人載脂蛋白B48(ApoB48)ELISA科研試劑盒操作步驟
方法一 用于檢測(cè)未知抗原的雙抗體夾心法:
1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱洗滌,下同)。
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔)。
3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時(shí),洗滌。
4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“ "、“-"號(hào)表示。也可測(cè)O·D值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔O·D值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽性。
方法二 用于檢測(cè)未知抗體的間接法:
用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜。次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對(duì)照)于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法"的4、5、6。
產(chǎn)品介紹:
產(chǎn)品名稱:人載脂蛋白B48(ApoB48)ELISA科研試劑盒
英文名稱:Human ApoB48 ELISA Kit
產(chǎn)品編號(hào):YMH12076
人ApoB48試劑盒產(chǎn)品規(guī)格:
48T(48T檢測(cè)雙標(biāo)準(zhǔn)的可以檢測(cè)37個(gè)樣本,其他有10個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品孔,1個(gè)空白對(duì)照。48T檢測(cè)單標(biāo)準(zhǔn)可以檢測(cè)40個(gè)樣本,其他有7個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品孔,1個(gè)空白對(duì)照。 )
96T(96T檢測(cè)雙標(biāo)準(zhǔn)的可以檢測(cè)85個(gè)樣本,其他有10個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品孔,1個(gè)空白對(duì)照。96T檢測(cè)單標(biāo)準(zhǔn)可以檢測(cè)90個(gè)樣,7個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品控 1個(gè)空白對(duì)照。)
人載脂蛋白B48試劑盒技術(shù)問答:
問:我需要選2個(gè)排斥表達(dá)高的免疫因子,可以*一下嗎?
答:IL-4、IL-5,il-2,這個(gè)免疫應(yīng)答機(jī)制中的抗炎因子類型,也是比較關(guān)鍵的指標(biāo)。這個(gè)指標(biāo)的選取,要跟老師本身的目的來的
問:請(qǐng)問,你們移植排斥因子都有哪些試劑盒,免疫排斥一般選哪兩個(gè)
答:HLA-Ⅰ和Ⅱ,IL-4、IL-5,il-2,直接影響就是前面2個(gè)指標(biāo)后面都是免疫應(yīng)答,根據(jù)老師自己情況來選擇
問:HLA-G5 這個(gè)指標(biāo)是有排斥反映的人高還是沒有排斥的人血清中濃度高?
答:高好,也就是這個(gè)指標(biāo)越高,耐受越好
問:你們公司能測(cè)抗氧化作用的指標(biāo)的試劑盒有哪些啊?
答:MDA、活性氧(ROS)、過氧化氫酶(CAT)、總抗氧化能力(T-AOC)、脂質(zhì)過氧化物(LPO),SOD,還原型*(GSH),*過氧化酶(GSH-Px)等
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