D-Luciferin, Potassium Salt,D-熒光素鉀鹽
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 | 保存 | 價格(元) |
D-Luciferin, Potassium Salt D-熒光素鉀鹽*（超純） | C6301L1338 | 5 g | 室溫 | 15550 |
產(chǎn)品描述
活體成像技術(shù)（包括小動物和細胞成像技術(shù)，optical in vivo imaging）目前主要采用生物發(fā)光（luminescence）與熒光（fluorescence）兩種方法，生物發(fā)光法是基于熒光素酶在ATP或O2存在的條件下，能催化底物熒光素（D-Luciferin或Coelenterazine）發(fā)光，當熒光素過量時，產(chǎn)生的光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān)性，通過光強度大小反映出報告基因（熒光素酶基因）及目的基因的表達情況或被標記細胞在體內(nèi)的定位。
將攜帶熒光素酶編碼基因（Luc）的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染入細胞后，得到穩(wěn)定表達的細胞株，將細胞株植入研究動物，如大小鼠體內(nèi)，之后注入熒光素，通過生物發(fā)光成像技術(shù)（BLI）來檢測光強度變化。這項技術(shù)廣泛應用于多個領(lǐng)域，zui常用的有腫瘤或疾病動物模型的建立，并可用于病毒學研究、siRNA研究、干細胞研究、蛋白質(zhì)相互作用、藥物篩選等領(lǐng)域。從而實時監(jiān)測疾病發(fā)展狀態(tài)或藥物的治療功效等。也可以利用ATP對此反應體系的影響，根據(jù)生物發(fā)光強度的變化來指示能量或生命體征。
D-熒光素也常用于體外研究，包括熒光素酶和ATP水平分析；報告基因分析；高通量測序和各種污染檢測。目前市場上有三種產(chǎn)品形式，D-熒光素（游離酸），D-*鹽，以及D-熒光素鉀鹽。這三種產(chǎn)品主要的差別在于溶解特性上。D-熒光素（游離酸）水溶性以及緩沖體系的溶解性都很弱，除非溶于弱堿如NaOH和KOH溶液。溶于甲醇（10 mg/ml）和DMSO（50 mg/ml）。但鈉鹽和鉀鹽形式的D-熒光素能夠非常容易且快速的溶入水或者緩沖液中，使用方便，溶劑無毒性，特別適合體內(nèi)實驗。配成液體后的這三種產(chǎn)品，在絕大多數(shù)的應用上都沒有實質(zhì)性的差別。
產(chǎn)品性質(zhì)
中文別名：D-熒光素鉀鹽
英文別名：(S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid potassium salt; D-Luciferin firefly, potassium salt;
CAS#：115144-35-9
分子式：C11H7N2O3S2 K
分子量：318.42 g/mol
外觀：淡黃色粉末
溶解性：溶于水
純度（HPLC）：＞99%
使用方法
1．體外生物發(fā)光檢測
1）用蒸餾水溶解D-熒光素鉀鹽，配制成100 mM的儲存液（200×，濃度30mg/ml）。混勻后立即使用或分裝于-20℃或-80℃凍存，避免反復凍融。
2）用預熱好的組織培養(yǎng)基1:200稀釋儲存液，配制工作液（終濃度150µg/ml）。
3）去除培養(yǎng)細胞的培養(yǎng)基直至無殘留。
4）待圖像分析前，向細胞內(nèi)添加1×熒光素工作液，然后進行圖像分析（或者細胞放在37℃短時間孵育后檢測可增強信號）。
2．活體成像分析
1）用無菌的DPBS（w/o Mg2+）配制D-熒光素鉀鹽工作液（15mg/ml），0.2µm濾膜過濾除菌。混勻后立即使用或分裝于-20℃或-80℃凍存，避免反復凍融。一旦使用，放到4℃解凍，保持冰冷且避光。
2） 注射量取決于注射方式，具體如下：
注射方式 劑量
靜脈注射（25-27gauge針頭） 按10µl/g體重濃度，加入相應體積的15mg/ml熒光素工作液
腹腔注射（25-27gauge針頭） 按10µl /g體重濃度，加入相應體積的15mg/ml熒光素工作液
肌肉注射（27gauge針頭） 50µl，濃度為1-2mg/ml熒光素工作液
鼻內(nèi)注射（pipette） 50µl，濃度為3mg/ml熒光素工作液
3） 注射入體內(nèi)10-20 min（待光信號達到zui強穩(wěn)定平臺期），再進行成像分析。
注：建議對每只動物模型都需要建立熒光素酶動力學曲線，從而確定zui高信號檢測時間和信號平臺期。
注意事項
1) 本品（firefly luciferin）和甲蟲熒光素（beetle luciferin）都是指化合物(S)-2-(6-Hydroxy-2-benzothiazolyl) -2-thiazoline-4-carboxylic acid，僅僅是不同公司在命名上的差異。
2) 本品保存和操作的過程中都要避光。另外水溶性儲存液過濾除菌后，可以-20℃或-80℃分裝凍存，避免反復凍融。如果有條件，對儲存液充氮氣或氬氣（防止氧化），穩(wěn)定性和保存時間更長，長達1年。
3) 注射方式，動物類型以及體重等都會影響信號的發(fā)射，因此建議每次實驗都要做熒光素酶動力學曲線，確定*信號平臺期和*的檢測時間。
4) 熒光素鉀鹽和*鹽應用上沒有差別，兩者的差別在于物理性狀上如外形和溶解性。鈉鹽的水溶性高于鉀鹽。從目前發(fā)表的文獻來看，鉀鹽的使用率遠高于鈉鹽，尤其是體內(nèi)實驗。兩者功效相同。
5) 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
運輸和保存方法
冰袋運輸。-20℃干燥避光保存。
相關(guān)產(chǎn)品
| 產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 | 保存 | 價格（元） |
| D-Luciferin, Potassium Salt D-熒光素鉀鹽*（超純） | C6301L1330 | 25 mg | 室溫 | 750 |
| D-Luciferin, Potassium Salt D-熒光素鉀鹽*（超純） | C6301L1332 | 100 mg | 室溫 | 1050 |
| *（超純） | C6301L1334 | 1 g | 室溫 | 3950 |
| *（超純） | C6301L1338 | 5 g | 室溫 | 15550 |
