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上海研盟生物科技有限公司
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更新時間：2017-11-10 17:13:44瀏覽次數(shù)：80次
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“大鼠核因子κB受體活化因子配基（RANKL）ELISA試劑盒科研檢測 “進口原裝ELISA抗體對組裝，效果*，提供、免費代測服務(wù)，咨詢：
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大鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒科研檢測
操作步驟
方法一 用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:
1. 包被：用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg／ml。在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。(簡稱洗滌，下同)。
2. 加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔)。
3. 加酶標抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5～1小時，洗滌。
4. 加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。
5. 終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“ "、“-"號表示。也可測O·D值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔O·D值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。
方法二 用于檢測未知抗體的間接法：
用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg／ml，每孔加0.1ml，4℃過夜。次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法"的4、5、6。
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大鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒科研檢測簡單介紹：
品牌：進口/國產(chǎn)
英文名稱：Rat receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL Elisa Kit
產(chǎn)品規(guī)格：
48T(48T檢測雙標準的可以檢測37個樣本，其他有10個標準品孔，1個空白對照。48T檢測單標準可以檢測40個樣本，其他有7個標準品孔，1個空白對照。 )
96T（96T檢測雙標準的可以檢測85個樣本，其他有10個標準品孔，1個空白對照。96T檢測單標準可以檢測90個樣，7個標準品控 1個空白對照。）
產(chǎn)品用途：本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中待測物質(zhì)的含量。
產(chǎn)品特異性：本試劑盒可同時檢測天然或重組的，且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。
使用范圍：僅供科研使用，不得用于臨床。
有效期：6個月
保存條件：2-8℃
實驗原理：
1.本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中待測物質(zhì)水平。用純化的待測物質(zhì)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入待測物質(zhì)，再與HRP標記的待測物質(zhì)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測物質(zhì)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD 值），通過標準曲線計算樣品中待測物質(zhì)濃度。
2. 試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被待測物質(zhì)捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測物質(zhì)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。
大鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒科研檢測實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中待測物質(zhì)水平。用純化的待測物質(zhì)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入待測物質(zhì)，再與HRP標記的待測物質(zhì)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測物質(zhì)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD 值)，通過標準曲線計算樣品中待測物質(zhì)濃度。
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