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ARPE-19人視網膜上皮細胞

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更新時間:2017-10-20 16:29:56瀏覽次數:285次

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商鋪產品:1400條

所在地區:上海上海市

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產品簡介

ARPE-19人視網膜上皮細胞
Human Retinal Epithelial Cells
貨號:ARPE-19
價格:¥1500.0
規格: 1*10?6?  
細胞介紹
該細胞系源自于一名19歲車禍罹難的健康男性的視網膜組織,由Amy Aotaki-Keen建系于1986年。該細胞系表達視網膜色素細胞*的分子標記如胞內*結合蛋白和PRE-65。

詳細介紹

ARPE-19

人視網膜上皮細胞

Human Retinal Epithelial Cells

貨號:ARPE-19

價格:¥1500.0

規格: 1*10 6   

細胞介紹
該細胞系源自于一名19歲車禍罹難的健康男性的視網膜組織,由Amy Aotaki-Keen建系于1986年。該細胞系表達視網膜色素細胞*的分子標記如胞內*結合蛋白和PRE-65。

ARPE-19人視網膜上皮細胞細胞特性
1)來源:視網膜
2)形態:上皮細胞樣
3)含量:>1x106 個/mL
4)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

ARPE-19人視網膜上皮細胞運輸和保存:使用含有優質胎牛血清的2ml凍存管發送存活細胞。收到細胞后,可在1000RPM,常溫條件下,離心5min后,于潔凈操作臺棄去上清,加入*使用的培養基后轉移至10cm培養皿或者T25培養瓶中培養,傳代達到細胞生長狀態良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。
細胞用途:僅供科研使用。
                       
ARPE-19人視網膜上皮細胞細胞培養步驟
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備DMEM/F12培養基(DMEM/F12,GIBCO,貨號10565-042);胎牛血清,10%;雙抗1%。
2)培養條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量*培養基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。
下面以T25瓶為例;
      1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml*,細胞變圓脫落后,加入2ml*培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
      2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至zui終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
      3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。


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