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上海邦景實業有限公司
主營產品： 進口elisa試劑盒，細胞株，細胞系，菌種 |
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更新時間：2022-06-13 14:55:51瀏覽次數：179
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中文名稱：pET-Dual-N-GST質粒
英文名稱：pET-Dual-N-GST Plasmid
產品規格：1μg|100μg
發貨周期：1～3天
產品貨號：BJ-F0164711
生物醫學實驗中，常常需要從液體樣品(如血漿，培養基)中純化病毒，但由于病毒顆粒十分細小，傳統的分離方法是使用長時間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來，此操作非常繁瑣，并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統方法的缺點，本公司開發了本產品。產品介紹：
pET-Dual-N-GST是一種用于在大腸桿菌中高效共表達兩種目的蛋白的質粒，其中一種蛋白可以帶上GST標簽(Glutathione S-transferase tag,GST tag)。本質粒包含兩個多克隆位點(MCS)，每個多克隆位點前都有一個T7啟動子/lac操作子和一個核糖體結合位點(rbs)，因此都可以在異丙基硫代半乳糖苷(IPTG)的誘導下高效啟動目的蛋白的表達。本質粒為氨芐青抗性。 在共表達兩個蛋白的復合物時，通常宜把較難表達的基因克隆到個多克隆位點，并在其N端引物設計時加入PreScission蛋白酶識別的八肽序列(LEVLFQGP)，宜把較易表達的基因克隆到個多克隆位點。這樣通過GST柱純化，可分離純化獲得帶有GST標簽的蛋白復合物，配合使用的PreScission Protease4℃酶切過夜，天收集穿柱液即可獲得蛋白復合物，這為后續進行蛋白復合物的功能檢測、蛋白結晶等工作帶來了極大的便。PreScission蛋白酶酶切發生在八肽序列的Q和G之間，因此在酶切去除GST標簽的時候會在目的蛋白的N端留下兩個額外的氨基酸殘基GP。當然，本質粒也可以只在個多克隆位點插入目的基因，這樣就會僅表達一個含有N端GST標簽的目的蛋白。 使用說明： 1．使用1μg包裝的本產品時，請先取少量本質粒轉化大腸桿菌，進行質粒小量、中量或大量抽提后再用于后續用途。抽提獲得的質?？梢酝ㄟ^酶切電泳進行鑒定，或通過測序進行鑒定。 2．100μg包裝的本產品質粒濃度為0.1μg/μl，共1ml?？梢灾苯佑糜诿盖谢蛘咿D染細胞。 3．pET-Dual-N-GST質粒在其多克隆位點適當酶切后可以插入待表達的目的基因，構建的質?？梢杂贸Ｒ幏椒ㄞD入表達菌株。 |
使用方法：本產品僅用于科研
注意：標本采集人員需按有關規定做好個人防護。咽、鼻拭子最好在發病的3天采集。
在安全柜內將本產品分裝到自備的、螺旋蓋內有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級容器)。
鼻拭子的采集：將棉簽輕輕插入鼻道內鼻腭處，停留片刻后緩慢轉動退出。以同一拭子拭兩側鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集：用棉簽擦拭雙側咽扁桃體及咽后壁，將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
直接在一級容器上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時間、編號、患者姓名。
將密閉后的標本放入大小適合的塑料袋內密封；每袋裝一份標本。同時也將標本有關信息填在標本送檢表上，連同一級容器封于塑料袋內。
將裝標本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內有橡膠圈的塑料容器(二級容器)內，擰緊蓋，在容器上標明有關信息。同一患者2份以上的密封標本，可以放在同一個二級容器內。二級容器要承受不少于95 KPa的壓力，內襯具吸水和緩沖能力的物質。所有容器必須印有生物危險標注。
將二級容器擺放在專用運輸箱內(或疫苗運輸箱)，放入冰排，然后以柔軟物質填充，并密封，由專人(2人)運送，不得郵寄，最好使用專車。
采集的標本若不能在24小時內送達，則應盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的，需在4℃冰箱短時間暫存，并盡快聯系遞送標本。流感病毒在-20℃～-40℃時不穩定，故長期保存最好在-70℃溫度以下進行。
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)。
蛋白電泳伊紅黃色染色試劑盒
蛋白電泳固綠染色試劑盒
蛋白電泳麗春紅染色試劑盒
蛋白雜交試劑專題
蛋白質西方雜交免疫印跡ECL化學發光檢測試劑盒
四甲基錫(>96.0%(GC)) Tetramethyltin 質量規格：>96.0%(GC) ELISAKitiNOS人誘導型合成酶規格：48T/96T
二氯二茂鋯(>97.0%(T)) Zirconocene Dichloride 質量規格：>97.0%(T) 小鼠可溶性白細胞分化抗原40配體(sCD40L)ELISA 試劑盒
Chirabite-AR[用于核磁共振] Chirabite-AR 質量規格：用于核磁共振 Rat macrophage inflammatory protein 1 alpha (MIP-1 alpha /CCL3) ELISA Kit 大鼠巨噬細胞炎癥蛋白1α(MIP-1α/CCL3)elisa
三(2,2,6,6-四甲基-3,5-庚二酮酸)鐠(III)(＞98%(T)) Tris(2,2,6,6-tetramethyl-3,5-heptanedionato)praseodymium(III) 質量規格：＞98%(T) Humanheparinsulphateprotoglycans,HSPGELISAKit 人硫酸肝素糖蛋白(HSPG)elisa 96T/48T 進口分裝
三(2,2,6,6-四甲基-3,5-庚二酮酸)銪(III)(＞95%(T)) Tris(2,2,6,6-tetramethyl-3,5-heptanedionato)europium(III) 質量規格：＞95%(T) Humanalkalinephosphatase,ALPelisa人堿性0酸酶(ALP)elisa規格：96T/48T
三(6,6,7,7,8,8,8-七氟-2,2-二甲基-3,5-辛二酮基)鐠(Ⅲ)(>97.0%(T)) Tris(6,6,7,7,8,8,8-heptafluoro-2,2-dimethyl-3,5-octanedionato)praseodymium(III) 質量規格：>97.0%(T) 植物V型氫ATP酶(H+-ATPase)活性比色法定量檢測試劑盒20
(S)-(+)-1,1'-聯萘基-2,2'-雙氫酯(>97.0%(T)) (S)-(+)-1,1'-Binaphthyl-2,2'-diyl Hydrogen Phosphate 質量規格：>97.0%(T) Mouse5-Hydroxyyptamine,5HTELISAKit小鼠5羥色胺(5-HT)elisa規格：96T/48T
(R,R)-(-)-2,3-丁二醇(>96.0%(GC)) (R,R)-(-)-2,3-Butanediol 質量規格：>96.0%(GC) 小鼠可溶性白細胞分化抗原30配體(sCD30L)ELISA 試劑盒
(S,S)-(+)-2,3-丁二醇(>97.0%(GC)) (S,S)-(+)-2,3-Butanediol 質量規格：>97.0%(GC) Rat macrophage inflammatory protein 1 beta (MIP-1 beta /CCL4) ELISA Kit 大鼠巨噬細胞炎癥蛋白1β(MIP-1β/CCL4)elisa
(-)-樟腦烷酸(>98.0%(T)) (-)-Camphanic Acid 質量規格：>98.0%(T) Humanprealbumin,PAELISAKit 人前白蛋白(PA)elisa 96T/48T 進口分裝
pET-Dual-N-GST質粒槲皮素O洋槐糖苷 HPLC≥98% 5mg PorcineCompleme3,C3elisa豬補體蛋白3(C3)elisa規格：96T/48T
花椒堿 HPLC≥98% 5mg PorcineC-reactiveprotein,CRPelisa豬C反應蛋白(CRP)elisa規格：96T/48T
華良姜素 HPLC≥98% 5mg PorcineD-Dimer,D2Delisa豬D二聚體(D2D)elisa規格：96T/48T
環桉烯醇 HPLC≥98% 5mg PorcineDexamethasone,DexELISAKit豬(Dex)elisa規格：96T/48T
環木菠蘿烷醇 HPLC≥98% 5mg PorcineDexamethasone,Dexelisa豬(Dex)elisa規格：96T/48T
環桑色烯 HPLC≥98% 5mg Porcinediamineoxidase,DAOelisa豬氧化酶(DAO)elisa規格：96T/48T
環烯醚萜 B HPLC≥98% 5mg PorcineEndothelialniicoxidesyhase,eNOSelisa豬內皮型合成酶(eNOS)elisa規格：96T/48T
環氧表美國鵝掌楸內酯 HPLC≥98% 5mg PorcineEndothelialniicoxidesyhase3,eNOS-3elisa豬內皮型合成酶3(eNOS-3)elisa規格：96T/48T
黃柏呈 HPLC≥98% 5mg Porcineendothelin1,ET-1elisa豬內皮素1(ET-1)elisa規格：96T/48T
黃獨素 G HPLC≥98% 5mg Porcineepidemicdiarrheavirusaibody,PEDVelisa豬流行性腹瀉病毒抗體(PEDV)elisa規格：96T/48T
