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產品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
產品名稱:沙眼衣原體PCR檢測試劑盒
英文名稱:Chlamydia trachomatisPCR
編號:XG-P1233
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
包裝規格及成分:
編號 | 成分 | 十孔盒包裝(去紙托) |
試劑一 | 2×PCR MagicMix | 1mL(亮黃蓋) |
試劑二 | 源性成分 PCR 引物混合液 | 100 uL(白蓋) |
試劑三 | 源性成分 PCR 陽性對照 | 50 uL(黃蓋) |
試劑四 | 超純水 | 1 mL(本色蓋) |
試劑五 | DNA 釋放劑試用裝 | 50 次(成分見下) |
試劑六 | 免 DNA 提取試劑溶液 A 成分一 | 50 uL(白蓋) |
試劑七 | 免 DNA 提取試劑溶液 A 成分二 | 100uL(綠蓋) |
試劑八 | 免 DNA 提取試劑溶液 B | 400 uL(紅蓋) |
試劑九 | 使用手冊 | 400 uL(紅蓋) |
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數值為橫軸,繪制標準曲線
技術原理:
DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈式反應實驗中發現,DNA在高溫時也可以發生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性)
發現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。
中國藥典培養基(05藥典)
乳糖蛋白胨培養液 1000(g) incubation media 乳糖蛋白胨培養液 1000(g)
結晶紫中性紅膽鹽葡聚糖瓊脂 VRBDA 250克 腸道菌計數和腸桿菌科鑒別
TCBS瓊脂250用于致病性弧菌的選擇性分離(GB、SN標準)incubationmediaTCBS瓊脂250用于致病性弧菌的選擇性分離(GB、SN標準)
新生霉素1ml*5 125μg/支*5胭脂紅CarmineAR10g
LM0010φ35混合纖維素酯微孔濾膜0.22um100
D3879-25MLRepel-Silane 疏水硅烷--25ml
燦爛黃10g
ThidiazuronTACSTD2 Others Mouse 小鼠 OP2 / TACSTD2 人細胞裂解液 (陽性對照)
CM-M039小鼠胃粘膜上皮細胞*培養基100mL
小鼠腎小球內皮細胞*培養基 100mL
A498人腎癌細胞 Human renal cell carcinoma A498 cells DMEM+10%FBS
IL12B Protein Mouse 重組小鼠 IL12B / IL-12B 蛋白 (His 標簽)
TE671 subline No.2(人橫紋肌肉瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 NCI-H1755 [H1755](人肺癌細胞)
沙眼衣原體PCR檢測試劑盒SulfiteAgar
DEV glutamate broth DEV鹽肉湯 1.10687.0500 MERCK默克 incubation media DEV glutamate broth DEV鹽肉湯 1.10687.0500 MERCK默克
結晶紫中性紅膽鹽葡萄糖瓊脂(VRBGA) 250g 用于阪崎腸桿菌的選擇性分離培養以及腸道菌的計數和鑒別(SN/T 1632.1-2005)。
臍血間質干細胞成脂誘導分化培養基Umbilicalcordbloodmesenchymalstemcellsintotheculturemediuminduceddifferentiationoffat
FB2Supplement鱸魚 進口分裝 Isogambogic acid Isogambogic acid 149655-52-7 C38H44O8 ≥98%
尿素氮(BUN)測試盒(二乙酰肟比色法) 進口分裝 Xanthiazone Xanthiazone 212701-97-8 C11H13NO3S ≥98%
丙酸激酶(PK)測定試劑盒(測組織、血清)(紫外比色法) 進口分裝 3,4-Dimethoxyphenol 3,4-Dimethoxyphenol 2033-89-8 C8H10O3 ≥98%
PCR管 進口分裝 DNA膜上消化試劑盒CD40 Others Canine 狗 CD40 / TNFRSF5 人細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0446SUP-B15(人Ph+急淋白血病細胞系)5×106cells/瓶×2
人骨骼肌細胞RNAHSkMC miRNA5 μg
兔主動脈平滑肌細胞;CCC-SMC-2 癌細胞,MDA-MB-231細胞 J774A.1細胞,小鼠單核巨噬細胞
人胚腎上皮細胞系;KiMA
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/R0405050/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)
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