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青島捷世康生物有限公司
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閱讀：760發布時間：2018-12-3
土壤纖維素酶（Solid-cellulase，S-CL）活性測定試劑盒說明書
分光光度法 50管/24樣
正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義：
S-CL主要來源于土壤微生物，S-CL催化農作物秸稈產生的葡萄糖是主要的碳源營養物質。
測定原理：
采用蒽酮比色法測定S-CL催化纖維素降解產生的還原糖的含量。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計、水浴鍋、可調式移液器、1mL 玻璃比色皿、甲苯、硫酸（不允許快遞）
和蒸餾水。
試劑的組成和配制：
試劑一：甲苯10mL×1 瓶，4℃保存；（自備）
試劑二：液體6mL×1 瓶，4℃保存；
試劑三：液體40mL×1 瓶，4℃保存；
試劑四：粉劑×1 瓶，4℃保存； 臨用前加入5mL 蒸餾水和45mL 濃硫酸充分溶解待用。
樣品處理：
新鮮土樣自然風干或37 度烘箱風干，過30~50 目篩。
加樣表和測定步驟：
對照管 測定管
風干土樣（g） 0.1 0.1
試劑一 (μL) 100 100
振蕩混勻15min
試劑二（μL ） 180
試劑三（μL ） 740 740
蒸餾水（μL ） 360 180
37℃振蕩反應3h 后，90℃水浴15min（蓋緊，防止水分散失）,冷卻后
8000g 25℃離心10min，取上清，得糖化液
糖化液 (μL) 350 350
試劑四 (μL) 650 650
混勻， 90℃水浴10min（蓋緊，防止水分散失），冷卻，620nm 處蒸餾水調零，測定吸光值
A，計算ΔA=A 測定管-A 對照管。每個測定管設一個對照管。
S-CL 活力計算：
標準條件下測定的回歸方程為y = 5.018x - 0.0462；x 為標準品濃度（mg/mL），y 為吸光值。
單位的定義：每天每g 土樣中產生1mg 葡萄糖定義為一個酶活力單位。
S-CL 活力（mg/d/g）＝(ΔA+0.0462) ÷5.018×V 反總÷W÷T =19.1×(ΔA+0.0462)
T：反應時間，3h=1/8d； V 反總：反應體系總體積：1.2mL；W：樣本質量，0.1g。
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