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上海邦景實業有限公司
主營產品： 進口elisa試劑盒，細胞株，細胞系，菌種 |
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更新時間：2022-06-22 15:57:49瀏覽次數：174
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生物醫學實驗中，常常需要從液體樣品(如血漿，培養基)中純化病毒，但由于病毒顆粒十分細小，傳統的分離方法是使用長時間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來，此操作非常繁瑣，并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統方法的缺點，本公司開發了本產品。
中文名稱：DAB法顯色試劑盒(兔IgG)
英文名稱：Western Blotting Rabbit IgG DAB Chromogenic Reagent Kit
產品規格：1盒
發貨周期：1～3天
產品貨號：BJ-F0165166
產品介紹：
本試劑盒主要用于western blotting的DAB顯色，含有抗兔IgG酶標二抗。 SDS-PAGE電泳后，蛋白質按照分子量大小分離，轉移到固相載體（例如硝酸纖維素薄膜）后，固相載體以非共價鍵形式吸附蛋白質，以固相載體上的蛋白質或多肽作為抗原，與對應的抗體起免疫反應，再與酶標記的抗體起反應，經過底物顯色以檢測電泳分離的特異性的蛋白。 試劑盒組分： 封閉試劑————————————30g 10倍濃縮抗體稀釋液———————50ml 酶標二抗————————————0.5ml，效價1:500～3000 20倍DAB濃縮顯色液-———————5mlA+5mlB。 注意事項： 1. 請根據一抗來源選擇試劑盒。 2. western blotting DAB顯色法操作簡單，但其敏感性與ECL發光發有一定的差距，一般只適用于豐度較高的蛋白。 3. 可以根據顯色結果來優化實驗反應時間。如背景過深，可延長膜封閉時間，加長終漂洗次數與時間。如果條帶過弱，可延長抗體孵育時間。 4. 如果*沒有條帶，請檢查前期蛋白處理及實驗過程， 如果確認無誤，反復兩次依舊無結果，請換用ECL發光法顯色。 5. TBS-T（0.01M）配制方法：稱取NaCl 8.5g ，Tris 1.21g ，用800ml 的雙蒸水溶解，用鹽酸調PH 到7.6，再加入0.5ml Tween－20，用雙蒸水加至1000ml，混勻即可。（也可按照自己的配制習慣來配制） 儲存條件：-20℃避光，有效期一年。 |
使用方法：本產品僅用于科研
注意：標本采集人員需按有關規定做好個人防護。咽、鼻拭子最好在發病的3天采集。
在安全柜內將本產品分裝到自備的、螺旋蓋內有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級容器)。
鼻拭子的采集：將棉簽輕輕插入鼻道內鼻腭處，停留片刻后緩慢轉動退出。以同一拭子拭兩側鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集：用棉簽擦拭雙側咽扁桃體及咽后壁，將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
直接在一級容器上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時間、編號、患者姓名。
將密閉后的標本放入大小適合的塑料袋內密封；每袋裝一份標本。同時也將標本有關信息填在標本送檢表上，連同一級容器封于塑料袋內。
將裝標本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內有橡膠圈的塑料容器(二級容器)內，擰緊蓋，在容器上標明有關信息。同一患者2份以上的密封標本，可以放在同一個二級容器內。二級容器要承受不少于95 KPa的壓力，內襯具吸水和緩沖能力的物質。所有容器必須印有生物危險標注。
將二級容器擺放在專用運輸箱內(或疫苗運輸箱)，放入冰排，然后以柔軟物質填充，并密封，由專人(2人)運送，不得郵寄，最好使用專車。
采集的標本若不能在24小時內送達，則應盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的，需在4℃冰箱短時間暫存，并盡快聯系遞送標本。流感病毒在-20℃～-40℃時不穩定，故長期保存最好在-70℃溫度以下進行。
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
細胞IKKα活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
組織IKKα活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
細胞IKKβ活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
組織IKKβ活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
細胞IRAK1活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
小鼠缺血修飾白蛋白(IMA)elisa ，英文名： IMA ELISA Kit
小鼠血栓調節蛋白(TM)ELISA檢測試劑盒Mousethrombomodulin,TMELISAKit 96T/48T
人鈣結合蛋白S100A13 免疫試劑盒 Human S100A13 ELISA Kit
RatIerleukin1receptoraagonist,IL-1raELISAKit大鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)elisa規格：96T/48T
Caspase-3(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克
MouseL-phenylalanine,LPAelisa小鼠苯氨酸(LPA)elisa規格：96T/48T
DAB法顯色試劑盒(兔IgG)小鼠α1干擾素(IFN-α1)elisa檢測試劑盒
小鼠α1干擾素(IFN-α1)elisa分析檢測試劑盒
小鼠Zeste同源物增子1(EZH1)elisa檢測試劑盒
小鼠YY肽(PYY)elisa檢測試劑盒
小鼠X-射線修復交叉互補蛋白6(XRCC6)elisa檢測試劑盒
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)。
