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原代細胞培養(yǎng)條件：

?溫度?：通常在37℃下進行，以模擬體內(nèi)溫度。

?pH值?：培養(yǎng)液的pH值應保持在7.2~7.4之間，以維持細胞的正常生理狀態(tài)。

?氣體環(huán)境?：在含有5% CO2的培養(yǎng)箱中進行，以促進細胞生長。

?培養(yǎng)基?：使用含有適當營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，如Eagle's MEM、DMEM等。

?無菌操作?：整個培養(yǎng)過程需要在無菌條件下進行，以防止污染。

本產(chǎn)品僅供科學實驗研究使用! 不能用于臨床或動物診斷！

細胞簡介：

人結(jié)腸成纖維分離自結(jié)腸組織；結(jié)腸在右髂窩內(nèi)續(xù)于盲腸，在第3骶椎平面連接直腸。結(jié)腸分升結(jié)腸、橫結(jié)腸、降結(jié)腸和乙狀結(jié)腸4部分，大部分固定于腹后壁，結(jié)腸的排列酷似英文字母“M"，將小腸包圍在內(nèi)。結(jié)腸橫切面由內(nèi)到外依次為：黏膜（上皮層、固有層、黏膜肌層），黏膜下層（疏松結(jié)締組織），肌層（內(nèi)環(huán)形、外縱行兩層平滑肌），外膜（纖維膜或漿膜）。結(jié)腸成纖維細胞主要分布于外膜（纖維膜或漿膜）結(jié)締組織內(nèi)。成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的結(jié)腸成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質(zhì)透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

方法簡介：

實驗室分離的人結(jié)腸成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

實驗室分離的人結(jié)腸成纖維采用 - 膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基：含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：成纖維細胞樣

傳代特性：可傳3-5代左右

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細胞培養(yǎng)的具體操作步驟如下：

?組織處理?：將動物組織從機體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個細胞。

?細胞計數(shù)?：使用血細胞計數(shù)器或其他方法對細胞進行計數(shù)，確保細胞密度適中。

?接種培養(yǎng)?：將細胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當細胞達到一定密度時進行傳代培養(yǎng)，以維持細胞的生長狀態(tài)。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠漢坦病毒(HV)ELISA試劑盒 96T/48T

Adrenaline (EPI) ELISA Kit 人(EPI)ELISA試劑盒

humanEndothelin1,ET-1ELISAKit 人內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝

Humanai-parainfluenzavirusIgMaibody,ai-PIVIgMELISA試劑盒人抗副流感病毒IgM抗體(ai-PIVIgM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物細胞壁鈣熒光白(Calcofluorwhite;CFW)熒光染色試劑盒20次

Humayrosinekinasewithimmunoglobulin-likeandEGF-likedomains2,Tie-2ELISAKit人血管生成素受體/含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪激酶2(Tie-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠α羥基脫氫酶(αHBDH)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠αS轉(zhuǎn)移酶(α-GST)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠α甘露糖苷酶(αManase)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶16(MMP16)ELISA試劑盒 ，英文名： MMP16 ELISA Kit

Mouse histone H2b (histon-H2b) ELISA Kit 小鼠組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA試劑盒

Ratypsinogenactivationpeptide,TAPELISAKit 大鼠原激活肽(TAP)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝

CLIAKitforF1+2(Humanprothrombinfragme1+2)ELISAkit人原片段F1+2規(guī)格：48T/96T

細胞結(jié)構(gòu)型內(nèi)皮細胞合成酶(cNOS/NOS3/eNOS)活性比色法定量檢測試劑盒20次

Ratmyelinbasicprotein,MBPELISAKit大鼠髓0脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

VTCN1重組小鼠 B7-H4 / B7S1 / B7x 蛋白 (Fc 標簽) Protein

白介素8受體α(IL8Rα)重組蛋白 Recombinant Interleukin 8 Receptor Alpha (IL8Ra)

IL1R2重組人 IL1R2 / IL1RB / CD121b 蛋白 Protein

FABP2 Protein Human 重組人 FABP2 / I-FABP 蛋白 (His 標簽)

PDCD1LG2 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 B7-DC / PD-L2 / CD273 蛋白 (His 標簽)

人結(jié)腸成纖維細胞白介素8受體α(IL8Rα)重組蛋白 Recombinant Interleukin 8 Receptor Alpha (IL8Ra)

FABP2 Protein Human 重組人 FABP2 / I-FABP 蛋白 (His 標簽)

VTCN1重組小鼠 B7-H4 / B7S1 / B7x 蛋白 (Fc 標簽) Protein

PDCD1LG2 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 B7-DC / PD-L2 / CD273 蛋白 (His 標簽)

IL1R2重組人 IL1R2 / IL1RB / CD121b 蛋白 Protein

原代細胞的4種培養(yǎng)方法：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。