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上海邦景實業有限公司
主營產品: 進口elisa試劑盒,細胞株,細胞系,菌種 |

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更新時間:2022-06-23 13:38:41瀏覽次數:224
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中文名稱:總蛋白提取試劑盒
英文名稱:Total protein extraction kit
產品規格:50T|100T
發貨周期:1~3天
產品貨號:BJ-F0165227
產品介紹:
本試劑盒提供全套試劑,適用于從各種原代或傳代細胞和各種實體組織,如腦、脊髓、神經結或纖維、脂肪、、消化道、腎臟、心臟、肌肉、血管、結締組織等動物組織中提取總蛋白。配合其他組份時,也可以用于植物、細菌、真菌、酵母等樣品的總蛋白提取。 本試劑盒含有的*配方能夠有效溶解細胞膜組份,包括細胞質膜、核膜和各種細胞器膜。試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物,阻止了蛋白酶對蛋白的降解,為提取高純度的蛋白提供了保證。 本試劑盒提取的蛋白可用于WB、蛋白質電泳、免疫共沉淀、ELISA、轉錄活性分析、Gel shift凝膠阻滯實驗、酶活性測定等下游蛋白研究實驗。本試劑盒中不含有EDTA,與金屬螯和層析等下游應用兼容。 本試劑盒提取的蛋白為具有天然蛋白構象的活性蛋白,下游應用范圍廣,提取液裂解細胞的能力較溫和,需要根據實際樣本情況優化裂解時間。 本試劑盒提取的蛋白樣本含有高濃度的鹽成分,不可直接用于2D電泳,如下游實驗需要直接用于等電聚焦、雙向電泳,請使用我公司其他貨號的試劑盒(HR0165)。也可以將后樣品除鹽后再用于2D電泳,用脫鹽柱脫鹽處理(HR0389)。 本試劑盒按每個處理樣本50mg細胞/組織計(大約50μL細胞壓積),如果需要處理大量的細胞/組織,將提取液按細胞體積的1:10加入細胞沉淀即可。每個50T試劑盒大約可以提取2.5g細胞/組織樣本的總蛋白。根據不同的細胞類型,100mg細胞沉淀物(107個細胞)的總蛋白質產量大約為6mg左右。 產品特點: 使用方便,不需經過研磨、反復凍融、聲破碎等前處理。 提取過程簡單方便,將蛋白提取的時間縮短至30分鐘~1小時。 含蛋白穩定劑,提取的蛋白穩定。 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。 總蛋白提取液:含多種有效成分,可以充分釋放胞漿蛋白、核蛋白和膜蛋白,又可結合釋出的蛋白防止沉淀。 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin A、Bestatin、E-64,每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括絲蛋白酶、半胱蛋白酶、天冬蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。 |
使用方法:本產品僅用于科研
注意:標本采集人員需按有關規定做好個人防護。咽、鼻拭子最好在發病的3天采集。
在安全柜內將本產品分裝到自備的、螺旋蓋內有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級容器)。
鼻拭子的采集:將棉簽輕輕插入鼻道內鼻腭處,停留片刻后緩慢轉動退出。以同一拭子拭兩側鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集:用棉簽擦拭雙側咽扁桃體及咽后壁,將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
直接在一級容器上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時間、編號、患者姓名。
將密閉后的標本放入大小適合的塑料袋內密封;每袋裝一份標本。同時也將標本有關信息填在標本送檢表上,連同一級容器封于塑料袋內。
將裝標本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內有橡膠圈的塑料容器(二級容器)內,擰緊蓋,在容器上標明有關信息。同一患者2份以上的密封標本,可以放在同一個二級容器內。二級容器要承受不少于95 KPa的壓力,內襯具吸水和緩沖能力的物質。所有容器必須印有生物危險標注。
將二級容器擺放在專用運輸箱內(或疫苗運輸箱),放入冰排,然后以柔軟物質填充,并密封,由專人(2人)運送,不得郵寄,最好使用專車。
采集的標本若不能在24小時內送達,則應盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的,需在4℃冰箱短時間暫存,并盡快聯系遞送標本。流感病毒在-20℃~-40℃時不穩定,故長期保存最好在-70℃溫度以下進行。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)。
細胞多聚ADP核糖聚合酶-1(PARP-1)活性比色法定量檢測試劑盒
組織多聚ADP核糖聚合酶-1(PARP-1)活性比色法定量檢測試劑盒
細胞異檸檬酸脫氫酶活性比色法定量檢測試劑盒
組織異檸檬酸脫氫酶活性比色法定量檢測試劑盒
尿酶活性比色法定量檢測試劑盒
小鼠酸(PK)elisa ,英文名: PK ELISA Kit
大鼠血管緊張素轉化酶(ACE)ELISA檢測試劑盒RatAngiotensinconveingenzyme,ACEELISAKit 96T/48T
人α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)免疫試劑盒 Human α-SMA ELISA Kit
英文名稱MouseICAM-2/sCD102ELISAKit小鼠細胞間粘附分子-2(ICAM-2/sCD102)規格:96T/48T
SiRNA大量SperfusinX脂質體細胞轉染試劑盒10次
rabbitImmunoglobulinA,IgAelisa兔子免疫球蛋白A(IgA)elisa規格:96T/48T
總蛋白提取試劑盒小鼠層粘連蛋白(Laminin)elisa檢測試劑盒
小鼠層連蛋白/板層素(LN)elisa檢測試劑盒免費代測
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生物醫學實驗中,常常需要從液體樣品(如血漿,培養基)中純化病毒,但由于病毒顆粒十分細小,傳統的分離方法是使用長時間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來,此操作非常繁瑣,并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統方法的缺點,本公司開發了本產品。