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上海研盟生物科技有限公司
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“大鼠基質金屬蛋白酶9/明膠酶B(Gelatinase B) ELISA試劑盒"進口原裝ELISA抗體對組裝,效果*,提供、免費代測服務,咨詢:
上海研盟生物科技有限公司鄭重承諾:凡在本公司購買的產品如有任何質量問題,我們進行免費退換。合同上注明了的.(質量問題包括運輸不當,客戶在使用過程中測不出結果,或結果不理想等等!)
大鼠基質金屬蛋白酶9/明膠酶B(Gelatinase B) ELISA試劑盒試劑盒質量保證是一個復雜的過程,許多重要的環節都影響到檢測的質量:
一、方法學的影響
ELISA測定模式包括以下幾種:雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競爭抑制法,其中競爭抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作時差所引起的不平競爭等因素的影響,結果重復性較差,質量較難控制。
二、試劑因素
不同批次的ELISA試劑在制作過程中很難保證質量**,即使是通過批批檢的項目其檢測結果也存在差異,因此必須選擇和訂購長批號的試劑,并保證保存條件。
三、樣本因素
標本干擾因素包括內源性干擾因素和外源性干擾因素,前者包括類風濕因子、補體、異嗜性抗體、自身抗體、*等,后者包括標本溶血、標本被細菌污染、標本貯存時間過長、標本凝固不全、冷凍標本的反復凍融等。
四、操作因素對小鼠腫瘤標志物(CA724)ELISA試劑盒結果的影響:加樣、溫育、洗滌、顯色、比色。
五、灰區的設置
通常情況下,ELISA定性實驗以“陽性"和“陰性"來報告結果,兩者間有一條分界線被稱為“陽性判斷值"(cut-off value,CO值),這是定性免疫測定結果報告的依據。
六、標本復查
ELISA手工檢測過程復雜,影響因素較多,即使室內質控在控,也可能因孔間差異而造成結果的差異,因此加大復查力度是保證結果準確性的可靠方法。
七、結果判斷和報告
大鼠基質金屬蛋白酶9/明膠酶B(Gelatinase B) ELISA試劑盒簡單介紹:
品牌:進口/國產
英文名稱:Rat matrix metalloproteinase 9/Gelatinase B,MMP-9 Elisa Kit
產品規格:
48T(48T檢測雙標準的可以檢測37個樣本,其他有10個標準品孔,1個空白對照。48T檢測單標準可以檢測40個樣本,其他有7個標準品孔,1個空白對照。 )
96T(96T檢測雙標準的可以檢測85個樣本,其他有10個標準品孔,1個空白對照。96T檢測單標準可以檢測90個樣,7個標準品控 1個空白對照。)
產品用途:本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關液體樣本中待測物質的含量。
產品特異性:本試劑盒可同時檢測天然或重組的,且與其他相關蛋白無交叉反應。
使用范圍:僅供科研使用,不得用于臨床。
有效期:6個月
保存條件:2-8℃
實驗原理:
1.本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中待測物質水平。用純化的待測物質抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入待測物質,再與HRP標記的待測物質抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的大黃色。顏色的深淺和樣品中的待測物質呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD 值),通過標準曲線計算樣品中待測物質濃度。
2. 試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被待測物質捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測物質呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
大鼠基質金屬蛋白酶9/明膠酶B(Gelatinase B) ELISA試劑盒操作步驟:
1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。
2.根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。
3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的*標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
4.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
9.在450nm波長處測定各孔的OD值。
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