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英文名稱 | Rat (DPD) ELISA Kit | ||
中文名稱 | 大鼠脫氧吡啶酚(DPD)ELISA試劑盒 | ||
貨號(hào) | YMR30872 | 種屬 | Rat/大鼠 |
規(guī)格 | 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips) | ||
檢測(cè)方法 | 雙抗體夾心法以及雙抗體一步夾心法(來(lái)電索取說(shuō)明,客戶自行選擇) | ||
檢測(cè)范圍 | 添加索取說(shuō)明書查看 | 靈敏度 | 添加索取說(shuō)明書查看 |
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大鼠脫氧吡啶酚(DPD)ELISA試劑盒操作步驟
方法一 用于檢測(cè)未知抗原的雙抗體夾心法:
1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃過(guò)夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱洗滌,下同)。
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。
3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時(shí),洗滌。
4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“ "、“-"號(hào)表示。也可測(cè)O·D值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔O·D值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽(yáng)性。
方法二 用于檢測(cè)未知抗體的間接法:
用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過(guò)夜。次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照)于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法"的4、5、6。
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技術(shù)問(wèn)答:
問(wèn):人鼻咽癌癌基因抗體能和人鼻咽癌細(xì)胞表面的抗原結(jié)合嗎
答:可以
問(wèn):我就是要做免疫組化實(shí)驗(yàn) 樣本是綿羊 需要鼠抗綿羊1型和3型膠原蛋白抗體,二抗是*標(biāo)記綿羊抗小鼠IgG 山羊血清和DAB顯色試劑盒都有 想用SABC法做免疫組化實(shí)驗(yàn) 還需要買些什么呢?
答:我們的免疫組化試劑盒整套基本齊全了,不需要再另外購(gòu)買什么了,再就是TBS和PBS緩沖液需要自行購(gòu)買了,這些都不是主要的,一般實(shí)驗(yàn)室都配有的
問(wèn):我自己包被檢測(cè),我實(shí)驗(yàn)采用免疫夾心法檢測(cè)HBs Ag,因此需要兩個(gè)HBs Ag抗體,這兩個(gè)抗體分別要與HBs Ag抗原上的不同抗原決定簇作用,有符合條件的抗體出售嗎
答:有的,一個(gè)抗體包被,另一個(gè)抗體我們用HRP標(biāo)記好了,一抗是兔源,二抗羊源