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豬主要組織相容性復(fù)合體II類(MHCⅡ/SLAⅡ)elisa試劑盒

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更新時間:2016-12-14 15:45:21瀏覽次數(shù):487次

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豬主要組織相容性復(fù)合體II類(MHCⅡ/SLAⅡ)elisa試劑盒的制備要點(diǎn):

1、隨著人們對病原體感染與機(jī)體免疫應(yīng)答的逐步認(rèn)識,以抗原抗體特異反應(yīng)為基礎(chǔ)的,更為快速簡便的免疫檢驗(yàn)方法就應(yīng)運(yùn)而生了。
2、試驗(yàn)中各個操作步驟常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,希望能夠?qū)σ恍┏醪綄W(xué)習(xí)者有所幫助:這些難于采用傳統(tǒng)培養(yǎng)方法檢測的病原體感染診斷治療的要求,迫使人們必須去尋找其他的檢測途徑,直接的或是間接的。
豬主要組織相容性復(fù)合體II類(MHCⅡ/SLAⅡ)elisa試劑盒檢測方法概述:

1)  間接法測抗體:將特異性抗原包被在固相載體上,形成固相抗原,加入待檢標(biāo)本(含相應(yīng)抗體),其中抗體與固相抗原形成抗原-抗體復(fù)合物,再加入酶標(biāo)記的抗抗體(抗人免疫球蛋白抗體,亦稱二抗),與上述抗原-抗體復(fù)合物結(jié)合。此時加入底物,復(fù)合物上的酶則催化底物而顯色。

2)  雙抗體夾心法測抗原:將已知的特異性抗體包被在固相載體上,形成固相抗體,加入待檢標(biāo)本(含相應(yīng)抗原),抗原與固相抗體結(jié)合成復(fù)合物,再加入特異性酶標(biāo)抗體,使之與已形成的抗原-抗體復(fù)合物結(jié)合,當(dāng)加入與酶相應(yīng)的底物時,酶催化底而顯色,根據(jù)顏色的有無和顏色的深淺對待測抗原進(jìn)行定性和定量。

豬主要組織相容性復(fù)合體II類(MHCⅡ/SLAⅡ)elisa試劑盒競爭法測抗原:

1、將特異性抗體與固相聯(lián)結(jié),形成固相抗體,加入待測標(biāo)本(含相應(yīng)抗原)和相應(yīng)的一定量的酶標(biāo)抗原,待測標(biāo)本中的抗原和酶標(biāo)抗原競爭與固相抗體結(jié)合,待測標(biāo)本中抗原含量越高,則與固相抗體結(jié)合亦越多,使得酶標(biāo)抗原與固相抗體結(jié)合的機(jī)會就越少,甚至沒有機(jī)會結(jié)合。加入底物后不顯色或顯色很淺,顯色深者為陰性。
2、酶聯(lián)免疫試驗(yàn)的量反應(yīng)分析:不同的酶聯(lián)免疫方法檢測結(jié)果的OD值均與標(biāo)本中待檢的抗原或抗體的量相關(guān)(間接法和夾心法正相關(guān),競爭法負(fù)相關(guān)),因此可以利用OD值對標(biāo)本中的待檢物質(zhì)進(jìn)行定量分析。
3、酶聯(lián)免疫試驗(yàn)質(zhì)反應(yīng)分析:ELISA檢測試劑盒根據(jù)檢測標(biāo)本OD值,對標(biāo)本中待測物質(zhì)做出有或無的判定(即陽性反應(yīng)或陰性反應(yīng))

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