lambda（λ） DNA（不含N6-甲基腺嘌呤）

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更新時間：2018-06-14 13:10:36瀏覽次數(shù)：325次

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產品簡介

lambda（λ） DNA（不含N6-甲基腺嘌本產品Lambda DNA（λ DNA）為λ噬菌體中的DNA，是一種常見的DNA底物。分子量為31.5 × 106 Da/48,502 bp。A型為普通Lambda DNA。B型為不含N6 -甲基腺嘌呤Lambda DNA。C型為非甲基化的cl857 Sam7 λ DNA，是從感染的大腸桿菌GM119菌株中分離得到的。該菌株缺乏dam 及dcm 甲呤）

詳細介紹

lambda（λ） DNA（不含N6-甲基腺嘌呤）

名稱	規(guī)格	價格	手冊
lambda（λ） DNA（不含N6-甲基腺嘌呤）	250ug	詢價

本產品Lambda DNA（λ DNA）為λ噬菌體中的DNA，是一種常見的DNA底物。分子量為31.5 × 106 Da/48,502 bp。A型為普lambda（λ） DNA（不含N6-甲基腺嘌呤）通Lambda DNA。B型為不含N6 -甲基腺嘌呤Lambda DNA。C型為非甲基化的cl857 Sam7 λ DNA，是從感染的大腸桿菌GM119菌株中分離得到的。該菌株缺乏dam 及dcm 甲基化酶活性。非甲基化的λ DNA 可以作為對DNA 甲基化敏感的限制性酶的底物。
RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質分離，并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進入水相，lambda（λ） DNA（不含N6-甲基腺嘌呤）離心后可形成水相層和有機層，這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質。
實驗步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產物的電泳和結果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術。首先經(jīng)反轉錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質粒DNA是基于染色體DNA與質粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結構解開而變性。質粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價閉合環(huán)狀的兩條互補鏈不會*分離，當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調節(jié)其pH至中性時，變性的質粒DNA又恢復原來的構型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復性而形成纏連的網(wǎng)狀結構，通過離心，染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。
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