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Anti-Smad4抗體,Smad4抗體

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更新時間：2017-01-15 14:56:52瀏覽次數：227次

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抗體（一抗）

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上海研盟生物科技有限公司

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產品簡介

“Anti-Smad4抗體,Smad4抗體"抗體規格0.1ml、0.2ml、1ml，抗體產品有效期一年，質保三個月，質保期內出現任何質量問題或是出不了實驗結果均可免費退換：

詳細介紹

上海研盟生物科技有限公司Anti-Smad4抗體,Smad4抗體*，主要應用于WB、IHC、IF、ELISA、流式細胞術等實驗中。說明書隨貨發送，您也可以直接我司在線客服索取。客服

簡單介紹：

中文名稱：Smad4抗體

英文名稱：Anti-Smad4

產品編號：byk-0585R

產品別名：Mothers against decapentaplegic homolog 4; (Small) Mothers Against Decapentaplegic; Deleted in Pancreatic Carcinoma; Deleted in pancreatic carcinoma locus 4; Deletion target in pancreatic carcinoma 4; DPC 4; DPC4; hSMAD4; JIP; MAD homolog 4; MAD mothers against decapentaplegic Drosophila homolog 4; MAD mothers against decapentaplegic homolog 4; MADH 4; MADH4; Med; Medea; Mothers against decapentaplegic homolog 4; Mothers against DPP homolog 4; OTTHUMP00000163548; Smad 4; SMAD family member 4; SMAD mothers against DPP homolog 4.

產品用途：科研實驗

產品價格：請報價

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抗體來源：該指標有兩種產品，一種是兔來源抗體，一種是鼠來源抗體

克隆類型：兔來源為多克隆抗體，鼠來源單克隆抗體

交叉反應：請索取說明書查看

性狀：Lyophilized or Liquid

濃度：1mg/1ml

亞型:IgG

純化方法: affinity purified by Protein A

儲存液: 0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol

保存條件: Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.

Anti-Smad4抗體,Smad4抗體產品介紹：Smad 4 is a member of the Mothers Against Dpp (MAD)-related family of proteins. So far, eight Smads have been identified and can be divided in 3 subgroups based on their structure and functions; pathway-restricted, common mediator and inhibitory Smad. Smad 4 is the common Smad (co-Smad). Previously identified as the tumor suppressor DPC4 (deleted in pancreatic carcinoma, locus 4), Smad 4 is functionally distinct among the Smad family, and is required for the assembly and transcriptional activation of diverse, Smad-DNA complexes. In contrast to the R-Smads, Smad 4 is not regulated by phosphorylation, but acts as a common mediator of TGF-Beta, activin, and bone morphogenetic protein signaling responses. Smad 4 is frequently inactivated in pancreatic, biliary and colorectal tumors.

Western-blotting試驗方法：
蛋白提樣品制備
1、將培養液吸入至15 ml離心管中，于2500 rpm離心5 min。
2、棄上清，加入5 ml PBS并用槍輕輕吹打洗滌，然后2500 rpm離心5 min。棄上清后用PBS重復洗滌一次。
3、用槍吸干上清后，加100 μl裂解液（含PMSF）冰上裂解30 min，裂解過程中要經常彈一彈以使細胞充分裂解。
4、將裂解液4℃、12000 rpm離心5 min，取上清分裝于0.5 ml EP管中并置于-20℃保存。
5、BCA法測蛋白濃度
SDS－PAGE電泳
1、玻璃板對齊后放入夾中卡緊，然后垂直卡在架子上準備灌膠。
2、按前面方法配10％分離膠，加入TEMED后立即搖勻即可灌膠。灌膠時，可用10 ml槍吸取5 ml膠沿玻璃放出，待膠面升到綠帶中間線高度時即可。然后膠上加一層水，液封后的膠凝的更快。（灌膠時開始可快一些，膠面快到所需高度時要放慢速度。操作時膠一定要沿玻璃板流下，這樣膠中才不會有氣泡。加水液封時要慢，否則膠會被沖變型。）
3、當水和膠之間有一條折射線時，說明膠已凝了。再等3 min使膠充分凝固就可倒去膠上層水并用吸水紙將水吸干。
4、按方法配4％的濃縮膠,加入TEMED后立即搖勻即可灌膠。將剩余空間灌滿濃縮膠后將梳子插入孔槽。灌膠時也要使膠沿玻璃板流下以免膠中有氣泡產生。插梳子時要使梳子保持水平。待到濃縮膠凝固后，兩手分別捏住梳子的兩邊豎直向上輕輕將其拔出。
5、用水沖洗濃縮膠，將其放入電泳槽中。
6、測完蛋白含量后，計算含20-50 μg蛋白（根據自己的實驗需要進行選擇，沒有固定的量）的溶液體積即為上樣量。取出上樣樣品至200 μl的EP管中，加入5×SDS 上樣緩沖液至終濃度為1×。上樣前要將樣品于沸水中煮5-10 min使蛋白變性。
7、加入足夠的電泳緩沖液后開始準備上樣。（電泳液至少要漫過內測的小玻璃板。）用微量進樣器貼壁吸取樣品，將樣品吸出不要吸進氣泡。將加樣器針頭插至加樣孔中緩慢加入樣品（包括一孔做可視的蛋白marker）。（加樣太快可使樣品沖出加樣孔，若有氣泡也可能使樣品溢出。加入下一個樣品時，進樣器需在外槽電泳緩沖液中洗滌數次，以免交叉污染）
8、電泳：濃縮膠時用80-100 V跑，到分離膠以后用150-200 V跑，總時間2 h左右，電泳至溴酚蘭剛跑出即可終止電泳，進行轉膜。

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