常用抗體標記熒光染料的特性及其應用
1、FITC:激發波長488nm,zui大發射波長525nm。
1)其標記的抗體適用于所有配備488nm氬離子激光器的流式細胞儀;
2)在流式細胞儀的FL1通道檢測;
3)可用于熒光顯微鏡技術
4)熒光強度易受PH值影響,PH值降低時其熒光強度減弱。
2、Alexa Fluor 488:激發波長488nm,zui大發射波長519nm。
1)其標記的抗體適用于所有配備488nm氬離子激光器的流式細胞儀;
2)在流式細胞儀的FL1通道檢測;
3)具有超乎尋常的光穩定性,非常適用于熒光顯微鏡技術;
4)在較寬的PH值范圍內保持穩定(PH4~10)。
3、Cy3:激發波長488nm,zui大發射波長570nm。
1)其標記的抗體適用于所有配備488nm氬離子激光器的流式細胞儀;
2)在流式細胞儀的FL2通道檢測;
3)適用于熒光顯微鏡技術;
4)為小分子染料,非常適合需小分子染料的流式細胞術,熒光強度低于PE。
4、Cy5:激發波長633/635nm,zui大發射波長670nm。
1)其標記的抗體適用于所有配備633nm氬離子激光器的流式細胞儀;
2)在流式細胞儀的FL4通道檢測;
3)適用于熒光顯微鏡技術;
4)同樣為小分子染料,非常適合需小分子染料的流式細胞術,熒光強度低于APC。
5)與單核和粒細胞非特異性結合多,易出現假陽性結果。
5、PE:激發波長488nm,zui大發射波長575nm。
1)其標記的抗體適用于所有配備488nm氬離子激光器的流式細胞儀;
2)在流式細胞儀的FL2通道檢測;
3)其熒光泯滅性強,不適用于傳統的熒光顯微鏡技術,但適用于激光共聚焦顯微鏡技術。
6、PE-TR:激發波長488nm,zui大發射波長615nm。
1)在Beckman Coulter流式細胞儀的FL3通道檢測;
2)可適用于小功率激光器的流式細胞儀,也可使用于大功率激光器的大流式細胞儀。
7、PE-Alexa Fluor 610:激發波長488nm,zui大發射波長628nm。
1)在Beckman Coulter流式細胞儀的FL3通道檢測;
2)熒光強度高;
3)可適用于小功率激光器的流式細胞儀,也可使用于大功率激光器的大流式細胞儀。
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