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ELISA試劑盒樣本前處理是酶聯(lián)免疫試驗中要害的一步,稍有不小心將致使試驗滿盤皆輸。那么到底該如何才能方便的處理樣本又安全呢?勁馬實驗為您分析ELISA試劑盒樣本處理五部曲助您試驗。
一、均質:
安排樣本:肉、肝食品類切細,用絞肉機重復絞碎,混合均勻。
水產(chǎn)樣本:去掉樣品的非食用有些,食用有些切細,用均質器均漿;質料外表較臟時,需適當用蒸餾水清潔。
蛋類:鮮蛋去殼,蛋黃和蛋白充沛混勻。
生果、蔬菜類:先用水洗去泥沙,然后除掉外表的水分,取食用有些。
二、振動獲取:
將獲取溶劑參加到裝有樣品的具塞容器中,振動,使獲取溶劑與容器內(nèi)的樣品充沛觸摸以深化到樣本安排內(nèi)部,獲取待測組分。
1.振動辦法:振動器上進行上下、往復式振動、手搖式上下振動。
2.在安排樣本中參加有機溶劑之間獲取時,應邊加邊振動,避免安排凝聚成團,不利于獲取。
三、ELISA試劑盒乳化景象:
在用有機溶劑獲取過程中,假如呈現(xiàn)乳化景象,處理的辦法有:①用細頭悄悄的拌和,損壞乳化后,再重復離心。②再參加適當?shù)墨@取劑,重新振動。留意離心后要確保樣本的稀釋倍數(shù)不變。
四、濃縮:
由于凈化過程中引進的溶劑,可能會下降待測組分的濃度或許不適宜直接分析,需求去掉悉數(shù)有機溶劑。即試劑盒前處理過程中把樣本在60℃氮氣下吹干,再用復溶液溶解枯燥殘留物。
濃縮辦法:氮氣吹干除雜、壓縮空氣吹干除雜。
留意:
1.在吹干樣本之前,用甲醇清潔針頭,避免雜質攪擾。
2.在吹樣本時,針頭應在液面上空,避免與樣本觸摸,避免發(fā)生穿插污染。
3.樣本吹干后應當即取下,避免吹的時間過長,影響終究檢查結果。
4.不一樣的藥物,吹干后樣本的保質期不一樣,提倡待樣本回到室溫后當即復溶。
五、凈化:
經(jīng)過ELISA試劑盒獲取的待測組分中一般富含一些會攪擾試劑盒中抗原抗體反響的雜質或許是富含與待測物結構類似的雜質。將待測組分與雜質分離的過程,一般稱為試劑盒中樣本的凈化。在咱們現(xiàn)有的試劑盒前處理辦法中涉及到的zui常見的凈化是:液液分配法。
比方:用復溶液溶解枯燥殘留物之前先參加適當?shù)恼和椋趨⒓诱和楹蛷腿芤簻u動后假如呈現(xiàn)乳化景象,能夠60℃水浴加熱,至乳化景象不見或削弱后,加大離心轉速進行離心。
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