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上海邦景實業有限公司
主營產品： 進口elisa試劑盒，細胞株，細胞系，菌種 |
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更新時間：2022-06-22 14:52:44瀏覽次數：207
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中文名稱：重組煙草蝕紋病毒蛋白酶
英文名稱：rTEV Protease
產品規格：1000U
發貨周期：1～3天
產品貨號：BJ-F0165107
產品介紹：
重組型TEV蛋白酶（rTEV）是經過基因工程改造和純化后的重組蛋白酶，不僅保持天然TEV酶的功能活性，且在廣譜的溫度范圍內表現出更好的穩定性和特異性。rTEV是一種用來切除融合蛋白上親和標簽的常用工具酶，具有很的位點特異性，嚴格識別七氨基酸序列EXXYXQ↓(G/S)，切割位點在和甘/絲之間。普遍應用的七氨基酸序列為：Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln↓-Gly。rTEV在pH7.0，30℃時可達到佳活性，但在pH6.0-8.5和溫度4-30℃的廣泛范圍內皆有活性（見表1），使得反應條件的選擇可根據目的蛋白的情況而靈活變動。另外rTEV切割后也能用其N端的6×His標簽，通過Ni-NTA樹脂去除，以達到純化目的蛋白的目的。 影響天然TEV酶活性的常見因素：1）PMSF和AEBSF（1mM），TLCK（1mM），Bestatin（1mg/ml）、Pestatin A（1mM），EDTA（1mM）以及E-64（3mg/ml），以上這些蛋白酶抑制劑對rTEV的活性沒有影響；2）Zn離子（＞5mM）對rTEV活性有抑制；3）與半胱反應的試劑也是rTEV的潛在抑制劑。 來源：大腸桿菌 外觀：無色透明液體 比活力：5U/μl 活性定義：在1×rTEV Buffer（50mM Tris，pH8.0，0.5mM?EDTA，1mM?DTT）中，30℃反應1h，剪切>85%的3μg底物所需要的酶量定義為一個活性單位。 純化（Purification?）：Ni親和純化 純度：≥95%（by SDS-PAGE） 產品組份： rTEV Protease（5U/μl）—————200μl rTEV Buffer 1（20×）——————2ml rTEV Buffer 2（1000×）—————50μl 儲存條件：-20℃，有效期一年。 |
使用方法：本產品僅用于科研
注意：標本采集人員需按有關規定做好個人防護。咽、鼻拭子最好在發病的3天采集。
在安全柜內將本產品分裝到自備的、螺旋蓋內有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級容器)。
鼻拭子的采集：將棉簽輕輕插入鼻道內鼻腭處，停留片刻后緩慢轉動退出。以同一拭子拭兩側鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集：用棉簽擦拭雙側咽扁桃體及咽后壁，將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
直接在一級容器上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時間、編號、患者姓名。
將密閉后的標本放入大小適合的塑料袋內密封；每袋裝一份標本。同時也將標本有關信息填在標本送檢表上，連同一級容器封于塑料袋內。
將裝標本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內有橡膠圈的塑料容器(二級容器)內，擰緊蓋，在容器上標明有關信息。同一患者2份以上的密封標本，可以放在同一個二級容器內。二級容器要承受不少于95 KPa的壓力，內襯具吸水和緩沖能力的物質。所有容器必須印有生物危險標注。
將二級容器擺放在專用運輸箱內(或疫苗運輸箱)，放入冰排，然后以柔軟物質填充，并密封，由專人(2人)運送，不得郵寄，最好使用專車。
采集的標本若不能在24小時內送達，則應盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的，需在4℃冰箱短時間暫存，并盡快聯系遞送標本。流感病毒在-20℃～-40℃時不穩定，故長期保存最好在-70℃溫度以下進行。
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)。
同位素核酸蛋白結合反應試劑盒
凝膠遷移電泳分析試劑盒
核酸－蛋白結合凝膠電泳定量分析（McKay）試劑盒
3′端DNA轉移酶標記試劑盒
核酸蛋白結合反應試劑盒
鮭魚精DNA DNA from salmon sperm 質量規格：進分，Sigma31149,蛋白小于5% Mousethyroopin-releasinghormone,Helisa小鼠促甲狀釋放激素(H)elisa規格：96T/48T
5-氟脫氧胞苷 5-Fluoro-2'-deoxycytidine 質量規格：98%,進分 小鼠抗受體(A)elisa ，英文名： A ELISA Kit
5-氟-2‘-脫氧尿苷;氟尿苷 5-Fluoro-2'--deoxyuridine 質量規格：>99%,BR 大鼠血栓前體蛋白(TpP)ELISA檢測試劑盒Ratthrombusprecursorprotein,TpPELISAKit 96T/48T
鳥苷;核苷 Guanosine 質量規格：≥98%,細胞培養級 人乙酰轉移酶(ChAT)試劑盒 Human ChAT ELISA Kit
核苷(標準品) Guanosine 質量規格：≥98%,標準品 RatPlatelet-DerivedGrowthFactorSolubleReceptorα,PDGFsR-αELISAKit大鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)elisa規格：96T/48T
GDPNa2;5’-二鳥苷二鈉 GDP Di Salt 質量規格：>90%,BR GST融合蛋白同位素([γ32P]GTP)標記試劑盒20
SU11274 SU-11274 質量規格：>98%,選擇性的Met抑制劑 MouseThyroxineaibody,TAbelisa小鼠甲狀抗體(TAb)elisa規格：96T/48T
尿苷；核苷 Uridine 質量規格：>99%,BR，可用于細胞培養 小鼠抗Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)elisa ，英文名： AT-Ⅲ ELISA Kit
核苷,尿苷(標準品) Uridine 質量規格：HPLC>98%,標準品 大鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA檢測試劑盒RaeceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligand,RANKLELISAKit 96T/48T
UTP;5‘-三尿苷三鈉 UTP, Tri Salt 質量規格：>98%,BR 人氧化代謝物 試劑盒 Human Biopyrrin ELISA Kit
重組煙草蝕紋病毒蛋白酶苷松新酮 Nardosinone 質量規格：HPLC≥98%，標準品 小鼠抗肌蛋白(UN)elisa ，英文名： UN ELISA Kit
白花前胡乙素 Praeruptorin B 質量規格：HPLC≥98%，標準品 小鼠抗肌內膜抗體IgA(EMA IgA)elisa ，英文名： EMA IgA ELISA Kit
白術內酯Ⅱ；蒼術內酯II Atractylenolide II 質量規格：HPLC≥98%，標準品 小鼠抗肌內膜抗體IgA(EMAIgA)ELISA檢測試劑盒Mouseai-EndomysialAibodyIgA,EMAIgAELISAKit 96T/48T
皂苷A Clinodiside A 質量規格：HPLC≥98%，標準品 小鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)ELISA檢測試劑盒Mouseai-Thyroid-Peroxidaseaibody,TPO-AbELISAKit 96T/48T
三白草酮 Sauchinone 質量規格：HPLC≥98%，標準品 小鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)elisa ，英文名： TPO-Ab ELISA Kit
大黃素-8-β-D-吡喃葡萄糖苷 Emodin-8-glucoside 質量規格：HPLC≥98%，標準品 小鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)elisa ，英文名： ATGA/TGAB ELISA Kit
異蓮心堿 Isoliensinine 質量規格：HPLC≥98%，標準品 小鼠抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)ELISA檢測試劑盒Mousetarate-resistaacidphosphatase5b,ACP-5bELISAKit 96T/48T
蓮心堿高氯酸鹽 Liensinine Perchlorate 質量規格：HPLC≥98%，標準品 小鼠抗抗體(AsAb)elisa ，英文名： AsAb ELISA Kit
丁烯基苯酞 3-Butylidenephthalide 質量規格：HPLC≥98%，標準品川芎提取,液體 小鼠抗尿激素(ADH)elisa ，英文名： ADH ELISA Kit
茯苓酸 Pachymic acid 質量規格：HPLC≥98%，標準品 小鼠抗尿激素/血管加壓素/精加壓素(ADH/VP/AVP)ELISA檢測試劑盒Mouseaidiuretichormone/vasopressin/argininevasopressin,ADH/VP/AVPELISAKit 96T/48T
生物醫學實驗中，常常需要從液體樣品(如血漿，培養基)中純化病毒，但由于病毒顆粒十分細小，傳統的分離方法是使用長時間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來，此操作非常繁瑣，并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統方法的缺點，本公司開發了本產品。
