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上海莼試生物技術有限公司
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經銷商 -
所在地
上海市
更新時間:2024-10-02 14:51:51瀏覽次數:65
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原代細胞VS細胞系:
用酶或機械方法直接從人或動物組織中分離出來的細胞。嚴格來說,從機體分離出來到傳代之前的細胞稱為原代細胞,絕大部分的原代細胞在體外可以分裂10-15次(這與細胞的端粒長短有關),再加上取材,成本等因素,通常會把培養的第一代到第十代以內的細胞統稱為原代細胞。
商品屬性:
組織來源 | 肺靜脈組織 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 |
產品貨號 | CS-X2697 | 生長特性 | 貼壁 |
細胞簡介:
人肺大靜脈平滑肌分離自肺大靜脈組織;肺大靜脈在用肺呼吸的脊椎動物中,把動脈血由肺送回心臟的靜脈,是一個靜脈里流動脈血的血管。左右1對,共4條,兩條連接右肺,兩條連接左肺。肺靜脈異位引流是指肺靜脈未能直接與左心房連接,而與右心房或體靜脈系統連接的先天性心血管異位。肺靜脈淤血性肺動脈高壓,是由于肺靜脈內血液淤滯而引起的肺動脈高壓。正常情況下,肺循環具有血壓低、阻力小和順應性大的特點,肺動脈壓力高低取決于單位時間內肺動脈血流量和肺血管的阻力,要維持肺循環的低壓、低阻的狀態,必須保證整個肺循環系統的暢通無阻,血液順利地由肺動脈經毛細血管進入肺靜脈,再入左心室,經過左心室收縮進入體循環,才能避免肺動脈內壓力升高。肺大靜脈平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態學特征和生長特點。該細胞參與血管壁炎癥反應,保持靜脈管腔的通暢,還是多數動脈疾病的靶細胞。
方法簡介:
公司實驗室分離的人肺大靜脈平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
質量檢測:
公司實驗室分離的人肺大靜脈平滑肌采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶。
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內狀態
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
原代細胞一般傳至10代左右,大部分細胞衰老死亡,但是有極少數的細胞能夠度過“危機"而繼續傳下去,存活的細胞一般能夠傳到40-50代,叫細胞株。當50代以后又會出現“危機",這時有部分細胞的遺傳物質發生了改變且帶有癌變的特點,從而可能無限制地傳代下去,稱為細胞系。
也有認為細胞系指原代細胞培養物經傳代成功后所繁殖的細胞群體。也指可長期連續傳代的培養細胞。由此便引申出了后來的有限細胞系、無限細胞系,因此,細胞系狹義的是指可連續傳代的細胞,廣義是指可傳代的細胞。而細胞株是通過選擇法或克隆形成法,從原代培養物或細胞系中獲得具有特殊性質或標志物的單一細胞稱為細胞株。
細胞系具有容易培養、種類多、價格便宜、無限傳代等優點,也非常容易在培養、凍存中發生錯誤鑒定及交叉污染的問題。
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NA重組甲型流感 H5N1 神經酶 (Neuraminidase / NA) (H274Y mutation) (高活性) Protein
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GFRA2重組人 GFRA2 / GFRα2 / GDNFRB 蛋白 (His 標簽) Protein
CCL13 Protein Human 重組人 CCL13 / MCP-4 蛋白 (His 標簽)
ESAM Protein Human 重組人 ESAM / Endothelial Cell Adhesion Molecule 蛋白
人肺大靜脈平滑肌細胞Ractopamine/KLH 萊克多巴胺與血藍蛋白偶聯物 1mgRactopamine/KLH 萊克多巴胺與血藍蛋白偶聯物
CCL13 Protein Human 重組人 CCL13 / MCP-4 蛋白 (His 標簽)
NA重組甲型流感 H5N1 神經酶 (Neuraminidase / NA) (H274Y mutation) (高活性) Protein
ESAM Protein Human 重組人 ESAM / Endothelial Cell Adhesion Molecule 蛋白
GFRA2重組人 GFRA2 / GFRα2 / GDNFRB 蛋白 (His 標簽) Protein
原代細胞培養的具體步驟:
1、準備:取各種已消毒的培養用品置于凈化臺面,紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2、布局:點燃酒精燈,安裝吸管帽。
3、處理組織:把組織塊置于燒杯中,用Hanks液漂洗2-3次,去除血污;如懷疑組織可能污染,可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。
5、消化:或用恒溫水浴,或置于37℃溫箱消化均可,消化中每隔20分鐘應搖動一次,如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。
6、分離:在消化過程中見消化液發混濁時,可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察,如組織已分散成細胞團或單個細胞,立即終止消化,隨即通過適宜不銹鋼篩,濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速(500-1000轉/分)離心消化液5分鐘,吸出上清,加入適量含有血清的培養液。
7、計數:用計數板計數,如細胞懸液細胞密度過大,再補加培養液調整后,分裝入培養瓶中。對大多數細胞來說,pH要求在7.2-7.4范圍,培養液呈微紅色,如顏色偏黃,說明液體變酸,可用NaHCO3調整。
8、培養:置于37℃溫箱培養,如用CO2溫箱培養,瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞,紗布塞易生霉菌,每次換液時需要換新塞。