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原代細胞培養(yǎng)條件：

?溫度?：通常在37℃下進行，以模擬體內(nèi)溫度。

?pH值?：培養(yǎng)液的pH值應保持在7.2~7.4之間，以維持細胞的正常生理狀態(tài)。

?氣體環(huán)境?：在含有5% CO2的培養(yǎng)箱中進行，以促進細胞生長。

?培養(yǎng)基?：使用含有適當營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，如Eagle's MEM、DMEM等。

?無菌操作?：整個培養(yǎng)過程需要在無菌條件下進行，以防止污染。

本產(chǎn)品僅供科學實驗研究使用! 不能用于臨床或動物診斷！

細胞簡介：

人肝星形分離自肝臟組織；肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個器官，并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用；肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機體內(nèi)臟里的器官，位于機體中的腹部位置，在右側橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方，胃的上方。肝臟是機體消化系統(tǒng)中的消化腺，為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態(tài)結構：肝臟位于右上腹，隱藏在右側膈下和肋骨深面，大部分肝為肋弓所復蓋，僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁，肝上面則與膈及腹前壁相接。肝星形細胞（HSC）又名肝貯脂細胞、維A貯存細胞、竇周細胞、Ito細胞等，是肝臟細胞外基質(zhì)的主要來源。HSC在激活后可進一步轉化為肌成纖維細胞樣細胞，各種可導致肝纖維化的因素均將HSC作為最終靶細胞。正常情況下，HSC處于靜止狀態(tài)，當肝臟發(fā)生炎癥反應或受到機械刺激等損傷時，HSC的表型由靜止型轉變?yōu)榧せ钚停せ畹?span>HSC可通過增生和分泌細胞外基質(zhì)參與肝纖維化的形成及肝內(nèi)結構的重建，此過程也是肝纖維化的中心環(huán)節(jié)。肝星形細胞分布于肝臟的Disse間隙內(nèi)，是合成、分泌細胞外基質(zhì)的主要來源，在肝纖維化的發(fā)生中處于最重要地位。肝星形細胞是肝臟的間充質(zhì)細胞，約占肝臟細胞總數(shù)的8%-13%。作為肝臟合成細胞外基質(zhì)的主要細胞群，肝星形細胞不僅能分泌蛋白多糖、糖蛋白等細胞外基質(zhì)成分，合成一定量的膠原酶以維持正常的基底膜結構，還能通過其突起的收縮參與肝竇的微循環(huán)調(diào)節(jié)。此外，肝星形細胞能通過合成肝細胞生長因子、胰島素樣生長因子、表皮生長因子等促進肝細胞增殖和肝再生。

方法簡介：

公司實驗室分離的人肝星狀經(jīng)α-SMA、Desmin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的人肝星形采用混合酶灌流消化、低速離心、密度梯度離心制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細胞培養(yǎng)的具體操作步驟如下：

?組織處理?：將動物組織從機體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個細胞。

?細胞計數(shù)?：使用血細胞計數(shù)器或其他方法對細胞進行計數(shù)，確保細胞密度適中。

?接種培養(yǎng)?：將細胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當細胞達到一定密度時進行傳代培養(yǎng)，以維持細胞的生長狀態(tài)。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human ai neuophil granules aibody (ANGA) ELISA Kit 人抗粒細胞顆粒抗體(ANGA)ELISA試劑盒

Humanclusterin,CLUELISAKit 人凝聚素(CLU)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝

CLIAKitfor8-OHdG(Mouse8-Hydroxy-desoxyguanosine)ELISAKit小鼠8羥基脫氧鳥苷規(guī)格：48T/96T

乙酸待測樣品處理試劑盒20次

Mousemyeloperoxidase,MPOELISAKit小鼠髓過氧化物酶(MPO)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

血紅素氧化酶   英文名稱：   heme oxygenase-1   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   HO-1

熱休克蛋白27   英文名稱：   Heat shock protein 27   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   HSP27

熱休克蛋白70   英文名稱：   Heat shock protein 70   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   HSP70

HA絲酸肽酶1   英文名稱：   high temperature requireme A   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   Ha 1

大鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA試劑盒 ，英文名： BMPR-Ⅱ ELISA Kit

Porcine procollagen I carboxy terminal peptide (P I CP) ELISA Kit 豬Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA試劑盒

流感嗜血桿菌(Hi)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMLC(HumanMyosinlightChain)ELISAKit人肌球蛋白輕鏈規(guī)格：48T/96T

體液脊髓過氧化酶(MPO)活性(DTNB)高質(zhì)敏感比色法定量檢測試劑盒20次

ELISAKitHCⅡ犬肝素輔因子Ⅱ規(guī)格：48T/96T

CALM2重組人 Calmodulin 2 / CALM2 蛋白 (His 標簽) Protein

Substance P Receptor (Neurokinin receptor1;Tachykinin receptor1 0.5mgSubstance P Receptor (Neurokinin receptor1;Tachykinin receptor1) P物質(zhì)受體(抗原)

SERPINA7重組人 SerpinA7 / TBG 蛋白 (His 標簽) Protein

CCL2 Protein Human 重組人 CCL2 / MCP-1 / MCP1 蛋白 (His 標簽)

TIMP1 Protein Human 重組人 TIMP-1 / TIMP1 蛋白 (His 標簽)

人肝星狀細胞Substance P Receptor (Neurokinin receptor1;Tachykinin receptor1 0.5mgSubstance P Receptor (Neurokinin receptor1;Tachykinin receptor1) P物質(zhì)受體(抗原)

CCL2 Protein Human 重組人 CCL2 / MCP-1 / MCP1 蛋白 (His 標簽)

CALM2重組人 Calmodulin 2 / CALM2 蛋白 (His 標簽) Protein

TIMP1 Protein Human 重組人 TIMP-1 / TIMP1 蛋白 (His 標簽)

SERPINA7重組人 SerpinA7 / TBG 蛋白 (His 標簽) Protein

原代細胞的4種培養(yǎng)方法：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。