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上海莼試生物技術有限公司
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參考價 | ¥1-¥5800 | /件 |
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所在地
上海市
更新時間:2024-10-02 15:23:12瀏覽次數:73
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原代細胞VS細胞系:
用酶或機械方法直接從人或動物組織中分離出來的細胞。嚴格來說,從機體分離出來到傳代之前的細胞稱為原代細胞,絕大部分的原代細胞在體外可以分裂10-15次(這與細胞的端粒長短有關),再加上取材,成本等因素,通常會把培養的第一代到第十代以內的細胞統稱為原代細胞。
商品屬性:
組織來源 | 宮頸癌組織 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 |
產品貨號 | CS-X3296 | 生長特性 | 貼壁 |
細胞簡介:
人宮頸癌組織源成纖維分離自患有宮頸癌病人的宮頸癌組織;宮頸癌也稱子宮頸癌,指發生在子宮陰道部及宮頸管的惡性腫瘤,是女性常見惡性腫瘤之一,發病率位于女性腫瘤的第二位。宮頸癌可向鄰近組織和器官直接蔓延,向下至陰道穹窿及陰道壁,向上可侵犯子宮體,向兩側可侵犯盆腔組織,向前可侵犯膀胱,向后可侵犯直腸。也可通過淋巴管轉移至宮頸旁、髂內、髂外、腹股溝淋巴結,晚期甚至可轉移到鎖骨上及全身其他淋巴結。血行轉移比較少見,常見的轉移部位是肺、肝及骨。腫瘤微環境即腫瘤細胞生存的外部環境,由不同種類的非腫瘤性的細胞與細胞外基質(Extracellular matrix,ECM)構成,包括纖維細胞,免疫細胞,內皮細胞,間充質干細胞等,腫瘤細胞通過調控這些間質細胞,創造出有利于自身侵襲轉移的條件,從而使得腫瘤得到進展。越來越多的證據表明,腫瘤微環境的改變在腫瘤進展中扮演著重要的角色。在腫瘤微環境中,研究最多也是最主要的間質細胞是腫瘤相關成纖維細胞(cancer-associated fibroblasts, CAFs)。CAFs 主要由腫瘤周邊的正常成纖維細胞和成纖維細胞樣細胞演化而來。宮頸癌組織源成纖維細胞多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。剛分離的宮頸癌組織源成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
方法簡介:
公司實驗室分離的人宮頸癌成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
質量檢測:
公司實驗室分離的人宮頸癌成纖維采用混合膠原酶消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶。
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內狀態
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
原代細胞一般傳至10代左右,大部分細胞衰老死亡,但是有極少數的細胞能夠度過“危機"而繼續傳下去,存活的細胞一般能夠傳到40-50代,叫細胞株。當50代以后又會出現“危機",這時有部分細胞的遺傳物質發生了改變且帶有癌變的特點,從而可能無限制地傳代下去,稱為細胞系。
也有認為細胞系指原代細胞培養物經傳代成功后所繁殖的細胞群體。也指可長期連續傳代的培養細胞。由此便引申出了后來的有限細胞系、無限細胞系,因此,細胞系狹義的是指可連續傳代的細胞,廣義是指可傳代的細胞。而細胞株是通過選擇法或克隆形成法,從原代培養物或細胞系中獲得具有特殊性質或標志物的單一細胞稱為細胞株。
細胞系具有容易培養、種類多、價格便宜、無限傳代等優點,也非常容易在培養、凍存中發生錯誤鑒定及交叉污染的問題。
公司正在銷售的產品:
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SERPINA11重組小鼠 SerpinA11 蛋白 (His 標簽) Protein
cath-L/CL peptide 組織蛋白酶L抗原 0.5mgcath-L/CL peptide 組織蛋白酶L抗原
CSF1R重組人 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
CCL21 Protein Human 重組人 CCL21 / 6Ckine 蛋白
PDGFRA Protein Rat 重組大鼠 PDGFRa / CD140a 蛋白 (His 標簽)
人宮頸癌成纖維細胞cath-L/CL peptide 組織蛋白酶L抗原 0.5mgcath-L/CL peptide 組織蛋白酶L抗原
CCL21 Protein Human 重組人 CCL21 / 6Ckine 蛋白
SERPINA11重組小鼠 SerpinA11 蛋白 (His 標簽) Protein
PDGFRA Protein Rat 重組大鼠 PDGFRa / CD140a 蛋白 (His 標簽)
CSF1R重組人 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
原代細胞培養的具體步驟:
1、準備:取各種已消毒的培養用品置于凈化臺面,紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2、布局:點燃酒精燈,安裝吸管帽。
3、處理組織:把組織塊置于燒杯中,用Hanks液漂洗2-3次,去除血污;如懷疑組織可能污染,可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。
5、消化:或用恒溫水浴,或置于37℃溫箱消化均可,消化中每隔20分鐘應搖動一次,如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。
6、分離:在消化過程中見消化液發混濁時,可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察,如組織已分散成細胞團或單個細胞,立即終止消化,隨即通過適宜不銹鋼篩,濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速(500-1000轉/分)離心消化液5分鐘,吸出上清,加入適量含有血清的培養液。
7、計數:用計數板計數,如細胞懸液細胞密度過大,再補加培養液調整后,分裝入培養瓶中。對大多數細胞來說,pH要求在7.2-7.4范圍,培養液呈微紅色,如顏色偏黃,說明液體變酸,可用NaHCO3調整。
8、培養:置于37℃溫箱培養,如用CO2溫箱培養,瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞,紗布塞易生霉菌,每次換液時需要換新塞。