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技術(shù)文章

該怎么進(jìn)行ELISA試劑盒洗刷工作

閱讀:274發(fā)布時(shí)間:2019-9-5

ELISA試劑盒進(jìn)行洗刷工作時(shí),主要選用以下兩種辦法。

流水沖刷式:用于小珠載體的洗刷,洗刷液僅為蒸餾水甚至可用自來(lái)水。洗刷時(shí)附接一特別設(shè)備,使小珠在流水沖擊下不斷地翻滾淋洗,持續(xù)沖刷2分鐘后,吸干液體,再用蒸餾水浸泡2分鐘,吸干即可。浸泡式猶如盆浴,流水沖刷式則比方淋浴,其洗刷效果更為*,且也簡(jiǎn)練、快速。已有試驗(yàn)標(biāo)明,流水沖刷式相同也適用于微量滴定板的洗刷。洗刷時(shí)設(shè)法加大水流量或加大水壓,讓水流沖擊板孔外表,洗刷效果更佳。

浸泡式:吸干或甩干孔內(nèi)反響液;

用洗刷液過洗一遍(將洗刷液注滿板孔后,即甩去);

浸泡,行將洗刷液注滿板孔,放置1-2分鐘,間歇搖晃,浸泡時(shí)刻不可隨意縮短;

吸干孔內(nèi)液體。吸干應(yīng)*,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干;

洗刷3-4次,或按說(shuō)明規(guī)則。在間接法中如本底較高,可增加洗刷次數(shù)或延伸浸泡時(shí)刻。

ELISA試劑盒的設(shè)置規(guī)范曲線樣品的規(guī)范濃度規(guī)劃要有一個(gè)比較大的跨度,并且要能包括你所要檢測(cè)試驗(yàn)樣品的濃度,即樣品的濃度要在規(guī)范曲線濃度規(guī)劃之內(nèi),包括上限和下限,而關(guān)于呈S型的規(guī)范曲線,盡量要使試驗(yàn)樣品的濃度在中間斜度及陡段,即曲線簡(jiǎn)直成直線的規(guī)劃內(nèi)。

用倍比稀釋法制造規(guī)范曲線中的規(guī)范樣品濃度,這樣就可以確保規(guī)范樣品的濃度不會(huì)呈現(xiàn)較大的違反。

樣品的濃度等目標(biāo)是根據(jù)規(guī)范曲線計(jì)算出來(lái)的,所以要把做規(guī)范曲線看作是比做正式試驗(yàn)還要重要的一件事,否則后邊的試驗(yàn)效果無(wú)從談起。

做出的規(guī)范曲線相關(guān)系數(shù)因試驗(yàn)要求不同而有所改變,但一般來(lái)說(shuō),相關(guān)系數(shù)R至少要大于0.98,關(guān)于有些試驗(yàn),至少要0.99甚至是0.999。

檢測(cè)規(guī)范樣品時(shí),應(yīng)按濃度遞加次序進(jìn)行,以削減高濃度對(duì)低濃度的影響,進(jìn)步準(zhǔn)確性。

規(guī)范曲線的樣品數(shù)一般為7個(gè)點(diǎn),但至少要確保有5個(gè)點(diǎn)。


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