HS-(CH2)6-O-PEG8-CH2CH2COOH;N/A;巰基 生化試劑
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上海李記生物科技有限公司
SmartCell 線粒體染色試劑盒NIR(同Mitotracker NIR)
SmartCell 線粒體染色試劑盒Red(同Mitotracker Red)
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Alexa Fluor 647-Phalloidin, Alexa Fluor647 標記鬼筆環肽
本品為Alexa Fluor 488 標記鬼筆環肽(綠色),可發出高亮度、穩定的綠色熒光,染色反應特異性強,對比性高,適合用作F-actin的定性和定量檢測。
產品名稱 | 貨號 | 規格 | 保存 | 價格(元) |
Alexa Fluor 488 標記鬼筆環肽(綠色) | C6242L0520 | 300 T | -20℃ | 1950 |
Alexa Fluor 488 標記鬼筆環肽(綠色)運輸與保存方法
冰袋運輸。收到貨后-20℃避光干燥保存,1年有效。
Alexa Fluor 488 標記鬼筆環肽(綠色)使用方法:
1. 準備1000x DMSO Alexa FluorTM 488標記鬼筆環肽存儲液
用30µL DMSO 溶解粉末狀Alexa FluorTM 488標記鬼筆環肽,可按需分裝并于-20℃避光干燥保存,分裝保存,避免反復凍融。
2. 準備1x Alexa Fluor 488標記鬼筆環肽工作液
吸取1µL 1000×Alexa Fluor 488標記鬼筆環肽存儲液到1ml 含有1%BSA的PBS緩沖液中即可得到1×工作液。
注意:不同的細胞染色的情況不同,相應Alexa Fluor 488鬼筆環肽使用量也需根據不同情況而定。
3. 細胞染色步驟
1)細胞培養過夜或更長,使其密度達到50-60%匯合度。
2)吸掉培養液,37℃預熱的1×PBS(pH 7.4)清洗細胞2次。
3)使用含有3-4%甲醛的PBS溶液進行細胞固定,室溫固定10-30min。
注意:避免固定劑中含有甲醇成分,因為甲醇在固定過程中可能破壞肌動蛋白。
4)室溫條件下,用PBS清洗固定好的細胞2~3次,每次10min。
5)(可選):室溫條件下,用溶于PBS的0.1% Triton X-100溶液透化處理3-5min,從而增加其通透性。
注意:鬼筆環肽的分子量小,很容易通過細胞,一般情況下不需對細胞進行冷丙酮和TRITON X-100處理。
6)室溫條件下,用PBS清洗細胞2~3次,每次10min。
7)每孔加入 Alexa Fluor 488標記鬼筆環肽工作液100µl/孔(96孔板),室溫避光染色20-90min,夏季時間相對短些。
8)用PBS清洗細胞3次,每次5min,去除掉多余的Alexa Fluor 488標記鬼筆環肽。
9)(可選):加入足量的即用型DAPI溶液對細胞核進行復染,如:100µl/孔(96孔板),室溫3~5min。用PBS清洗細胞2次,每次5min。
10)于熒光顯微鏡或者共聚焦顯微鏡下進行熒光觀察,選擇Alexa FluorTM 488激發/發射濾片(Ex/Em=493/517nm)和/或DAPI激發/發射濾片(Ex/Em=364/454nm)。
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