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產品及特點:
本產品是一管式超快植物種子和葉基因組DNA 提取試劑,得到的產物可以直接用于PCR。整個過程簡單快速,尤其適合于大規模的轉基因植物篩選時樣品的制備。
1. 快速,整個過程只需要15分鐘左右,不需要液氮對植物組織進行冰凍、機械處理、純化或者DNA的沉淀。運輸及保存2. 一管式,在一個試管內完成所有操作,不容易交叉污染。常溫運輸及保存,有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR,剩余樣品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自動化,適合于海關和企業進行大規模的GMO PCR 篩選。
5. 適用于大多數植物葉和種子。
產品名稱:腦多頭囊蟲PCR檢測試劑盒
英文名稱:Coenurus cerebralisPCR
編號:XG-P1270
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
使用及效果:將壓碎的一小重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大小)或直徑約為0.5-0.7 cm(或面積相當的其他形狀)的植物葉直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當于PCR 體積的1/10)作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
1 確定PCR反應液或其他酶促反應液的體積。將PCR反應液或其他酶促反應液轉移至一個新的1.5 ml離心管中,向其中加入等體積溶液BD。混合均勻。
2 將步驟1所獲溶液置于DNA純化柱中,靜置2min。
3 12,000 rpm離心1min,棄濾液。
注:此時DN段被吸附于DNA純化柱中的硅膠膜上。
若溶液體積大于純化柱容積(800 μl),可分兩次離心。
4 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm離心1min,棄濾液。
注:溶液PE初次使用前用無水乙醇按1: 4稀釋,即含80%乙醇。
此步驟的作用是去除硅膠膜上吸附的酶蛋白、核酸引物、dNTP等其他雜質,以獲得高質量DN段。
5 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm離心1min,棄濾液。
6 12,000 rpm 離心 3min,以*去除純化柱中的液體。
注:此步驟的作用是去除殘留乙醇,避免殘留乙醇影響后續酶促反應。同時也利于DN段的充分溶解。
7 將離心柱置于新的1.5 ml離心管中。向純化柱的處,懸空滴加30-100 µl溶液Eluent(60℃預熱),靜置2min。12,000 rpm 離心1min,管底即為目的DN段。貯存于-20℃。
注:溶液Eluent可用無菌雙蒸水代替,但其pH需為8.0-8.5,加入體積視DNA目的段的多少、用戶對目的段濃度要求而定。
對溶液Eluent 60℃預熱,會提高提取DNA目的段的產量。
樣品 DNA 的制備:
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀釋陽性對照(以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DNA 段作為陽性對照。
2.標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6.換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.換槍頭,在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
8.重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。設置 qPCR 反應(20 μL 體系,在樣品制備室進行)
9.在 PCR 管中加入下列成分(待測樣品需要做三次重復,下表只列出一次。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后*后加)
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LB-TOP Agar 培養基 250g incubation media LB-TOP Agar 培養基 250g
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ER1342MssI (PmeI)1250 units18
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神經小膠質細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
C57小鼠黑色素瘤瘤株;ME (Me)
WEHI 22.1細胞,B淋巴細胞 人肝內膽管上皮細胞,HIBEpiC細胞 CL-0096HCT 116(人結腸癌細胞)5×106cells/瓶×2
中國倉鼠卵巢細胞-二還原酶缺陷型;CHO/dhFr-
MCPT1 Others Mouse 小鼠 MCPT1 人細胞裂解液 (陽性對照)
腦多頭囊蟲PCR檢測試劑盒Skirrow瓊脂28385250g用于空腸彎曲菌的選擇分離培養(GB、ISO),每基礎培養基需添加2支配套試劑。(SR0330)
1901-prf MM-prf 小膠質細胞培養基 500 ml incubation media 1901-prf MM-prf 小膠質細胞培養基 500 ml
ThioglycollateMedium
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C.L.E.D培養基添加劑 1ml*5支 每支加入100mlC.L.E.D培養基中血平板(成品培養基) 進口分裝 3,5-Dihydroxybenzoic Acid Methyl Ester 中文名稱: 苯甲酯 CAS 編號: 2150-44-9 分子結構式: C8H8O4
亞碲酸鉀(亞碲酸鹽肉湯凍干配套試劑) 進口分裝 N-(Acetyl-d3)-S-benzyl-L-cysteine 中文名稱: N-(acetyl-d3)-酸 CAS 編號: 201404-15-1 分子結構式: C12H12D3NO3S
亮綠乳糖液體培養基(BGB) 進口分裝 Efavirenz Pen-3-ene-1-yne (cis/trans Mixture) 中文名稱: 依法韋侖pen-3-ene-1-yne(順/反式的混合物) CAS 編號: 分子結構式: C14H9ClF3NO2
沙氏葡萄糖液體培養基 進口分裝 4-tert-Butyldimethylsilyl-5’-chloro-4a’-hydroxy Simvastatin 中文名稱: 4-tert-butyldimethylsilyl-5”chloro-4a’-羥基 CAS 編號: 123852-10-8 分子結構式: C31H53ClO6SiEDA2R Others Cynomolgus 食蟹猴 XEDAR / EDA2R 人細胞裂解液 (陽性對照)
腦膜細胞培養基MenCM
人張氏肝細胞;Chang liver
SUME-a細胞,人鼻咽癌細胞系 大鼠肝癌細胞,RH-35細胞 CM-H087人冠狀動脈內皮細胞*培養基100mL
P19(小鼠畸胎瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell C-27417 Preadipocyte Growth Medium KIT, 前脂肪細胞生長培養基套裝 500ml
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