植物胡蘿卜素(Carotene)ELISA試劑盒等江蘇科晶生物科技有限公司ELISA試劑盒(酶聯免疫分析試劑盒)人、大鼠、小鼠、豚鼠、牛、豬、犬、馬、雞等各種ELISA試劑盒及各種動物的血清和各種抗原抗體，產品種類繁多、貨物齊全，效果穩定、靈敏度高、特異性強，免費提供代測服務。電子版ELISA試劑盒(酶聯免疫分析試劑盒)說明書免費贈送，且免費提供產品報價、用途、規格等方面的咨詢。如有需要我們將竭誠為您服務！

科晶生物植物胡蘿卜素(Carotene)ELISA試劑盒等ELISA試劑盒產品常見技術指南：

1、選擇抗體時選擇一個單抗和一個多抗進行配對；若選擇兩個單抗，必須識別不同表位的抗體；從同一家公司選擇抗體對。

2、ELISA實驗中為了確定好的信號和zui低背景應將捕獲抗體（0.5-4μg/ml）和檢測抗體（0.25-2μg/ml）在預實驗中進行彼此相抗的滴定。同時，應包括在適當范圍內的標準品的系列稀釋。按試劑說明書常規提供的范圍進行操作。

3、標準品的配制：對于每種細胞因子應仔細閱讀說明書，注意每批的細節。在使用細胞因子前，瞬時離心試劑瓶，盡可能多地收回其中的細胞因子。根據每批說明書中的細節，將凍干的細胞因子復溶。

4、一般待測抗原標準曲線的線性范圍的可通過將標準品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml 到15pg/ml。可利用標準的ELISA操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統可在一定范圍內提高靈敏度。

5、為了優化靈敏度，建議過夜孵育標準品和標本。

6、若使用過氧化物酶作為顯色系統，應嚴禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉，疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性。

7、當測定混合液體中的抗原時，如血清，建議在標本稀釋液中加不相干的Ig。

目前市場上，植物胡蘿卜素(Carotene)ELISA試劑盒等ELISA試劑盒產品既有國產也有進口，數量繁多令人目不暇接，怎樣才能選出zui適用的產品呢？首先當然得根據我們所要檢測的分子進行檢測，除此以外也還有一些需要加以考量的因素。

1. 抗體類型

單克隆抗體和多克隆抗體都能夠用于ELISA，實際上有時候二者結合效果更好。例如，對于雙抗夾心法而言，用多抗進行捕獲而單抗進行檢測有時更有幫助。多抗能夠確保捕獲所有抗原，隨后單抗再特異性檢測擁有特定抗原表位的抗原。

雙抗夾心法ELISA中捕獲抗體與檢測抗體（不論多抗還是單抗）的配對很有講究。我們不希望捕獲抗體與檢測抗體競爭抗原上的同一位點，為此我們就需要確保捕獲抗體和檢測抗體所識別的抗原表位不存在重疊。如果捕獲抗體和檢測抗體之間發生了沖突，就會對實驗結果產生較大影響。要避免這一問題，我們可以選擇購買“matched pair"的捕獲/檢測抗體對，這些打包在一起的抗體是商家經過驗證才*的好組合。

2. 實驗類型

ELISA試劑盒有多種類型，不過它們都有一個共同特點，就是進行抗原捕獲。一般捕獲形式包括將抗原吸附到微孔板或者用微孔板上的抗體進行捕獲。In-cell ELISA和酶聯免疫斑點ELISPOT是兩種特殊的類型，In-cell ELISA需要將微孔板中培養的細胞進行固定和通透化，然后再用抗體原位檢測。ELISPOT有點像蛋白印跡Western blot，先在帶膜的微孔板中培養細胞，然后在膜上檢測細胞分泌的抗原形成斑點。此外，還需要根據自身需要選擇96孔板或是384孔板進行ELISA實驗。

通常人們使用雙抗夾心法進行ELISA實驗，雙抗夾心法中抗原被夾在捕獲抗體和檢測抗體之間，這種方法既靈敏又有效，受到了許多研究者的青睞。不過有時候雙抗夾心法并不是通用的選擇，例如有時候抗原特別小讓兩個大抗體難以附著，又或者抗體只有一個抗體結合位點。在上述情況下，競爭性ELISA就更為適用，這種方法是采用帶標記的純化抗原與樣本中無標記的抗原進行競爭，以結合捕獲抗體。

3. 檢測方式

如今檢測ELISA有許多途徑，我們可以根據自己的偏好進行選擇。一般ELISA檢測的是酶促反應的可溶性產物，抗體上結合有相應的酶（例如通常使用的辣根過氧化物酶HRP），而反應體系中添加有相應的底物（如3，3-二氨基聯苯胺DAB）。這種酶促反應生成具有特征性的顏色，可以通過分光光度計進行檢測，堿性磷酸酶AP也是一種常用酶。酶可以結合在一抗上，也可以結合在二抗上，還可以使用鏈霉親和素標記的酶與親和素標記的一抗結合。此外ELISA的結果檢測還包括放射性檢測、熒光檢測、化學發光或顯色法檢測等。

4. 交叉反應

如果抗體間發生沖突或交叉反應就會影響整個實驗的特異性。其中抗體來源所帶來的兼容性就是交叉反應的一個因素。盡管現在購買源自動物的抗體越來越容易，我們仍有必要確認一下是否會產生交叉反應的問題。在用雙抗夾心法進行ELISA檢測時，檢測用的二抗必須特異性針對檢測一抗，而不能與捕獲抗體起反應。如果檢測用二抗與捕獲抗體結合，實驗特異性就會大打折扣。通常我們選用源自不同宿主的捕獲抗體和檢測一抗，來避免上述問題。與此同時，了解試劑盒中提供的buffer也是有必要的（例如washing buffer和blocking buffer），以免這些buffer含有可能影響抗原抗體相互作用的組分，使檢測結果收到影響。