myPOLS Biotec正在開發新一代的DNA聚合酶

       myPOLS Biotec是一家來自康斯坦茨大學的生物技術公司，來自Andreas Marx教授的研究小組。憑借我們在高通量DNA聚合酶設計方面的專業知識，我們為您的應用定制酶。

       研發活動包括：

       改進的DNA聚合酶用于SNP檢測和甲基化特異性PCR。

       病原體檢測分析，例如用于流感和諾如病毒診斷。

       具有逆轉錄酶活性的熱穩定DNA聚合酶。

       抑制劑抗性聚合酶，用于從樣品中直接PCR，如全血，唾液，細菌，細胞 - 顆粒，植物等。

Isotherm2G DNA聚合酶

myPOLS Biotec正在開發新一代的DNA聚合酶

用于和可靠的應用，例如個性化醫療，病原體檢測，DNA和RNA診斷，法醫學等等。

Isotherm2G DNA聚合酶

       是一種嗜溫性DNA聚合酶，非常適合等溫擴增。它可以從具有高鏈置換活性的DNA和RNA模板合成DNA。Isotherm2G已被突變，以提高反轉錄活性。在55-70°C之間活躍。Isotherm2G DNA聚合酶是等溫擴增反應的優先選擇，如環介導的等溫擴增（LAMP），鏈置換擴增（SDA），滾環擴增（RCA），分枝擴增（RAM），基因組擴增等。Isotherm2G DNA聚合酶以8 U / µl含甘油溶液的形式提供。它與足夠量的10x反應緩沖液一起使用，該緩沖液已針對等溫擴增進行了優化。緩沖液中含3.25 mM鎂離子，終濃度為1x。鎂，引物和dNTPs的宜濃度在很大程度上取決于所應用的應用，應該對其進行優化。

Volcano2G DNA聚合酶

       Volcano 2G是原始Volcano DNA聚合酶的高級版本，具有進一步改善的逆轉錄活性。該酶是一種經過工程改造的，極耐熱的逆轉錄酶和組合的DNA聚合酶，可通過定向的人工進化獲得。Volcano2G DNA聚合酶可直接從RNA模板（無需等溫逆轉錄步驟）直接促進“零步驟" RT-PCR，因為逆轉錄與循環PCR延伸步驟中的DNA擴增同時進行。這也允許在高溫下進行逆轉錄反應，從而將在高溫下融化的RNA中強大的二級結構所遇到的問題降至低。 

       Volcano2G DNA聚合酶包含熱啟動劑配制的，具有逆轉錄酶活性的工程穩定的熱穩定DNA聚合酶和穩健的Taq DNA聚合酶的酶混合物。基于適體的熱啟動劑設計用于在低溫下（例如，在移取反應混合物時）阻斷非特異性DNA聚合酶活性，但會在高于50-55°C的溫度下分解，從而釋放出現已*活化的DNA聚合酶。

       Volcano2G DNA聚酶作為5 U / µl甘油庫存與適當的5x Volcano反應緩沖液一起運輸，該緩沖液針對60-300 bp的擴增子進行了優化。Volcano2G逆轉錄酶可以可靠地從≥1 ng的總RNA輸入中檢測RNA靶標。它不需要Mn 2+即可  獲得宜活性。但是，可以通過向反應中添加Mn 2+來進一步優化某些檢測方法（建議范圍是0.5-1 mM，未提供Mn 2+）。

       RT-PCR活性：已對 Volcano3G RT-PCR Mix進行了成功的RT-PCR性能測試。在實時PCR循環儀中從人總RNA提取物中擴增出151 bp片段（HPRT1 mRNA），并可視化為單個擴增產物。

      DNA聚合酶活性：使用人工DNA模板和DNA引物監控Volcano3G DNA聚合酶活性并將其調整為特定的DNA聚合酶活性。
酶濃度由蛋白質特異性染色確定。
帶有“ 0步"方案的便捷RT-PCR零步協議節省時間
      跳過逆轉錄步驟。不需要等溫逆轉錄步驟。 
      Volcano2G是一種具有PCR活性的逆轉錄酶，非常穩定，在95°C下的半衰期> 40分鐘。

靈敏的RNA檢測      當添加實時PCR染料時，Volcano2G DNA聚合酶也可用于實時PCR。Volcano2G具有Taq DNA聚合酶樣核酸酶結構域，使其也適用于基于水解探針的分析。如此處所示，通過使用基于探針的qPCR分析和零步RT-PCR方案，使用總RNA的10倍稀釋系列檢測了NONO mRNA。來自細胞的直接RT-PCR      對于細胞RNA的可靠RT-PCR，樣品制備步驟*。然而，這些步驟費力，費時并且需要額外的消耗品。使用我們的VolcanoCell2G RT-PCR 2x預混液，您可以用快速便捷的“零步長"方案代替費力的RNA制備。節省時間和金錢      VolcanoCell2G RT-PCR 2x預混液具有簡化的“零步驟"工作流程，使您可以規避費力的純化和提取步驟，從而節省了時間和金錢。

出色的靈敏度     

 VolcanoCell2G RT-PCR 2x實現了低至單個細胞的檢測靈敏度。在此示例中，按照VolcanoCell2G協議從單個隆德人中腦（LUHMES）細胞中檢測到GAPDH mRNA。Isotherm2G DNA polymerase      Isotherm2G DNA聚合酶是一種嗜溫DNA聚合酶，它從DNA和RNA模板合成DNA，具有高鏈置換活性。Isotherm2G是原始Isotherm DNA聚合酶的下一代，具有進一步改善的逆轉錄活性。宜溫度（55-70°C）使Isotherm2G DNA聚合酶成為等溫擴增反應的優先選擇，如環介導等溫擴增（LAMP），鏈置換擴增（SDA），滾環擴增（RCA），衍生物擴增（RAM），基因組擴增等。＃8801S Isotherm2G DNA聚合酶 1600 U，8U /μl，200μl＃8801M Isotherm2G DNA聚合酶 8000 U，8U /μl，1000μl就是這么簡單：只需在59°C溫育30分鐘，就可以使用LAMP方法擴增DNA目標（紅色曲線）和RNA目標（藍色曲線）。Isotherm可用于RCA，SDA，RAM，LAMP和許多其他放大技術。      Isotherm DNA聚合酶也具有非常好的逆轉錄活性。擴增后，可以進行熔解曲線測量以確認特定產物的產生。因此可以進行DNA和RNA檢測，從而實現簡單的反應設置，快速的反應時間和閉管系統。應用• 快速，等溫檢測和鑒定DNA和RNA靶標• 逆轉錄• 實時等溫檢測• LAMP，SDA，RCA，RAMP• 入門擴展反應設置零件 卷 終濃度底漆混合物（各種濃度） 各種μl 各個dNTPs（10 mM） 1μl 400μM10 x Isotherm2G反應緩沖液 2.5μl 1X等溫線DNA聚合酶8 U /μl 1μl 8 U /反應模板/樣品提取物 各種μl 各個不含核酸酶的水 總反應體積高達25μl  將所有組件保存在冰上。在使用前仔細旋轉并混合所有溶液。 引物混合物和濃度很大程度上取決于所采用的等溫反應方法。Isotherm2G和Isotherm2G反應緩沖液不含熒光染料。對于實時測量，請添加適量的合適染料。詳細的產品說明內容Isotherm DNA聚合酶以含有甘油的8U /μl溶液形式提供。它配有針對等溫擴增優化的10倍反應緩沖液。質量控制DNA聚合酶活性：使用人工DNA模板和DNA引物監測等溫線活性并將其調整為特定的DNA聚合酶活性。通過蛋白質特異性染色確定酶濃度。有關批次特定濃度，請通過info@mypols.de查詢更多信息。 法律信息某些等溫擴增方法可能受到保護。購買此產品不會向購買者傳達使用所購產品進行任何商業目的的任何等溫擴增方法的合法權利。存儲本產品采用冷藏包裝。請在抵達-20°C時存放產品。