背景介紹:This gene encodes a nuclear protein involved in homologous recombination, omere length maintenance, and DNA double-strand break repair. By itself, the protein has 3' to 5' exonuclease activity and endonuclease activity. The protein forms a complex with the RAD50 homolog; this complex is required for nonhomologous joining of DNA ends and possesses increased single-stranded DNA endonuclease and 3' to 5' exonuclease activities. In conjunction with a DNA ligase, this protein promotes the joining of noncomplementary ends in vitro using short homologies near the ends of the DNA fragments. This gene has a pseudogene on chromosome 3. Alternative splicing of this gene results in two transcript variants encoding different isoforms.
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DNA損傷關(guān)鍵蛋白Mre11抗體,Anti-Mre11抗體-上海研盟生物有限公司優(yōu)質(zhì)*產(chǎn)品。我公司銷售國內(nèi)外科研產(chǎn)品,如生物試劑、生化試劑,一抗二抗,各種標記抗體,Elisa酶聯(lián)免疫試劑盒,放免試劑盒,培養(yǎng)基,各種動物血清等產(chǎn)品,歡迎廣大新老客戶前來咨詢訂購。
中文名稱:DNA損傷關(guān)鍵蛋白Mre11抗體
英文名稱:Anti-Mre11 antibody
規(guī)格:0.1ml/0.2m
濃度:1mg/1ml
抗體來源:本公司抗體有兔來源和鼠來源等
克隆類型:兔來源為多抗,鼠來源為單抗
產(chǎn)品類型:一抗
DNA損傷關(guān)鍵蛋白Mre11抗體,Anti-Mre11抗體簡單介紹:
別 名:HNGS1; Mre 11; MRE 11a; MRE 11b; MRE11 homolog 1; MRE11 meiotic recombination 11 homolog A; MRE11a; MRE11b; AT like disease; Ataxia angiectasia disorder like; Ataxia-angiectasia disorder-like; ATLD; DNA recombination and repair protein; Double strand break repair protein MRE11A; Double-strand break repair protein MRE11A; endo/exonuclease Mre11. HNGS1; meiotic recombination (S. cerevisiae) 11 homolog A; meiotic recombination 11 homolog A (S. cerevisiae); meiotic recombination 11 homolog A; MmMRE11A; MRE11_HUMAN.
此產(chǎn)品本公司有標記的一抗出售,相關(guān)標記有:Alexa Fluor 350 標記、Alexa Fluor 488 標記、Alexa Fluor 555 標記、Alexa Fluor 647 標記、AP標記、APC標記、Biotin標記、Cy3標記、Cy5標記、Cy5.5標記、Cy7標記、FITC標記、Gold標記、HRP標記、PE標記、PE-Cy3標記、PE-CY5標記、PE-CY5.5標記、PE-CY7標記、RBITC標記
各種HRP酶標記成抗體的效價測定程序如下(如:羊抗鼠IgG-HRP的效價測定):
1、抗原包板:15ug/ml 小鼠IgG-pH9.6·CB液 0.1ml/孔;
2、37°C包被60min或4°C過夜;
3、PBST洗板3次,5min/次;
4、加入倍比稀釋的HRP標記抗體 0.1ml/孔;
5、37°C 30min;
6、PBST洗板5min/次×3;
7、底物液0.1ml/孔 37°C 5-10min;
8、終止液:2N H2SO4 0.05ml/孔;
9、450nm 測定OD值;
陽性OD值比對照值大3倍,為判斷效價稀釋度。
免疫印跡法是一種通過凝膠電泳分離蛋白質(zhì)并通過電轉(zhuǎn)移把蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到吸附膜上。一經(jīng)蛋白印跡后,即可通過特異性的標記抗體檢測到相應蛋白質(zhì)。
十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)可用于檢測已被SDS化學變性的蛋白。然而,某些特定的抗體不會在一個變性的蛋白質(zhì)分子上識別其抗原表位,這時需要進行不含SDS的聚丙烯酰胺凝膠電泳。
蛋白印跡轉(zhuǎn)膜可以通過濕法或半干法進行。在前者,凝膠夾在印跡膜和各種過濾裝置中間,然后把整個裝置埋進一個裝滿Tris轉(zhuǎn)移緩沖的電極槽中。在后者,夾在中間的凝膠周圍只有少量的緩沖液,然后封閉在電極板之間。雖然半干法轉(zhuǎn)膜較快,但需要很好地擬合各部分的夾層配件,而濕法轉(zhuǎn)膜很少會出現(xiàn)問題,可以盡量保持重復實驗結(jié)果的*性。此外,如果半干法轉(zhuǎn)膜時間過長,較小分子量的蛋白質(zhì)可能會從膜上轉(zhuǎn)過。
轉(zhuǎn)膜后,需對膜進行封閉,以減少非特異性蛋白結(jié)合,然后進行用一抗孵育膜,以研究感興趣的目標蛋白。單克隆抗體通常具有更高的特異性;然而許多單克隆抗體產(chǎn)生于某個特定肽段而不是一個天然蛋白質(zhì),因此可能無法檢測到PAGE所分離的天然蛋白。也可使用多克隆抗體,但易形成較高的背景值。因一抗通常無標記,所以需要一個可以結(jié)合在一抗Fc段的標記的二抗,以用于zui后的檢測。通常會用酶來標記二抗。酶標記后的印跡可通過化學發(fā)光酶底物及放射自顯影技術(shù)成像。被抗體檢測和標記到的蛋白質(zhì)會出現(xiàn)在圖像的暗區(qū)。
斑點印跡法類似于免疫印跡法,在膜上檢測目標蛋白;但是斑點印跡法中檢測的蛋白質(zhì)不用電泳進行分離。取而代之的是,含有目標蛋白的樣品被直接“點”到膜上,這不能做到定量檢測,但它可以直接檢測某種特定蛋白的有無。例如,斑點印跡法可用于檢測蔗糖梯度分離的細胞裂解產(chǎn)物中的某些蛋白質(zhì)定位。
DNA損傷關(guān)鍵蛋白Mre11抗體保存條件:Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
避免反復凍融,保質(zhì)期一年。
免疫印跡試驗常見的問題及原因
微弱的條帶(weak single)
可能存在的原因:蛋白與抗體結(jié)合率低
解決方法:較少洗膜次數(shù)或者縮短洗膜時間;
降低洗膜液中NaCl的濃度(0.15M-0.5M);
降低抗體稀釋液中NaCl的濃度(0.15M-0.5M)
可能存在的原因:抗體量不足
解決方法:抗體和蛋白的結(jié)合較低,可將抗體濃度調(diào)整至初始濃度的2-4倍
可能存在的原因:蛋白量不足
解決方法:增加蛋白上樣量
可能存在的原因:酶和底物時效
解決方法:將酶和底物進行反應,觀察現(xiàn)象,出現(xiàn)異常,則需要重新標記或者購買
可能存在的原因:過期或者陳舊的ECL發(fā)光液
解決方法:更換的新的ECL發(fā)光液
可能存在的原因:脫脂奶粉可能會掩蓋一些抗原
解決方法:降低牛奶的百分比或者用BSA代替
相關(guān)優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品:
Anti-Anillin抗體,胞環(huán)蛋白肌動蛋白結(jié)合蛋白抗體
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