  5-核苷  5-Fluorouridine  :  316-46-1  質(zhì)量規(guī)格:  美國進(jìn)口

人組織蛋白酶D(cath-D)ELISAKit  進(jìn)口分裝  羥基-d8  Hydroxy Itraconazole-d8  :  112559-91-8 (unlabeled)  質(zhì)量規(guī)格:  美國進(jìn)口

人解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)ELISAKit  進(jìn)口分裝  4-基9-順式-甲酯  4-Keto 9-cis Retinoic Acid Methyl Ester  :  163955-59-7  質(zhì)量規(guī)格:  美國進(jìn)口

人原A(PG-A)ELISAKit  進(jìn)口分裝  3-羥基  3-Hydroxy Nevirapine  :  174532-82-2  質(zhì)量規(guī)格:  美國進(jìn)口KEAP1 Others Human 人 KEAP1 / INRF2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元MN-c

蚊子幼蟲體細(xì)胞;Aedes albopictus clone C6/36

B95-8細(xì)胞,EBV 轉(zhuǎn)化的絨猴白細(xì)胞 人大腸癌細(xì)胞,CL187/CCL187細(xì)胞 CM-H125人腦成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

大鼠肝細(xì)胞;BRL 3A

GDF15 Others Human 人 GDF-15 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 

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