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更新時間:2017-03-01 11:45:16瀏覽次數(shù):138次
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人細胞周期素BELISA檢測試劑盒?問:elisa步驟?回答:用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:1. 包被:用0.05M PH9,碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml,在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃過夜.次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘.2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時.然后洗滌.(同時做空白孔
人細胞周期素BELISA檢測試劑盒?問:elisa步驟?回答:用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:1. 包被:用0.05M PH9,碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml,在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃過夜.次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘.2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時.然后洗滌.(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔).3. 加酶標抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml,37℃孵育0.1小時,洗滌.4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘.5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml.6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示.也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性.
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作者:Yudan Cao, Fangfang Cheng, Weifeng Yao, Beihua Bao, Kaicheng Zhang, Li Zhang and Anwei Ding. Toxicity of Pekinenin C from Euphorbia Pekinensis Radix on Rat Small Intestinal Crypt Epithelial Cell and Its Apoptotic Mechanism. Int. J. Mol. Sci. 2016, 17(6), 850;(IF:3.257)
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作者單位:江蘇中藥資源產(chǎn)業(yè)化過程協(xié)同創(chuàng)新中心,全國中藥資源產(chǎn)業(yè)化與配方創(chuàng)新醫(yī)學(xué)國家 與地方合作工程中心,南京中醫(yī)藥大學(xué)
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