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南京沃博生物科技有限公司

Zymo品牌酵母相關產品專欄

時間:2023-1-16閱讀:488

作為Zymo Research,我們的第一批產品旨在簡化酵母研究,這就是我們現在商標上三個“萌芽酵母"的靈感來源。除了其他的酵母DNA和RNA純化技術,我們還提供酵母生長和轉化產品。對于酵母和真菌的轉化,一種配方的YPD培養基(YPD Plus)將大多數酵母菌株的轉化效率提高了≥ 50%。我們的Frozen-EZ Yeast Transformation II試劑盒旨在使酵母轉化比傳統方法更簡單、更高效。除此之外,我們還為酵母研究人員提供了幾種特殊產品,包括α因子/a因子交配信息素和5-氟乳清酸。酵母裂解酶和酵母蛋白試劑盒仍然分別是酵母裂解和蛋白純化的重要試劑。

商品目錄
酵母溶解酶
1——Zymolyase-酵母裂解酶。
酵母質粒和DNA純化
2——Zymoprep™酵母質粒Miniprep I, II
3——YeaStar™基因組DNA
酵母轉化
4——YPD Plus™
5——Frozen-EZ酵母轉化II試劑盒
酵母交配信息素
6——α因子交配信息素
7——a因子交配信息素
特種化學品和其他
8——5-FOA
9——YeaStar™ RNA 試劑盒
10——酵母蛋白試劑盒

1.Zymolyase-酵母菌的水解酶

100T當量:從藤黃節桿菌中制備。基本的酶活性是β-1,3-葡聚糖酶和β-1,3-葡聚糖昆布

 方便:提供凍干和存儲緩沖液,用于重組。

 高效的細胞壁消化:提供的存儲緩沖已經過優化,以賦予最大水平的酶活性

酵母和真菌細胞壁的消化是許多實驗過程所必需的,包括染色體制片、免疫熒光、轉化、蛋白質純化等。裂解酶如酶解酶的使用通常用于消化。來自Zymo Research的酶解酶是從藤黃節桿菌中制備的,凍干,并與再懸浮緩沖液一起包裝。

緩沖液已經過優化,以賦予最大水平的酶活性。

這種酶的主要活性是β-1,3葡聚糖酶和β-1,3葡聚糖昆布五糖水解酶,它們水解β-1,3葡聚糖鍵上的葡萄糖聚合物,釋放昆布五糖作為主要產物。最佳酶活性為30°~ 37°C;裂解活性在較高的溫度下停止。R-Zymolyase重組時含有0.5 U/μl RNase A。

敏感真菌屬:阿氏囊霉屬、假絲酵母屬、德巴霉屬、假囊霉屬、內菌屬、漢遜酵母屬、漢遜酵母屬、克勒克酵母屬、克魯維酵母屬、斯達氏油脂酵母屬、梅奇酵母屬屬、畢赤酵母屬、普魯蘭屬、酵母屬、糖菌屬、糖菌屬、裂殖酵母屬、球擬酵母屬。

image.png

酶解酶可用于酵母菌聚糖外殼和球質體的酶解形成。箭頭指示球質體的細胞核和細胞內成分通過部分消化的質膜

*資料來源:

通過掃描電子顯微鏡(SEM)分離和可視化酵母細胞核的方案

Elena Kiseleva, Terry D Allen, Sandra A Rutherford, Steve Murray, Ksenia Morozova, Fiona Gardiner, Martin W Goldberg & Sheona P Drummond.

Nature Protocols 2, 1943 - 1953 (2007) Published online: 9 August 2007 doi:10.1038/nprot.2007.251

 

 

產品

貨號

規格說明

規格表

應用

Zymolayse -酵母水解酶

E1004

1000U

酶濃度5 U/µl總蛋白濃度:10 - 15mg /ml存儲:-70°C
單位定義:一個分解單位(U)定義為10%在800nm處持續30min, od值下降

原生質球/原生質體形成;酵母細胞融合;酵母轉化

E1005

2000U

R-Zymolayse(與核糖核酸酶)

E1006

1000U

 

 2.Zymoprep™酵母質粒小提取試劑盒I, II

簡單:快速,容易地從酵母中拯救質粒。

高效分離:適用于低拷貝和難以分離的質粒

高質量:分離的質粒DNA是分子生物學技術的理想選擇,如PCR,轉化,雜交等。

Zymoprep™酵母質粒小提取試劑盒提供了從釀酒酵母、白色念珠菌和酵母中分離質粒所需的所有試劑和任何細胞壁對酵母菌裂解酶敏感的真菌。該程序簡單高效,無需需要玻璃珠。可靠地從酵母菌菌落、平板貼片或液體培養中恢復質粒DNA的。該系統是低拷貝數和難分離質粒的理想選擇。洗脫后的質粒DNA可直接用于大腸桿菌轉化,PCR和Southern blot分析。

1673852382343.jpg

 

產品

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規格

說明

應用

zymoprep™酵母質粒 I

D2001

100Preps

格式:異丙醇沉淀
洗脫量:≥35µl
處理時間:35 - 90分鐘
DNA大小限制:≤23kb

從酵母中回收質粒

zymoprep™酵母質粒Miniprep II

D2004

50Preps

格式:Spin-Column
洗脫量:≥10µl
處理時間:35 - 90分鐘
綁定容量:5µg
DNA大小限制:≤23kb

 3.YeaStar™基因組DNA試劑盒

簡單:快速旋轉柱程序產生純酵母基因組DNA,不使用玻璃珠。

多功能:有效的DNA分離從廣泛的真菌物種易感的酶解酶。

高質量:分離的基因組DNA可用于Southern blotting, PCR,限制性內切酶切等。

      YeaStar™基因組DNA試劑盒設計用于可靠和高效地從廣泛的真菌基因組DNA分離包括煙曲霉、尼度曲霉、金黃色尼氏曲霉、白色念珠菌、畢赤酵母、釀酒酵母菌,裂聚糖酵母菌,以及任何細胞壁對酵母菌裂解酶敏感的真菌的該試劑盒基于高效酶解和Zymo-Spin™柱技術。每個標準液可產約7 - 20µg的DNA大小分布在35 - 60kb之間。得到的基因組DNA可以用于直接分析,包括Southern blotting, PCR,限制性內切酶消化等。

1673852414772.jpg  

DNA的瓊脂糖凝膠電泳

YeaStar™基因組DNA試劑盒線:M: λ-DNA Hind III標記;

1:美國酵母;2: p . pastoris;3:白念珠菌;4:美國非洲酒。

 

產品

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說明

應用

YeaStar™基因組DNA試劑盒

D2002

40preps

格式:Spin-Column
綁定容量:25µg
洗脫量:≥60µl
處理時間:1.5小時

酵母;Zymolayse-sensitive真菌;gDNA隔離

4.YPD Plus

轉化效率:特殊配方的酵母生長培養基增加酵母轉化效率提高50%。

更好的結果:推薦用于突變酵母菌株,表現出不適合的生長特性轉換。

簡單:只需補充酵母轉化反應混合物與YPD Plus™,以實現酵母的持續增加轉換效率。

      在酵母轉化協議的outgrowth步驟通常是提高整體酵母轉化效率的關鍵。這是有用的,當試圖轉化效率的文庫篩選或轉化酵母與多重質粒。YPD Plus™是一種特殊配方的酵母轉化效率提高> 50%。推薦使用YPD Plus™對于突變的酵母菌株,表現出不好的生長特性,不易于轉化。只需補充酵母與YPD Plus™的轉化反應混合物,以實現酵母轉化效率的持續提高。

1673852426558.jpg 

YPD與Zymo Research的YPD Plus™培養基的比較。酵母在這兩

種標準中都執行了轉換和生長YPD或YPD Plus™介質。轉化體的

相對百分比如左邊的圖形。每個圖代表相對轉換效率從六個單獨

的轉換取平均值。

產品

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規格

應用

酵母puls

Y1003-50

50ml

酵母轉化和生長

Y1003-100

100ml

5.Frozen-EZ酵母轉化II™試劑盒

快速:具有高轉化效率的酵母細胞可以在10分鐘內制備。

簡單:在不攜帶DNA的情況下,可以在≤1小時內轉化單個或多個質粒的酵母。

多功能:可用于釀酒酵母,以及其他真菌,包括白色念珠菌,絨球酵母和巴斯托拉斯酵母。兼容的有圓形和線性DNA。

       Frozen-EZ酵母轉化II™試劑盒旨在使酵母轉化和庫篩選更容易和更多比目前可用的方法有效。酵母細胞可立即轉化或存儲(即≤-70℃)稍后使用。用該試劑盒制備的酵母可以轉化環狀和線性dna。還有冰凍ez酵母Transformation II™試劑盒可用于其他真菌,包括白色念珠菌、絨球酵母和巴斯德氏酵母。

image.png 

 

產品

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規格

說明

應用

Frozen-EZ酵母轉化II™試劑盒

T2001

120rxns

轉換效率:105-106cfu /µg
轉化DNA輸入:0.2 - 1.0µg
活性細胞穩定性:-70°C條件下≥1年

活性酵母細胞制備;

相容性:S. cerevisiae, S。

6.酵母α-因子(α-因子)交配信息素水溶液。

       當酵母“a"和“α"細胞遇到相反細胞類型的交配信息素時,它們會誘導交配所需的基因,G1的細胞周期受到抑制,細胞表面和核決定因子發生改變,并在梨中發生顯著的形態伸長形狀,親切地稱為“閑談"。這些改變使酵母細胞為交配和融合形成穩定的二倍體做好準備。a/α二倍體對兩種類型的交配信息素都不敏感,但可以通過營養誘導進行減數分裂剝奪。利用酵母交配信息素對細胞周期、細胞形態、轉錄等方面的研究具有開創性意義誘導,以及信號轉導途徑。酶研究提供了α-因子肽交配信息素作為一種隨時可用的液體,已被優化的兩種活性穩定性,并保證通過多次凍融循環保持生物功能。

image.png

α-因子活性測定。α因子肽信息素(10 μl)作用于MATa細胞草坪上的無菌過濾器,分別為野生型BAR1 (200 μM,右)pro挑逗或BAR1 Δ (50 μM,左;5μM,中心)。敏感的α-因子明顯表現為清理區(G1了細胞)。BAR1蛋白酶缺失的細胞對α-因子的活性比bar -1蛋白酶陽性的野生株高需要多20 - 50倍的信息素來阻止細胞。

7.a-Factor Mating Pheromone

酵母a因子(a因子)交配信息素水溶液

      a-因子是酵母中兩種交配信息素之一。它是交配信息素α-因子(alpha-factor)的“異性"。當酵母a和α細胞遇到相反的交配信息素時,它們會誘導交配所需的基因,阻止細胞周期在G1,改變細胞表面和核決定因子,并引起形態改變。

產品

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規格

說明

應用

α-Factor Mating Pheromone

Y1001

240ul

分子量:1684.0

活性試驗:G1阻滯

純度:> 98%,HPLC

儲存:-20°C

酵母交配感應;G1期抑制

a-Factor Mating Pheromone

Y1004-500

500ul

分子量:1630

活性試驗:G1阻滯

純度:> - 80%,HPLC法測定

存儲:-20°C

8.5-Fluoroorotic酸(5-FOA)

酵母菌遺傳反選擇劑:常用來固化酵母菌菌株的質粒、質粒改組、等位基因更換,雙混合屏幕。

方便:可作為純粉末或現成的DMSO溶液。

超純:通過薄層色譜(TLC)、熔點和批比測定> 98%。

       利用5-氟乳酸菌(5-FOA)進行酵母反選擇是一種常用的遺傳篩選方法。固化酵母株質粒、質粒洗牌、等位基因置換和雙雜交篩選等方法都可以利用5-FOA。否則5-FOA對酵母無毒,在表達功能性URA3基因編碼的菌株中,5-FOA被轉化為毒性形式(即5-氟)對于參與合成的渥洛汀-5 ' -單磷酸脫羧酶。表型為Ura+的酵母菌株選擇后成為Ura-和5-FOAR。使用超純(> 98%)5-FOA粉末時,由于其不溶性,研究者經常提出5-FOA的溶解度問題水。因此,我們在DMSO中提供了100倍濃度(100 mg/ml)的5-FOA溶液。這是經過測試和驗證的基礎上計數器選擇活動。

       使用5-FOA計數器選擇酵母。對營養不良的酵母菌(ura3-1)進行了檢測在含有5-FOA的培養基上生長的能力。檢測了三種菌株:單獨的wt (YZ1),帶有低拷貝率URA3的wt質粒(YZ2),以及缺失一個不能失去補體的基本基因的突變株(ΔEG)URA3質粒(YZ3)。從左到右,從上到下為合成葡萄糖培養基(SC): 1。SC,合成無5FOA;2.標準- SC-5-FOA (SC-5-FOA由超純5-FOA粉末制成,1克/升)SC-5-FOA由100X 5-FOA制成。 

解決方案:

       對于每個平板,上面:酵母菌株:YZ1野生型,Ura- (wt, Ura- 3-52),右邊:酵母菌株:YZ2, wt攜帶低拷貝,URA3左圖:酵母株:YZ3: ΔEG,含互補質粒(pRS316: EG, URA3, CEN)。的在所有含有5-FOA的培養基中,對菌株YZ3的反選擇都是明顯的,沒有明顯的5-FOAR菌落對照菌株YZ1和YZ2的細胞可以在5-FOA培養基上生長。

產品

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說明

應用

5-FOA(粉劑)

F9001-1

1g

分子量:174.0;
鑒別方法:薄層色譜法、熔點法和很多比較;
純度:TLC估計98%,熔點;

批次比較溶解度:50mg/1ml(1:1 NH4OH:H2O)緩慢加熱,   > 100mg/ml DMSO
儲存方式:冷凍保存

酵母計數器選擇;酵母二者混合屏幕;質粒固化;質粒轉移;等位基因替換

F9001-5

5g

100X 5-FOA(液體)

F9003

10ml

 

9.YeaStar™RNA試劑盒

簡單:快速旋轉柱程序產生純酵母RNA,不使用玻璃珠或。

多功能:有效的RNA分離從廣泛的真菌物種易感的酶裂解酶。

高質量:分離出的RNA適用于RT-PCR, northern blotting等

       YeaStar™RNA試劑盒能夠從廣泛的真菌中提取RNA,包括:煙曲霉,尼度曲霉,金黃色念珠菌,白色念珠菌,畢赤酵母,釀酒酵母菌,酵母。這個工具包非常適合從任何可以被酵母菌裂解酶分解的真菌中提純高質量的總RNA。該試劑盒有助于使用創新的Zymo-Spin™柱技術從1-1.5 ml培養細胞中提純10-25份總RNA。

產品

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說明

應用

YeaStar™RNA試劑盒

R1002

40Preps

格式:旋轉列洗脫量:≥60µl

綁定容量:25µg/prep

大小限制:≥200 nt

處理時間:30分鐘

酵母;對酵母菌裂解敏感的真菌裂解酶(即發酵酶);核糖核酸隔離

 10.酵母蛋白試劑盒

方便:快速有效的酵母菌裂解下游蛋白和DNA分析方法。

多功能:程序適用于任何對酶解酶敏感的真菌物種。

有效的球化:western blotting和PCR的理想方案。

       酵母蛋白試劑盒是一種簡單、方便的方法。酵母菌細胞快速而的裂解該試劑盒已經過優化,用于釀酒酵母和白色念珠菌,但可以用于任何對酵母菌裂解酶(zymolyase)敏感的真菌種類消化。消化過程可以有效地生成球質體,這使得它們成為蛋白質和DNA分析的理想選擇,分別包括Western blotting和PCR。

產品

貨號

規格

應用

酵母蛋白試劑盒

Y1002

200preps

酵母細胞溶菌作用;蛋白質分析;DNA分析

 


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