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單克隆抗體法和聯苯胺法檢測糞便隱血試劑盒的對比
2022-3-22 閱讀(1155)
單克隆抗體法和聯苯胺法檢測糞便隱血試劑盒的對比
糞便潛血檢查方法國內主要有化學檢測法和試劑帶法兩種,化學大便潛血檢查試劑是利用血紅蛋白中的亞鐵血紅素,有類似過氧化物酶的作用,具有弱過氧化物酶活動,能催化過氧化物酶,放出新生態氧,將無色的受體氧化為顯色的物質的性質?,F主要糞便隱血試劑帶法主要利用免疫的方法檢測人嘔吐物中的人血紅蛋白(Hb)。在檢驗試紙條的檢測線包被有抗人血紅蛋白抗體,質控線包被有羊抗鼠IgG抗體,在檢測試紙條加樣的一端固定有另一抗人血紅蛋白單克隆抗體標記的膠體金顆粒。經收集處理的標本與膠體金顆?;旌虾?如存在人血紅蛋白時,樣品有Hb會與和膠體金上的抗體結合,可在檢測線上出現紅色色帶。
FOBT 是臨床常規檢驗項目之一,主要是檢測糞便中的血紅蛋白,對消化道腫 瘤、消化道出血性疾病的早期診治具有非常重要的價值。愈創木脂法是最早用 于 FOBT 檢測的方法,隨后出現的方法包括鄰聯甲苯胺法、匹拉米洞法、孔雀 綠法等 。
化學法的檢測原理大致相同,均是基于血紅蛋白中的亞鐵血紅素有 類似過氧化酶的活性,能催化 H 2O 2 作為電子受體使色原氧化呈色,且顯色 深淺與血紅蛋白水平呈正相關 。
鄰聯甲苯胺法較為靈敏,即使糞便中僅含有 少量的血紅蛋白或存在具有過氧化物酶活性的物質,都會使檢測結果呈陽性, 例如,受試者食用動物血液、內臟類食品或食用含有過氧化物酶的葉綠素的瓜 果蔬菜,均可能出現假陽性結果。因此,在采用鄰聯甲苯胺法進行 FOBT 檢測 前,應囑咐患者素食 3 d,以及禁用鐵劑等藥物 。
其他可導致假陰性結果的因素包括:
(1) 標本中血紅蛋白濃度過高,受前帶現象影響而出現假陰性結果;
(2) 血紅蛋白中的 珠蛋白鏈在胃酸的作用下迅速水解,或在小腸內被蛋白酶降解,導致血紅蛋白 失去單克隆抗體可特異性識別、結合的抗原決定簇,或在體外或胃腸道內的細 菌作用下,糞便中的血紅蛋白缺失免疫活性,導致出現假陰性結果;
(3) 試 劑中的 H 2O 2 濃度降低,或因保存不當而失效;
(4) 檢測反應時間不足,顯色 判斷不準確。與鄰聯甲苯胺法相比,匹拉米洞半定量法的靈敏度有所降低,微 量血紅蛋白可出現假陰性結果。