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上海邦景實業有限公司
主營產品： 進口elisa試劑盒，細胞株，細胞系，菌種 |
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- www.bhsy-e.com/
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- 所在地 上海市
更新時間：2022-06-22 15:47:11瀏覽次數：220
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操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)。
中文名稱：熒光蛋白上樣緩沖液
英文名稱：Band-Now Pre-Staining Protein Sample Treatment Buffer for SDS-PAGE
產品規格：100μl|1ml|2ml
發貨周期：1～3天
產品貨號：BJ-F0165157
生物醫學實驗中，常常需要從液體樣品(如血漿，培養基)中純化病毒，但由于病毒顆粒十分細小，傳統的分離方法是使用長時間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來，此操作非常繁瑣，并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統方法的缺點，本公司開發了本產品。
產品介紹：
熒光蛋白上樣緩沖液在電泳前的樣品處理階段對SDS-PAGE的蛋白樣品進行預染，標記上熒光。實驗完成以后，凝膠中或轉膜后的蛋白條可直接通過紫外燈、LED燈或其他數字成像系統進行觀察和分析，無需染色脫色。 熒光蛋白上樣緩沖液靈敏度高比銀染高。穩定性，背景低。可對所有蛋白進行染色，不影響蛋白的遷移率與電泳圖譜。電泳過程中，游離的染料分子與溴酚藍的遷移速率一致，跑膠結束時 移至凝膠末端，背景干凈。熒光蛋白上樣緩沖液非常適合用于追蹤蛋白表達純化以及Western blot的SDS-PAGE。 使用步驟： 1. 請在使用前根據管壁標簽上的體積加入resuspension buffer重懸。Resuspension buffer在4℃可能會有沉淀產生，室溫下放置至沉淀消失。 2. 將用上樣緩沖液處理的蛋白樣品與待電泳蛋白樣品1:2混合。比如，3ul上樣緩沖液+6ul蛋白樣品。 3. 90～100℃加熱上述處理的樣品混合液5分鐘。細胞或組織樣品，加熱時間延長至10分鐘。確保加熱溫度＞90℃使樣品充分受熱。 ? 大部分預制膠(Bis-Tris體系除外)可以直接進行下一步。Bis-Tris體系的預制膠(如Life Technology)，需加入20%已處理樣品體積的Enhancing buffer。比如，10ul已處理的樣品需加入2ul Enhancing buffer。 4. 樣品可以上樣進行電泳了(無需再加Loading Buffer處理)。 5. 電泳結束后，將凝膠放至透射儀上進行觀察和拍照。透射儀可以是紫外燈，藍光LED燈或其它凝膠成像系統。如果光源在可見光波長范疇的無需剝膠，因為可見波長范圍內的光可以穿透玻璃或塑料材質的膠板。 6. (可選的)如果有需要，經熒光蛋白上樣緩沖液處理的凝膠仍可進行考染。按標準的考染步驟進行即可。 注意事項： 1. 請勿使用該上樣緩沖液處理預染的或預處理的蛋白分子量標準。這些產品與熒光蛋白上樣緩沖液不兼容。 2. 靈敏度影響因素：高pH(大于7)不會影響染色，低pH則會降低染色的效率，如果樣品的pH低于5，建議將pH調整至7以上。 3. 熒光蛋白上樣緩沖液不適合在如下SDS-PAGE實驗中使用：切割蛋白條帶用以測序、質譜分析或抗體制備。 4. 建議-20保存，如果室溫放置2-3周，則可添加新的DTT，蛋白條帶會重新變得清晰和明亮。添加DTT的終濃度不要過20mM。也可以添加其他還原劑TCEP(2 mM)，效果也很好。 儲存條件：-20℃ |
使用方法：本產品僅用于科研
注意：標本采集人員需按有關規定做好個人防護。咽、鼻拭子最好在發病的3天采集。
在安全柜內將本產品分裝到自備的、螺旋蓋內有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級容器)。
鼻拭子的采集：將棉簽輕輕插入鼻道內鼻腭處，停留片刻后緩慢轉動退出。以同一拭子拭兩側鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集：用棉簽擦拭雙側咽扁桃體及咽后壁，將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
直接在一級容器上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時間、編號、患者姓名。
將密閉后的標本放入大小適合的塑料袋內密封；每袋裝一份標本。同時也將標本有關信息填在標本送檢表上，連同一級容器封于塑料袋內。
將裝標本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內有橡膠圈的塑料容器(二級容器)內，擰緊蓋，在容器上標明有關信息。同一患者2份以上的密封標本，可以放在同一個二級容器內。二級容器要承受不少于95 KPa的壓力，內襯具吸水和緩沖能力的物質。所有容器必須印有生物危險標注。
將二級容器擺放在專用運輸箱內(或疫苗運輸箱)，放入冰排，然后以柔軟物質填充，并密封，由專人(2人)運送，不得郵寄，最好使用專車。
采集的標本若不能在24小時內送達，則應盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的，需在4℃冰箱短時間暫存，并盡快聯系遞送標本。流感病毒在-20℃～-40℃時不穩定，故長期保存最好在-70℃溫度以下進行。
細胞FGR活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
組織FGR活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
細胞FLT3活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
組織FLT3活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
細胞FYNT活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
小鼠羥甲基戊二酸單酰(HMG-CoA)elisa ，英文名： HMG-CoA ELISA Kit
小鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA檢測試劑盒MouseImmunoglobulinG,IgGELISAKit 96T/48T
人富糖蛋白(HRG)免疫試劑盒 Human histidine-rich glycoprotein,HRG ELISA kit
RatIerleukin1β,IL-1βELISAKit大鼠白介素1β(IL-1β)elisa規格：96T/48T
CASPASE-8蛋白免疫共沉淀分析試劑盒5次
MouseMacrophageInflammatoryProtein2,MIP-2elisa小鼠巨噬細胞炎性蛋白2(MIP-2)elisa規格：96T/48T
熒光蛋白上樣緩沖液小鼠L-型電壓依賴鈣離子通道α1F亞基(CACNα1F)elisa檢測試劑盒
小鼠L-型電壓依賴鈣離子通道α1C亞基(CACNα1C)elisa檢測試劑盒
小鼠L-乳酸脫氫酶A鏈(LDH-A)elisa檢測試劑盒
小鼠L-乳酸脫氫酶A鏈(LDH-A)elisa分析檢測試劑盒
小鼠L苯解氨酶(PAL)elisa檢測試劑盒
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
