小鼠穿孔素;成孔蛋白(PF;PFP)ELISA測定試劑盒廠家
產品規格：48孔（T）/96孔（T）
品牌：仁捷生物
代測服務:全程ELISA實驗技術指導，免費代做實驗（從標本收集、保存、預試驗、實驗、數據分析等全實驗過程提供完整的技術指導。）
特點：重復性好、靈敏性高、特異性強
運輸：快遞（生物干冰或冰袋運輸）2-3天。

我司ELISA試劑盒檢測樣本齊全：(Human,Rat,Mouse,Rabbit,Monkey, Pig……)用于測定血清，血漿，組織及相關液體等樣本。

小鼠穿孔素;成孔蛋白(PF;PFP)ELISA測定試劑盒廠家操作注意事項:
1）試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
2）實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
3）不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
4）使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
5）使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6）洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
7）底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
8）加入試劑的順序應*，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
9）按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

小鼠穿孔素;成孔蛋白(PF;PFP)ELISA測定試劑盒廠家上海仁捷生物科技有限公司“質量是企業是生命之源”，選購ELISA檢測試劑盒，優勢如下：  

（1）*抗體——高效、靈敏、特異  

（2）規范包被操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高  

（3）*的優化方案——回收利用率高、可靠性強  

（4）適用于體液、組織勻漿，細胞培養上清液、尿液等各種類型的樣本。

（5）可檢測指標齊全：生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質金屬蛋白酶等等X

我司ELISA試劑盒樣本處理方法匯總表及計算解析：

一、液體樣本
液體樣本處理原則：所有的液體樣本，用無菌管收集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉/分），如果以后碰到其他的液體樣本，也按這個方法，納入匯總表。
1、血清：用無菌管收集，室溫血液自然凝固10-20分鐘，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉/分），仔細收集上清，保存過程中如出現沉淀，應再次離心。
2、血漿：應根據標本的要求選擇EDTA、*或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉/分），仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。
3、尿液：用無菌管收集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
4、胸腹水：用無菌管收集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉/分），仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
5、腦脊液：用無菌管收集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉/分），仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
6、唾液：用無菌管收集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉/分），仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
7、細胞培養上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉/分），仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
8、牛奶：用無菌管收集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉/分），仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
9、蜂蜜：用無菌管收集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉/分），仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
10、全血：用含有抗凝劑的無菌管收集，立即輕輕搖動，來回輕輕顛倒數次，使血液和抗凝劑混勻，以防血液凝固。 

二、固體樣本
 固體樣本處理原則：稱取1g的固體樣本，用9g的合適緩沖液溶解，分泌蛋白可以直接離心取上清檢測，細胞內的蛋白，要先收集細胞，再用合適方法破碎，離心取上清測試。
1、組織標本：切割標本后，稱取1g組織，加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS，用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分），仔細收集上清。分裝一份待檢測，其余冷凍備用，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。對于植物組織，不好勻漿的話，就在液氮中充分研磨；

2、細胞內蛋白樣本
許多待測蛋白不是分泌蛋白，而是存在于細胞內的蛋白，這個時候，要先收集細胞，洗滌干凈，再破碎細胞，離心取上清。
（1）培養的細胞
A、動物細胞：用PH7.2-7.4的PBS稀釋細胞懸液，使細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融（如果反復凍融，破碎效果不好，就采用超聲波破碎），以使細胞破壞并放出細胞內成份。2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉/分），仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
B、植物細胞：用PH7.2-7.4的PBS稀釋細胞懸液，使細胞濃度達到100萬/ml左右，置于冰盒上，用超聲破碎儀，設置破碎2s，冷卻30s的方式，充分破碎細胞，以使細胞破壞并放出細胞內成份。2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉/分），仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（2）組織的細胞
切割標本后，稱取1g組織，加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS，用手工或勻漿器將標本勻漿充分。2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉/分），去除上清，再用pH7.2-7.4左右的PBS小心洗滌沉淀的細胞三遍。再用上述的細胞破碎方法破碎細胞。
3、土壤：稱取1g土壤，加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS，用手工將標本充分混勻。2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉/分），仔細收集上清。分裝一份待檢測，其余冷凍備用，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。如果是測分泌蛋白，直接取上清檢測，測試細胞內蛋白，要破碎細胞。
4、*：加入2g的pH7.2-7.4左右的PBS，溶解*頭部，搖勻，用鑷子取出*并擠干液體，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉/分），仔細收集上清。分裝一份待檢測，其余冷凍備用，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。如果是測分泌蛋白，直接取上清檢測，測試細胞內蛋白，要破碎細胞。
5.植物標本中相關酶或蛋白的測定：（粗提取）
1、新鮮植物組織請在液氮中充分研磨；
2、加入樣品體積9倍的提取液（pH?7.4PBS緩沖液）,3、請于4度，8000rpm，離心30分鐘，取上清并暫時保存于4度待用。 

三、樣本收集注意事項
1、不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
2、標本采集后盡快進行實驗，若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。
3、我們羅列的是通用的樣本處理方法，無法涵蓋各種樣本，對于一些特殊樣本，建議實驗人員多參考已發表的文獻，自行設計合理的樣本處理方法。

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計算方法示例：繪制標準曲線：在Excel工作表中，以標準品濃度作橫坐標，對應OD值作縱坐標，繪制出標準品線性回歸曲線，按曲線方程計算各樣本濃度值。將樣本的OD值為X值代入方程式，所得的Y值即是我們的樣本值。（如下圖所示）