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上海莼試生物技術有限公司
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所在地
上海市
更新時間:2024-10-03 10:11:07瀏覽次數:64
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原代細胞VS細胞系:
用酶或機械方法直接從人或動物組織中分離出來的細胞。嚴格來說,從機體分離出來到傳代之前的細胞稱為原代細胞,絕大部分的原代細胞在體外可以分裂10-15次(這與細胞的端粒長短有關),再加上取材,成本等因素,通常會把培養的第一代到第十代以內的細胞統稱為原代細胞。
商品屬性:
組織來源 | 腦組織 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 |
產品貨號 | CS-X3068 | 生長特性 | 貼壁 |
細胞簡介:
人神經少突膠質分離自腦皮層組織;大腦分左右兩個半球,大腦皮質(灰質)覆蓋著每個大腦半球的大部分,它是神經元胞體集中的地方。內部則是由神經纖維或髓鞘構成的白質。每一個半球都有三個面,即外側面(約占整個皮質面積的1/3)、內側面和底面(占2/3的面積);半球表面有很多深淺不等的溝或裂,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積;大腦外側面重要的溝、裂有大腦外側裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔,使大腦皮質組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。少突膠質細胞分布于中樞神經系統,在銀浸染標本中,少突膠質細胞比星狀膠質細胞小,其突起也較小而少,呈珠狀,故被稱為少突膠質細胞或寡突膠質細胞。但是用特異性免疫細胞化學染色顯示的少突膠質細胞,其突起并不少,而且還有許多分支。少突膠質細胞的主要功能是在中樞神經系統中包繞軸突、形成絕緣的髓鞘結構、協助生物電信號的跳躍式高效傳遞并維持和保護神經元的正常功能。其異常不僅會導致中樞神經系統脫髓鞘病變,還會引起神經元損傷或精神類疾病,甚至可以引發腦腫瘤。根據少突膠質細胞的分布和位置可分為三種:①束間少突膠質細胞(interfasicular-oligodendrocyte),分布在中樞神經系統的白質的神經纖維束之間;②神經細胞周少突膠質細胞(perineuronal-oligodendrocyte),分布在中樞神經系統的灰質區,常位于神經細胞周圍,與神經細胞的關系密切,故又稱為神經細胞周衛星細胞(perineuronal-satellite-cell),但在神經細胞胞體與此類細胞之間亦常有星形膠質細胞的薄片狀突起分隔;③血管周少突膠質細胞(pcrivascular-oligodendrocyte),主要分布在中樞神經系統內的血管周圍。少突膠質細胞形成的髓鞘膜是特化和復雜動物細胞膜之一,其上有眾多跨膜蛋白和表面蛋白用以維持髓鞘的致密穩定結構。如半乳糖腦苷脂(GC),它是髓鞘的一種主要類脂,用GC抗體鑒別成熟的少突膠質細胞是一種比較早的免疫鑒定方法。近十年來,神經發育學科進展較快,更多的少突膠質細胞分子標記物被鑒定出來,如PDGFRa、Mbp、CNP、SOX-10。
方法簡介:
公司實驗室分離的人神經少突膠質經GC(Galactocerebroside)免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
質量檢測:
公司實驗室分離的人神經少突膠質采用消化、混合細胞營養缺失培養、搖床振蕩結合差速貼壁法并通過專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶。
培養信息:
培養基 含B-27 Supplement、PDGF-AA、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 梭形、多角形
傳代特性 不增殖;不傳代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
原代細胞一般傳至10代左右,大部分細胞衰老死亡,但是有極少數的細胞能夠度過“危機"而繼續傳下去,存活的細胞一般能夠傳到40-50代,叫細胞株。當50代以后又會出現“危機",這時有部分細胞的遺傳物質發生了改變且帶有癌變的特點,從而可能無限制地傳代下去,稱為細胞系。
也有認為細胞系指原代細胞培養物經傳代成功后所繁殖的細胞群體。也指可長期連續傳代的培養細胞。由此便引申出了后來的有限細胞系、無限細胞系,因此,細胞系狹義的是指可連續傳代的細胞,廣義是指可傳代的細胞。而細胞株是通過選擇法或克隆形成法,從原代培養物或細胞系中獲得具有特殊性質或標志物的單一細胞稱為細胞株。
細胞系具有容易培養、種類多、價格便宜、無限傳代等優點,也非常容易在培養、凍存中發生錯誤鑒定及交叉污染的問題。
公司正在銷售的產品:
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FCGR3重組小鼠 CD16 / FCGR3 蛋白 (His 標簽) Protein
Akt/PKC(Protein Kinase C,PKC 0.5mgAkt/PKC(Protein Kinase C,PKC) 蛋白激酶C(多肽抗原)
CD1B重組人 CD1B / CD1A 蛋白 (Fc 標簽) Protein
CD46 Protein Human 重組人 CD46 蛋白 (His 標簽)
CD79B Protein Rat 重組大鼠 CD79B / B29 蛋白 (Fc 標簽)
人神經少突膠質細胞表面活性物質關聯蛋白J(SPJ)重組蛋白 Recombinant Surfactant Associated Protein J (SPJ)
CD46 Protein Human 重組人 CD46 蛋白 (His 標簽)
IgG3重組小鼠 IgG3-Fc 蛋白 Protein
EDAR Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 EDAR 蛋白 (His 標簽)
CARHSP1重組人 CARHSP1 蛋白 (His 標簽) Protein
原代細胞培養的具體步驟:
1、準備:取各種已消毒的培養用品置于凈化臺面,紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2、布局:點燃酒精燈,安裝吸管帽。
3、處理組織:把組織塊置于燒杯中,用Hanks液漂洗2-3次,去除血污;如懷疑組織可能污染,可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。
5、消化:或用恒溫水浴,或置于37℃溫箱消化均可,消化中每隔20分鐘應搖動一次,如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。
6、分離:在消化過程中見消化液發混濁時,可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察,如組織已分散成細胞團或單個細胞,立即終止消化,隨即通過適宜不銹鋼篩,濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速(500-1000轉/分)離心消化液5分鐘,吸出上清,加入適量含有血清的培養液。
7、計數:用計數板計數,如細胞懸液細胞密度過大,再補加培養液調整后,分裝入培養瓶中。對大多數細胞來說,pH要求在7.2-7.4范圍,培養液呈微紅色,如顏色偏黃,說明液體變酸,可用NaHCO3調整。
8、培養:置于37℃溫箱培養,如用CO2溫箱培養,瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞,紗布塞易生霉菌,每次換液時需要換新塞。