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豬c-fos elisa酶聯免疫試劑盒操作流程

2019-11-22  閱讀(332)

                          豬c-fos elisa酶聯免疫試劑盒操作流程

十一月來了,看著它真年輕,年輕得讓我有些恍惚,恍惚著想起了過去,想起了你。不知此時,可有人為你燃燈守望,可有人陪你圍爐取暖,可有人與你歲歲年年。接下來介紹豬c-fos elisa酶聯免疫試劑盒操作流程

 操作步驟:

1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘。

2. 分組:取出 96 孔板,根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數,把剩余的板條繼續冷藏處理。分別設標準品組(6 個濃度)、空白孔、待測樣品組。

注:為減少實驗誤差,保證準確性,建議設置復孔。

3. 加樣:依照標準品的順序分別加入 100ul 的標準品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入 100ul 的蒸餾水;其余微孔中加入100ul 的待測樣本。

4. 加酶標溶液:標準品組、待測樣本組各孔中加入 50ul 的酶標溶液(空白對照孔除外)。

5. 溫育:酶標板用封板紙密封后,放入濕盒內于 37℃恒溫孵育 1 小時。

6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置 15-30s,充分清洗酶標板 5 次,用吸水紙*拍干。

7. 顯色:各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后,再加入顯色劑 B 液 50ul。

8. 終止:25-37℃下避光反應 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液。

9. 讀板:在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值。

注意事項:

1. 試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

2. 濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。

3. 各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,使用排槍加樣。

4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。

5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6. 底物請避光保存。

7. 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。



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