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人脂肪分化相關(guān)蛋白(ADRP)ELISA試劑盒技術(shù)流程：

雙抗體夾心法(檢測(cè)未知抗原)

間接法(檢測(cè)未知抗體)

1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃ 過(guò)夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。
3、加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。
4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。
5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽(yáng)性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽(yáng)性。

1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1-10ug/ml，每孔加0.1ml，4℃過(guò)夜。次日洗滌3次。
2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照)
3、加酶標(biāo)抗體：于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.05ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。
5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽(yáng)性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽(yáng)性。

產(chǎn)品介紹：

產(chǎn)品名稱(chēng)：人脂肪分化相關(guān)蛋白(ADRP)ELISA試劑盒

英文名稱(chēng)：Human ADRP ELISA Kit

產(chǎn)品編號(hào)：YMH12121

人ADRP試劑盒產(chǎn)品規(guī)格：

48T(48T檢測(cè)雙標(biāo)準(zhǔn)的可以檢測(cè)37個(gè)樣本，其他有10個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品孔，1個(gè)空白對(duì)照。48T檢測(cè)單標(biāo)準(zhǔn)可以檢測(cè)40個(gè)樣本，其他有7個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品孔，1個(gè)空白對(duì)照。 )

96T（96T檢測(cè)雙標(biāo)準(zhǔn)的可以檢測(cè)85個(gè)樣本，其他有10個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品孔，1個(gè)空白對(duì)照。96T檢測(cè)單標(biāo)準(zhǔn)可以檢測(cè)90個(gè)樣，7個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品控 1個(gè)空白對(duì)照。）

人脂肪分化相關(guān)蛋白試劑盒處理及要求：

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。

2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。3. 尿液：用無(wú)菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。

人脂肪分化相關(guān)蛋白(ADRP)ELISA試劑盒相關(guān)產(chǎn)品目錄：

抗平滑肌抗體(ASMA) ELISA試劑盒，96T/48T科研實(shí)驗(yàn)
抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)ELISA試劑盒，96T/48T科研實(shí)驗(yàn)
纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA試劑盒，96T/48T科研實(shí)驗(yàn)
纖溶抑制因子/*激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA試劑盒，96T/48T科研實(shí)驗(yàn)
子白介素2(IL-2)ELISA試劑盒，96T/48T科研實(shí)驗(yàn)
血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒，96T/48T科研實(shí)驗(yàn)
血清一氧化氮(NO)ELISA試劑盒，96T/48T科研實(shí)驗(yàn)
補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISA試劑盒，96T/48T科研實(shí)驗(yàn)
p物質(zhì)(SP)ELISA試劑盒，96T/48T科研實(shí)驗(yàn)
子層連蛋白/板層素(LN)ELISA試劑盒，96T/48T科研實(shí)驗(yàn)
*(cAMP)ELISA試劑盒，96T/48T科研實(shí)驗(yàn)
子脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒，96T/48T科研實(shí)驗(yàn)